PROMOTORES DE RESISTENCIA SISTEMICA EN EL CONTROL DE Lasidoplodia theobromae –
RESULTADOS DE ENSAYOS EN EL CONTROL QUIMICO DE Lasidoplodiatheobromae EN PALTO.
Dr. Martin Delgado JunchayaAsesor- Catedrático UPAO
V SEMINARIO INTERNACIONAL DE LA PALTACAMET TRADING S.A.C
PROGRAMACION 16 Y 17 DE AGOSTO
M. Delgado J.
Superficie sembrada:…………. Has ?? 22-25,000 Has de HassCosta 1,000 has nuevas/añoSierra 500 has nuevas /año
0
50000
100000
150000
200000
250000
2004 2006 2008 2010 2012 2014 2016 2018
Ton
247,00027% más
2016Producción
Nacional>470,000
ENFERMEDADES ESTUDIDAS EN PALTO EN EL NORTE DEL PERÚ
2. Pudrición de la raíz del palto: Phytophthora cinnamomi Rands.
3. Antracnosis y Pudrición del fruto:Colletotrichum gloesporioides
4. Escaldadura solar (Avocado Sundblotch ) Viroide
5. Pudrición de flores: Cladosporiumspp.
1. Muerte regresiva: Lasiodiplodia theobromae
E.E.E.P.
E.E.E.P.
E.E.
E.S.
E.S.
Muerte Regresiva yCancrosis de ramas
y frutosLasiodiplodiatheobromae
Decoloración del ápice del plantón
Decoloración y necrosis del ápice
con exudado.
Inóculo para
nuevas infecciones
Patógenovirulento
Hospedantesusceptible
Hombre >SEVERIDAD
Agroecosistema
Martín A. Delgado J.
ClimaSuelo
Fitopatógeno
ControlBiológico
Control Químico
Planta
•Legal•Físico,
•Genético,•Biotecnológico
Formas o Procedimientos para el Control o Manejo Integrado de Enfermedades en Plantas
Caracterización del
AgroecosistemaCambios climáticos
Aridez
Control Cultural:
Control químico
ClimaSuelo
Fitopatógeno
ControlBiológico
Control Químico
Planta
•Legal•Físico,
•Genético,•Biotecnológico
Formas o Procedimientos para el Control o Manejo Integrado de Enfermedades en Plantas
Caracterización del
AgroecosistemaCambios climáticos
Aridez
Control Cultural:
Eliminación
de restos de poda
105c.v./g.
Control químico
ObjetivoEstimar la densidad de inóculo de
Lasiodiplodia theobromae, que puede generarse a partir de los
restos originados de la poda, con muestreos en dos localidades o
fundos: Agualima y Norte Verde, ubicados en Virú, La Libertad,
Perú.
Muestreos en Agualima, Virú, La Libertad, Perú, 2016.
Zona de muestreo en Norte Verde, Virú, La Libertad, Perú, 2016.
Tratamiento con hipoclorito de sodio al 2% después alcohol al 80% y luego flameado por 5 segundos.
Incubación en cámara húmeda durante 25 días a temperatura ambiente
Pesado:gramos Sacudido
Primer filtradoSegundo filtrado:
tamiz de 180 micras
Suspensión de conidias, lista
para el contaje con la cámara de Neubauer
Sumersión en 10 mL de agua estéril
RESULTADOS: NORTE VERDE
ZONA LONGITUD
(CM)DIAMETRO
(CM)PESO /G
CONIDIAS/G
NORTE VERDE 7.00 1.00 5.00 7.2 X 104
NORTE VERDE 8.00 0.40 2.28 6.0 X 104
NORTE VERDE 5.00 0.40 2.34 1.3 X 105
NORTE VERDE 6.20 1.20 3.75 6.8 X 105
NORTE VERDE 4.00 0.60 1.23 1.3 X 105
NORTE VERDE 6.50 1.10 6.37 7.4. X 104
TOTAL 36.70 4.70 20.97 11.46 X 105
PROMEDIO 6.11 0.78 3.49 1.91 X 105
ZONALONGITUD
(CM)DIAMETRO
(CM)PESO /G
CONIDIAS/G
AGUALIMA 6.00 1.00 6.89 0.00
AGUALIMA 6.50 0.80 4.57 7.6 X 104
AGUALIMA 5.20 0.80 3.59 1.9 X 105
AGUALIMA 5.80 0.80 5.83 1.4 X 104
AGUALIMA 7.00 1.29 7.39 1.9 X 105
AGUALIMA 6.00 1.20 4.76 3.7 X 105
TOTAL 36.50 5.89 33.03 8.2 X 105
PROMEDIO 6.08 0.98 5.51 1.4 X 105
RESULTADOS: AGUALIMA
Patogenicidad de Lasiodiplodia theobromae1. Conidias procedentes de material de poda fueron colectadas con la ayuda de
una pinza y en un tubo de prueba con agua destilada estéril.2. La suspensión formada se calibró a 2 x 106 c/mL, con la ayuda de la cámara
de Neubauer. Posteriormente se hicieron diluciones de 1:100 para obtener104 y 102 c/mL.
