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HISTOLOGÍA Y
TÉCNICAS HISTOLÓGICAS
Objetivos de un estudiante de Medicina VeterinariaOrganismos
AnatomíaRamas de la Anatomía:
Macroscópica y Microscópica
NIVELES DE ORGANIZACIÓN DELOS ORGANISMOS ANIMALES
Átomos Moléculas Células Tejidos Órganos Sistemas
HISTOLOGÍA Definición Importancia Métodos o técnicas histológicas: Definición Tipos:
Cultivo de células InjertosColoraciónExcisión
MicrodisecciónMicroincineraciónFotografíaInyecciones
CULTIVO DE CÉLULAS
DEFINICIÓNCONDICIONES IDEALES PARA EL CULTIVO DE CÉLULAS:
Medio nutritivo
pH
Medio estéril
Temperatura
INJERTOS
DEFINICIÓN
TIPOS:
Autoinjerto Homólogo Heterólogo Isólogo
MÉTODO DE COLORACIÓN
DEFINICIÓN
COLORANTESALES SOLUBLES EN AGUA Colorantes con carga ( - )= Ácidos Colorantes con carga ( + )= Básicos
CLASIFICACIÓN DE LOS COLORANTES
SEGÚN SU ORIGEN 1. NATURALES: Animal (Carmín) Vegetal (Hematoxilina)
2. ARTIFICIALES: Pigmentos minerales (Azul de Prusia) Derivados anilínicos (Eosina)
CLASIFICACIÓN DE LOS COLORANTES
Según su radical químicoÁcidos (Eosina)Básicos (Hematoxilina)Neutros (Giemsa)
Según su afinidad por los componentes celulares:Citoplasmáticos (Eosina)Nucleares (Hematoxilina)
Núcleos EucromáticosNúcleos Heterocromáticos
TIPOS DE COLORACIONESORTOCROMÁTICA
METACROMÁTICA
PROGRESIVA
RETRÓGRADA
POR IMPREGNACIÓN
VITAL
Intravital Supravital
MÉTODOS DE COLORACIÓN
Coloración de rutina
Coloraciones especiales
Histoquímica
COLORACIÓN DE RUTINA
DEFINICIÓN
HEMATOXILINA y EOSINA (H-E)
COLORACIONES ESPECIALES
DEFINICIÓN
TIPOS
GIEMSA: Frotis sanguíneos
TRICRÓMICA MALLORY-AZAN: Fibras colágenas (azul)
TRICRÓMICA DE MASSON: Fibras colágenas (azul)
GRAM: Bacterias ( + ) violeta ( - ) rosado
GROCOTT: Hongos (Negro)
VON KOSSA: Calcio (Negro)
HISTOQUÍMICA
DEFINICIÓN
CLASIFICACIONHistoquímica enzimáticaInmunohistoquímica
HISTOQUÍMCA ENZIMÁTICA DEFINICIÓN PROCEDIMIENTO
TEJIDO + ENZIMASUSTRATO PRODUCTO
INCOLORO
PRECIPITADOINSOLUBLE
COLOREADO
INMUNOHISTOQUÍMICA
DEFINICIÓN
PROCEDIMIENTO
ANTÍGENO ANTICUERPO ANTICUERPO + COLORANTES FLUORESCENTES
REACCIÓNANTÍGENO-ANTICUERPO
HISTOLOGÍA Definición Importancia Métodos o técnicas histológicas: Definición Tipos:
Cultivo de células InjertosColoraciónExcisión
MicrodisecciónMicroincineraciónFotografíaInyecciones
Técnica para la preparación de tejidos
Técnica de la Parafina
Técnica de la Celoidina
Técnica de Congelación
TÉCNICA DE LA PARAFINA
DEFINICIÓN
PROCEDIMIENTO TÉCNICO
1. Recolección de la muestra2.Fijación3.Lavado4.Deshidratación5.Aclaración6.Inclusión en parafina
1) RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA
BIOPSIANECROPSIA:
Muerte del animal (Natural o Eutanasia)Extracción de los órganosReducción de las piezas:
TamañoRecolección rápida
2) FIJACIÓN
