CULTIVO, SEROLOGÍA, PRUEBAS DE SENSIBILIDAD, TINCIÓN DE GRAM
Dra. Roxana Blanco Villarte
DOCENTE PATOLOGIA CLINICA Dra Roxana Blanco Villarte 1
CASO CLINICO
• Paciente de sexo masculino, 34 años de edad acude al servicio de urgencias inconsciente, piel y mucosas deshidratadas
• A referencia de familiar presento convulsiones
• Signos vitales: – PA 80/50 mmHg
– FR: 32 rpm
– T: 35ºC
– FC: 110 lpm
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CULTIVOS
• DETECTA BACTERIAS
• HONGOS
SEROLOGIA
• DETECTA VIRUS
• ACTUALMENTE PARASITOS Y BACTERIAS
TINCION GRAM
• DETECTA SOLO BACTERIAS
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CULTIVOS
UROCULTIVO
COPROCULTIVO
HEMOCULTIVO OTROS: CULTIVO DE
SECRECION DE HERIDA, SECRECION NASAL,
OCULAR, OIDO
CULTIVO DE HISOPEADO FARINGEO
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SE LO REALIZA DE CUALQUIER MUESTRA
SOLICITUD DE CULTIVOS
• VA A DEPENDER DE LA CLINICA QUE PRESENTA EL PACIENTE Y DEL CRITERIO MEDICO.
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HEMOCULTIVO
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Toma de Muestra:
• Preparación de la piel
LIMPIEZA CON ALCOHOL
70% ( 2 VECES MISMA DIRECCION)
ESCOGER SITIO VENOPUNCIÓN
SE RECOMIENDA LA MUESTRA INDEPENDIENTE DEL PICO FEBRIL
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Toma de Muestra:
• Volumen de la muestra
Bacteremias <1 a 10 UFC/ml a mayor volumen de muestra obtenido, mayor es la sensibilidad del examen
Se recomienda 3 MUESTRAS DE SANGRE
Relación volumen muestra y medio de cultivo= 1/5 a 1/10
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Adultos 10 ml
Pediátricos 3 a 5 ml
RN 1 a 3 ml
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FOCO
DE INFECCION
• Extravascular Vasos capilares Vías linfáticas • Intravascular Endocarditis (20-40%
mortalidad)
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HEMOCULTIVOS
¿Cuando solicitar Hemocultivos?
• Paciente febril sin Foco
• Estado de shock sin causas hemodinámicas
• Infecciones aparente o inaparente: Neumonía nosocomial, pielonefritis, meningitis, infección abdominal, infecciones complicadas piel
• Leucopenia o leucocitosis no relacionada con enfermedad Hematológica
• Paciente inmunodepremido
• Paciente usuario de catéter venoso
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DIFERENTES MORFOLOGÍAS COLONIALES
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Colonia Lactosa negativa
Colonia Lactosa positiva
MEDIO SELECTIVO Y DIFERENCIAL
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GRAM POSITIVO COAGULASA (+)
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COCO GRAM POSITIVO
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ANTIBIOGRAMA
• ES UTIL PARA DETERMINAR LA:
– SENSIBILIDAD
– RESISTENCIA
DE UN DETERMINADO GERMEN A LA TERAPEUTICA EMPLEADA
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ANTIBIOGRAMA
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ANTIBIOGRAMA
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TINCION GRAM
UTILIDAD DE LA TINCIÓN DE GRAM
• PERMITE ENTREGAR INFORME PRELIMINAR EN LAS
BACTEREMIAS
• ACELERAR EL INICIO DE TERAPIA ANTIBIOTICA
• ESCOGER O BIEN CAMBIAR TERAPIA EMPÍRICA
• DEFINE EL TIPO DE MEDIO DE CULTIVO ADECUADO PARA
AISLAMIENTO
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Frotis y fijación
1.- Poner una gota
de agua en un porta
2.- Tomar la muestra
con el asa de siembra
3.- Extender sobre el
agua y fijar a la llama
del mechero
Tinción
1.- Cubrir la
preparación con
Cristal Violeta 2’
2.- Añadir Lugol
(mordiente) durante 1’
3.- Decolorar con
Alcohol 96º hasta que
no suelte colorante
4.- Lavar con agua 5.- Teñir con Safranina 1’ 6.- Lavar con agua,
dejar secar y observar
al microscopio
Tinción de Gram
Lunes
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Tinción de Gram
Paso 1
Paso 2
Paso 3
Paso 4
Tinción del frotis Previamente fijado al calor,
con cristal violeta
Durante 1 minuto.