3. Plantones de palto de la variedad Topa Topa se podaron a la altura de 0.50m.4. En la zona del corte de depositó una gota de una suspensión de conidias
calibrada, según tratamiento, a: 2x102, 2x104 y 2x106 conidias/mL, lo cualequivale a: 10, 1,000, 100,000 conidias, respectivamente.
6. Como control se depositó sobre el corte un disco de agar (PDA) con/sinmicelio.
7. La zona inoculada fue cubierta con parafilm.
10 conidias/corte. Lesiones de 0.5-0.7 cm 1,000 conidias/corte. Lesiones de 0.5 a 1.3 cm
100,000 conidias/corte. Lesiones de 0.5-0.6 cm. Disco de agar con micelio: Lesiones de 1.1-3.1 cm.
Avance de la infección de Lasiodiplodia theobromae a los 6 días de ala inoculación
Conclusión:
Los restos de poda: ramas y ramillas, en las plantaciones de palto infectadas
con el hongo Lasiodiplodia theobromae de Virú, La Libertad, Perú, contienen de 1.4 a 1.9 x 105 conidias
viables y con habilidad patogénica por cada gramo, lo cual constituye una
densa fuente de inóculo para permanentes infecciones del hongo en los nuevos brotes.
1.4-1.9 X 105 c/g
ClimaSuelo
Fitopatógeno
ControlBiológico
Control Químico
Planta
•Legal•Físico,
•Genético,•Biotecnológico
Formas o Procedimientos para el Control o Manejo Integrado de Enfermedades en Plantas
Caracterización del
AgroecosistemaCambios climáticos
Aridez
Control Cultural:
Eliminación
de restos de poda
105c.v./g.
Control químico Experiencias: 2016-2017.
ClimaSuelo
Fitopatógeno
ControlBiológico
Control Químico
Planta
•Legal•Físico,
•Genético,•Biotecnológico
Formas o Procedimientos para el Control o Manejo Integrado de Enfermedades en Plantas
Caracterización del
AgroecosistemaCambios climáticos
Aridez
Control Cultural:
Eliminación
de restos de poda
105c.v./g.
Control químicoCúpricos orgánicos e inorgánicos, Benzimidazoles, Triazoles, Strobilurinas, Prochloraz, Imidazoles, mezclas de estos ingredientes etc.
Tratamiento N 1 2 3
Phyton 0.5 L/200L 3 1.00
Licthor 0.5 L/200L 3 1.00
Epoxi Duo 0.4 L/200L 3 1.00
T-Agua 3 1.00
Licthor 1 L/200L 3 1.33
T-Lasiodiplodia 3 5.00
Cupron 1L /200L 3 9.00
Champion 1 L/200L 3 11.00
Sig. 0.859 1.000 0.253
Se visualizan las medias para los grupos en los
subconjuntos homogéneos.a. Utiliza el tamaño de la muestra de la media
armónica = 3,000.b. Alfa = 0.05.
ENSAYO 1: DUNCAN.EVALUACIÓN
DE FUNGICIDAS QUE INTERFIEREN
EL INGRESO DE Lasiodiplodia
theobromae A TRAVÉS DE HERIDAS
EN PANTONES DE PALTO VAR.
ZUTANO. CASA MALLA.
TRUJILLO, LA LIBERTAD, 2017.PROME
DIO
I II III
1 Champíon 1.0 8 15 7 30 10.00
2 Cupron 1.0 6 13 5 24 8.00
3 Phyton 0.5 0 0 0 0 0.00
4 Licthor 0.5 0 0 0 0 0.00
5 Licthor 1.0 0 0 1 1 0.33
6 Epoxi Duo 0.4 0 0 0 0 0.00
7 T-Agua 0.0 0 0 0 0 0.00
8 T-Lasiodip. 106 c/mL 4 4 4 12 4.00
∑
ENSAYO1: EVALUACIÓN DE FUNGICIDAS QUE
INTERFIEREN EL INGRESO DE Lasiodiplodia theobromae A
TRAVÉS DE HERIDAS EN PANTONES DE PALTO VAR.
ZUTANO. CASA MALLA.TRUJILLO, LA LIBERTAD, 2017.
Longitud de
Lesión en mm.Trat. Producto Con.A.L/2
00L
Tratamiento N 1 2 3
Phyton 0.5 L/200L 3 1.00
Licthor 0.5 L/200L 3 1.00
Epoxi Duo 0.4 L/200L 3 1.00
T-Agua 3 1.00
Licthor 1 L/200L 3 1.33
T-Lasiodiplodia 3 5.00
Cupron 1L /200L 3 9.00
Champion 1 L/200L 3 11.00
Sig. 0.859 1.000 0.253
Se visualizan las medias para los grupos en los
subconjuntos homogéneos.a. Utiliza el tamaño de la muestra de la media
armónica = 3,000.b. Alfa = 0.05.