DEFINICIÓN
FIJADORTipos: Físicos Químicos
FIJADORES FÍSICOS
POR DESECACIÓN
POR CALORSecoHúmedo
POR FRÍO
POR CONGELACIÓN
FIJADORES QUÍMICOSSIMPLES
Formol bufferado al 10%Formol al 4%Alcohol etílicoAlcohol metílicoÁcido ósmico del 1 al 2 %Oxidantes:
Bicloruro de mercurio y potasioÁcido acéticoÁcido pícricoÁcido crómico
…FIJADORES QUÍMICOS
COMPUESTOS
Líquido de BouinLíquido de Zenker
Líquido de HellyLíquido de Fleming
…FIJADORES QUÍMICOS
VOLUMEN 1:10
CONDICIONES QUE DEBE TENER UN BUEN FIJADOR:
Alto poder de penetración
Evitar los procesos autolíticos
Endurecimiento
3) LAVADO
DURANTE 1 HORA
AGUA CORRIENTE
4) DESHIDRATACIÓNPRINCIPIO
TIPO DE ALCOHOL
EN GRADOS CRECIENTES DE CONCENTRACIÓN
1 HORA CADA UNO
AUTOTECNICÓN
5) ACLARACIÓNDEFINICIÓN
TIPOS DE AGENTES ACLARANTES
XilolCloroformoBencenoTolueno
3 PASES
1 HORA CADA PASE
6) INCLUSIÓN EN PARAFINAINCLUSIÓN: 2 pasos
Impregnación o preinclusión
Inclusión definitiva (Formación del bloque)
FIGURA N° 3
PREPARACIÓN DE LAS LÁMINAS
CORTE DEL TEJIDO
RECOLECCIÓN DEL CORTE O CINTA
ESTUFA (37°C)
CORTE DEL BLOQUE DE PARAFINA
DEFINICIÓN
MICRÓTOMO
CORTES DE LAS CINTAS
RECOLECCIÓN DEL CORTE O PESCA
BAÑO DE FLOTACIÓN (37°C)
FINALIDAD
PESCA
FIG. N° 6
ESTUFA
PROCESO DE COLORACIÓN
DESPARAFINACIÓN
HIDRATACIÓN
TINCIÓN
DESPARAFINACIÓN
XILOL
3 PASES
5 MINUTOS c/u
HIDRATACIÓN
DEFINICIÓN
5 MINUTOS
COLORACIÓN DE RUTINADEFINICIÓNPROTOCOLO:Hematoxilina 10´Lavado con agua 15´Diferenciar los componentes con alcohol ácido.Virar al color azul sustancias AlcalinasLavado con agua corrienteEosina acuosa 3 deepsLavado con agua 15´Deshidratación 5´Aclaración 3 pases 5 minutos c/u
FIG. N° 7
MONTAJE
Mar-texEntellánPermount
SECADO AL AIRE
MICROSCOPIO
HISTORIAHISTORIADEFINICIÓN DEFINICIÓN CLASIFICACIÓN Según el tipo de luz:CLASIFICACIÓN Según el tipo de luz: Óptico o de LuzÓptico o de Luz ElectrónicoElectrónico
MICROSCOPIO
MICROSCOPIOS ÓPTICOS propiamente dichoMICROSCOPIOS ÓPTICOS propiamente dicho
MICROSCOPIOS ÓPTICOS especialesMICROSCOPIOS ÓPTICOS especiales
MICROSCOPIOS ÓPTICOS
Microscopio óptico simpleMicroscopio óptico simple
Microscopio óptico compuestoMicroscopio óptico compuesto Partes: Partes:
MICROSCOPIO ÓPTICOPROPIAMENTE DICHO
MICROSCOPIOS ÓPTICOS ESPECIALES
DE LUZ ULTRAVIOLETA
DE FLUORESCENCIA
DE CAMPO OSCURO
CONTRASTE DE FASE
DE LUZ POLARIZADA
INTERFERENCIA
MICROSCOPIOS ELECTRÓNICOS
De transmisión
De barrido
De fuerza atómica
…MICROSCOPIOS ELECTRÓNICOS
Microscopio Electrónicode Transmisión
…MICROSCOPIOS ELECTRÓNICOS
Microscopio Electrónicode Barrido
…MICROSCOPIOS ELECTRÓNICOS
Microscopio de Fuerza Atómica
Recomendac i ónDedícate, al menos, una hora del día para
aprender otro idioma, música, arte o practicar algún deporte ……..
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