Todas las células se tiñen
de color azul-violeta.
Añadir Lugol,
dejar actuar 2 minutos
Todas las células siguen
de color azul-violeta.
Decolorar con alcohol Las células Gram +
siguen de color azul-violeta.
Las Gram negativas
se decoloran.
Tinción de contraste Con safranina 2 minutos.
Las células G+
se ven azul-violeta.
Las G- rosas o rojas.
Gram +
Gram - Dra Roxana Blanco Villarte 42
PROCEDIMIENTO COLORACION GRAM
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Cocos Gram - Bacilos Gram -
Tinción de Gram
Lunes
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Diferencias Gram positivos
y Gram negativos
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Gram positivos Gram negativos
Morfología bacteriana
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COCOS BACILOS
MORFOLOGÍA BACTERIANA
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Diplococos
Estreptococos
Estafilococos Dra Roxana Blanco Villarte 48
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SEROLOGIA
DEFINICION
• La serología es el estudio que permite comprobar la presencia de anticuerpos en la sangre.
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ELISA
INMUNOFLUORESCENCIA
WSTERN BLOT
AGLUTINACION
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VIRUS
PARASITOS
HONGOS
BACTERIAS
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PARASITOS TOXOPLASMOSIS CHAGAS TOXOCARIOSIS HIDATIDOSIS CISTICERCOSIS AMEBIASIS LEISHMANIASIS PALUDISMO
VIRUS HTLV 1 Y 2 HEPATITIS B,C, HIV RUBEOLA VIRUS EPSTEIN BARR
HONGOS CRIPTOCOCUS NEOFORMANS
BACTERIAS HELICOBACTER PYLORI TREPONEMA PALLIDUM
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CASO CLINICO
• En la reevaluación del paciente, una vez el paciente se encuentra fuera de peligro:
– Refiere antecedente de relaciones sexuales sin protección, sintomas B (+) los cuales incluyen fiebre, sudoración nocturna y perdida de peso aproximadamente 6 kilos, ademas presencia de deposiciones liquidas en varias oportunidades de consistencia liquida
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• Al examen físico presencia de placas blanquecinas en cavidad oral, adenopatias region cervical e inguinal de aproximadamente 5 x 2 cm, no dolorosas a la palpacion. No se palpa visceromegalias
• Pulmones se auscultan estertores crepitantes diseminados en ambos campos pulmonares
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QUE SOLICITO
• PANCULTIVOS (Hemocultivo, cultivo y ATB de hisopeado faringeo, coprocultivo y ATB, urocultivo)
• RX PA TORAX
• Serologia hepatitis B, C, HIV, chagas, VDRL
• Hemograma, quimica sanguinea
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• Cultivo de hisopeado faringeo se aisla candida albicans • Serologia HIV positivo • Coprocultivo se aisla proteus mirabilis sensible
ceftazidima, cefotaxima, imipenem, resistente a amoxcicilina, amoxicilina mas acido clavulanico
• RX PA torax compatible con imagen miliar sugestiva de Tuberculosis pulmonar
• Hemograma leucopenia de 3, 000 con neutrofilos absolutos de 1,000, anemia normocitica normocromica, trombocitopenia de 100,000
• Hipokalemia k 2,5 mEql Na 135 mEql
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GRACIAS
• PROXIMA CLASE LEER ANTICUERPOS ANTINUCLEARES, ANTI-ADN, FACTOR REUMATOIDEO
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