Estandarización de un modelo para la formación de biofilm
oral in vitro: Aplicaciones
Dr. Rubén León B.Dra. Vanessa Blanc P.
Introducción
La búsqueda de las claves involucradas en diferentes
fenómenos ha requerido la utilización:
- modelos biológicos in vitro animales
Objetivo principal
Desarrollar un modelo simplificado que permita conocer las características de las bacterias que habitan la cavidad oral y que se organizan en comunidades.
Metodología y Resultados
Las superficies de adhesión utilizadas fueron: Hidroxiapatita Titanio
Se utilizaron seis especies de bacterias orales: Streptococcus oralis Actinomyces naeslundii Veillonella parvula Fusobacterium nucleatum Aggregatibacter actinomycetemcomitans Porphyromonas gingivalis
Los biofilms se estudiaron mediante: Técnicas de cultivo Microscopía electrónica de barrido (SEM) Microscopía confocal (CLSM)
- Tinción de células vivas y muertas- FISH
PCR en tiempo real
Metodología y Resultados
Biofilm de 4 días analizado mediante SEM
Tinción de células vivas y muertas de un biofilm de 4 días analizada mediante CLSM
Metodología y Resultados
- 3/4 días de incubación Pico máximo de células vivas
- 7 días Número de células muertas > que de vivas
Especies más representadas:- S. oralis y A. naeslundii (primeras etapas de
formación de biofilm)- F. nucleatum y P. gingivalis (aumentan a partir
del 4º y 5º día )
Metodología y Resultados
Conclusiones- Se ha desarrollado un modelo, en flujo constante, para la formación de biofilm con bacterias orales.
- A los 3 a 4 días de formación de biofilm se observa el pico máximo de células vivas.
- Los primeros días de crecimiento predominan S. oralis y A. naeslundii.
- Al utilizar colutorios sobre los biofilms existen grandes diferencias entre las bacterias crecidas en forma planctónicas y biofilm.
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