Universidad Nacional de CajamarcaMETODOS DE SIEMBRA Y AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS
INTRODUCCION
En la naturaleza, los microorganismos se encuentran formando poblaciones mixtas con otros tipos de microorganismos. Los cultivos de estas mezclas se llaman por ello cultivos mixtos. Sin embargo, el conocimiento de los microorganismos se consigue mediante el estudio de cepas aisladas, cultivadas en el laboratorio. Sin embargo la identificación bacteriana y la caracterización completa solo es posible tras el aislamiento de la bacteria y la obtención de cultivos puros. Por ello el primer problema al estudiar una bacteria es su aislamiento del resto de los microorganismos presentes (en una muestra patológica, de agua, de suelo, de alimentos, etc.). Una vez que se ha logrado el aislamiento es posible obtener la bacteria de interés en cultivo puro
OBJETIVOS
Desarrollar técnicas comunes de inoculación en medios de cultivo y las técnicas de aislamiento.
Hacer crecer microorganismos en un medio de cultivo.
Saber cómo sembrar microorganismos en el agar.
MARCO TEORICO
Los microorganismos se cultivan en el laboratorio en materiales nutritivos denominados medios de cultivo, cuyos componentes son muy variados. La elección del medio se basa en el propósito del estudio.
El material que se inocula en el medio se denomina inoculo. Cuando se inocula un medio como el agar nutritivo u otros medios con agar en cajas Petri, por el método de siembra, por estrías cruzadas en placa, las células quedan separadas individualmente, durante la incubación, las células microbianas individuales se reproducen tan rápidamente que en un tiempo de 18 a 24 horas producen masas visibles a simple vista, denominados colonias.
Siembra
Es la incorporación a un medio de cultivo de una muestra, con propósitos cuantitativos o cualitativos
Tipos de siembra
Siembra en placa:
Por estría
Por inclusión
Por extensión o bañado
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Universidad Nacional de CajamarcaSiembra en tubos:
Con agar inclinado.
Con medio sólido horizontal.
Con medio semisólido.
Con medio líquido.
En la naturaleza los microorganismos crecen en poblaciones mixtas y complejas, la cual para esto se necesitan las técnicas siguientes:
Técnica aséptica: Técnica usada para evitar la contaminación durante la manipulación de cultivos y de medios de cultivos.
a) El asa se calienta hasta la incandescencia y se enfría al aire, cerca del mechero.
b) El tubo u la placa se destapa cerca del mechero.
c) Se flamea el extremo del (tubo) por la llama.
d) Se extrae la muestra con el asa esterilizada.
e) Tras tomar la muestra, se vuelve a flamear el extremo del (tubo) y la muestra se deposita en un medio estéril.
f) Se vuelve a tapar el tubo u la placa.
g) El asa se recalienta de nuevo antes de finalizar.
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Aislamiento
Consiste en obtener un cultivo puro de un microorganismo a partir de un cultivo mixto.
Métodos:
• Directo
• Estrías
• Inclusión o bañado
• Indirecto - enriquecimiento previo
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Universidad Nacional de CajamarcaAislamiento por agotamiento
Siembra por estría
Se inocula la muestra sobre un extremo de la placa con un asa y se extiende formando estrías sobre la superficie en varios sentidos, cada célula aislada se multiplicará formando una colonia independiente, cada colonia representa un cultivo puro.
Aislamiento por dilución
Siembra por extensión o bañado
Se extiende el inóculo uniformemente con una varilla acodada estéril por la superficie del medio de cultivo.
Las células diseminadas sobre la superficie formarán colonias aisladas.
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Universidad Nacional de CajamarcaCONCLUSIONES
Los microorganismos se cultivan en el laboratorio en materiales nutritivos denominados medios de cultivo, cuyos componentes son muy variados. La elección del medio se basa en el propósito del estudio.
Se logró identificar e trabajar y cultivar microorganismos.
Se lo logro la siembra de microorganismos.
El aislamiento consiste en obtener un cultivo puro de un microorganismo a partir de un cultivo mixto.
La siembra de microorganismos es la incorporación a un medio de cultivo de una muestra, con propósitos cuantitativos o cualitativos.
BIBLIOGRAFIAS
OLIIVAS. Evangélica. Manual de prácticas de Microbiología básica y Microbiología de alimentos. Programa de Nutrición. Universidad Autónoma de Ciudad Juárez.
http://www.pomif.com/pages/practicas/bacteriologia/aislamiento
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