Salas González Paola
IDENTIFICACION DE MICORRIZAS EN Echinopsis multiplex (biznaga), Opuntia microdasys var. rufispina (gloquidios marrón/rojizos) y en la rosa spp. (rosal)
Se clasifican en
ESPECIES
son
Conjunto de individuos procedentes de antecesores comunes, capaces de reproducirse entre si y dejar
descendencia fértil
Reinos
Eubacteria
Archaeobacteria PlantaeFungi Animalia
heterótrofos
relaciones
simbióticas
autótrofos
Protista
forman
llamadas
INTRODUCCION
DOMINIOS
BACTERIA ARCHAE EUCARYA
Simbiosis entre un hongo y la raíz de una
planta
La planta El hongo
micorrizas
son
en las que
mayor
Lípidos, P, N, Cu, Zn
nutrientes vitamina
sglucosa
reciberecibe
otros Fijación de
CO2
Protección contra
patógenos
tipos
ectomicorrizas
Absorción de agua
ectoendomicorrizas
Hifas no penetran en la
raíz
endomicorrizas
Hifas dentro y fuera de la
raíz
Hifas introducidas en
la raíz
IMPORTANCIA
₰ Agricultura
₰ Economía
₰ Ecología
Rosa spp.Opuntia microdasys var.
rufispinaEchinopsis multiplex
OBJETIVO GENERAL
Identificar la presencia de micorrizas en Echinopsis multiplex (biznaga), Opuntia microdasys var. rufispina (gloquidios marrón/rojizos) y en la rosa spp. (rosal)
OBJETIVOS
PARTICULARES
Observar presencia de micorrizas en Echinopsis multiplex (biznaga), Opuntia microdasys var. rufispina (gloquidios marrón/rojizos) y en la rosa spp. (rosal) .
Extraer esporas de los hongos que tienen asociaciones mirorrízicas en Echinopsis multiplex (biznaga), Opuntia microdasys var. rufispina (gloquidios marrón/rojizos) y en la rosa spp. (rosal) .
Identificar a los hongos que micorrizan a Echinopsis multiplex (biznaga), Opuntia microdasys var. rufispina (gloquidios marrón/rojizos) y en la rosa spp. (rosal) .
HIPOTESIS
Las cactáceas Echinopsis multiplex (biznaga), Opuntia microdasys var. rufispina (gloquidios marron/rojizos) y en la rosa spp. (rosal) . presentaran asociaciones micorrizicas
METODOLOGIA TINCION DE RAICES
Se colectaron raíces secundarias
24 hrs. 10
min.
x 24 hrs. a temp. ambiente
Se observo micelio extra e intrarradicular, vesículas y
esporas
KOH 10% HCL 10%
Azul de tripano al
0.05%lactoglicerol
EXTRACCION DE ESPORAS
Pesar 100 gr de suelo seco
con agua destilada a
3 500 r.p.m por 4 min.
Suspender el pellet con sacarosa al 40% y mezclar. Centrifugar a 3500 r.p.m por
30 seg.
Se enjuago con
agua destilada.
EXTRACCION DEL DNA POR EL METODO AP
Se extrajeron raíces micorrizadas
Se macero en un tubo eppendorf con 250 µl de buffer AP. Después se completo a un volumen de
750 µl.
Se incubo por 30 min a temp. ambiente
Centrifugar a 12 000 r.p.m. por 1 min.
Tomó el sobrenadante y se paso a un tubo limpio.
Se agrego 500 µl de fenol-cloroformo (V-V)
Centrifugar a 12 000 r.p.m. por 3 min. Ser recupero la fase acuosa y se paso a
otro tubo
Repetir últimos dos pasos
Precipito con 500 µl de isopropanol y 50 µl de acetato de amonio 10 M,
mezclar
Centrifugar a 12 000 r.p.m. por 10 min.
Se tiro sobrenadante y se conservo la pastilla.
Lavo con 50µl de etanol al 70%.
Centrifugar por 3 min. Tirar etanol.
Repetir últimos dos pasos
Se puso el tubo boca abajo sobre un papel para dejar secar
la pastilla
Se resuspendio la pastilla en 30 a 50 µl de agua libre de nucleasas o agua desionizada
estéril.
Se guardo el DNA a 4°C
Se corrio en una electroforesis
RESULTADOSSe observo la presencia de hifas y algunos arbúsculos en las diferentes plantas.
CACTACEAS
hifas
arbúsculos
Figura 1. Echinopsis multiplex (biznaga)
hifas
arbúsculos
hifas
Opuntia microdasys var. rufispina (gloquidios marron/rojizos)
DISCUSIÓN DE RESULTADOS
Las diferentes especies de plantas mostraron estructuras fúngicas en sus raíces, con diferente nivel de colonización.
CONCLUSIONES
Algunos factores como grosor de la raíz, tipo de suelo, cantidad de agua influyen en la presencia de micorrizas
La presencia de micorrizas es importante para la disminución del costo al producir las especies de plantas
PROPUESTA
hongos
micorrizicos
Identificación
aislamiento
propagación
biofertilizantes
para
Para hacer
factores
para
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