ENSAYO 1: DUNCAN.EVALUACIÓN
DE FUNGICIDAS QUE INTERFIEREN
EL INGRESO DE Lasiodiplodia
theobromae A TRAVÉS DE HERIDAS
EN PANTONES DE PALTO VAR.
ZUTANO. CASA MALLA.
TRUJILLO, LA LIBERTAD, 2017.PROME
DIO
I II III
1 Champíon 1.0 8 15 7 30 10.00
2 Cupron 1.0 6 13 5 24 8.00
3 Phyton 0.5 0 0 0 0 0.00
4 Licthor 0.5 0 0 0 0 0.00
5 Licthor 1.0 0 0 1 1 0.33
6 Epoxi Duo 0.4 0 0 0 0 0.00
7 T-Agua 0.0 0 0 0 0 0.00
8 T-Lasiodip. 106 c/mL 4 4 4 12 4.00
∑
ENSAYO1: EVALUACIÓN DE FUNGICIDAS QUE
INTERFIEREN EL INGRESO DE Lasiodiplodia theobromae A
TRAVÉS DE HERIDAS EN PANTONES DE PALTO VAR.
ZUTANO. CASA MALLA.TRUJILLO, LA LIBERTAD, 2017.
Longitud de
Lesión en mm.Trat. Producto Con.A.L/2
00L
Tratamiento N 1 2 3
Phyton 0.5 L/200L 3 1.00
Licthor 0.5 L/200L 3 1.00
Epoxi Duo 0.4 L/200L 3 1.00
T-Agua 3 1.00
Licthor 1 L/200L 3 1.33
T-Lasiodiplodia 3 5.00
Cupron 1L /200L 3 9.00
Champion 1 L/200L 3 11.00
Sig. 0.859 1.000 0.253
Se visualizan las medias para los grupos en los
subconjuntos homogéneos.a. Utiliza el tamaño de la muestra de la media
armónica = 3,000.b. Alfa = 0.05.
ENSAYO 1: DUNCAN.EVALUACIÓN
DE FUNGICIDAS QUE INTERFIEREN
EL INGRESO DE Lasiodiplodia
theobromae A TRAVÉS DE HERIDAS
EN PANTONES DE PALTO VAR.
ZUTANO. CASA MALLA.
TRUJILLO, LA LIBERTAD, 2017.PROME
DIO
I II III
1 Champíon 1.0 8 15 7 30 10.00
2 Cupron 1.0 6 13 5 24 8.00
3 Phyton 0.5 0 0 0 0 0.00
4 Licthor 0.5 0 0 0 0 0.00
5 Licthor 1.0 0 0 1 1 0.33
6 Epoxi Duo 0.4 0 0 0 0 0.00
7 T-Agua 0.0 0 0 0 0 0.00
8 T-Lasiodip. 106 c/mL 4 4 4 12 4.00
∑
ENSAYO1: EVALUACIÓN DE FUNGICIDAS QUE
INTERFIEREN EL INGRESO DE Lasiodiplodia theobromae A
TRAVÉS DE HERIDAS EN PANTONES DE PALTO VAR.
ZUTANO. CASA MALLA.TRUJILLO, LA LIBERTAD, 2017.
Longitud de
Lesión en mm.Trat. Producto Con.A.L/2
00L
Qué pasó?? Lasiodiplodia NO SE DETUVO !!!!!!!....NO MURIÓ.
Patógenovirulento
Hospedantesusceptible
Hombre >SEVERIDAD
Agroecosistema
Martín A. Delgado J.
Patógenomenos
virulento
HospedanteResistente
Hombre <SEVERIDAD
Agroecosistema
Martín A. Delgado J.
Representación esquemática del modo de acción de un
antagonista y la interacción entre este organismo,
la planta y el patógeno ( Bayer CropScience. Adaptación, M.
Delgado 2007.)
Antagonista“enemigo”
Antibiosis
Promotor deldesarrollo
CompetenciaExclusión
Resistenciasistémica
Aumento deproducción
Planta
Escape dela enfermedad
Fortalecimientode la planta:
hipovirulencia
Parasitismo
Hombre
Planta más resistente
•ASPECTOS O ENFOQUES DE LA RESISTENCIA DE LAS PLANTAS A LOS
FITOPATÓGENOS
•ASPECTO GENÉTICO:
•Resistencia monogénica,
•Resistencia oligogénica o
•Resistencia poligénica.
•ASPECTOS O ENFOQUES DE LA RESISTENCIA DE LAS PLANTAS A LOS FITOPATÓGENOS
•ASPECTO EPIDEMIOLÓGICO:
•Resistencia vertical o diferenciada o cualitativa.
•Resistencia horizontal o general o cuantitativa.
ASPECTOS O ENFOQUES DE LA RESISTENCIA DE LAS PLANTAS A LOS FITOPATÒGENOS
• ASPECTO PATOFISIOLÓGICO:
• Pre infeccionales: están presentes antes de la infección: físicos y químicos. Ejemplos: Físicos: dureza de cutícula,
Químicos: sustancias tóxicas como la
pirocatequina.
• Post-infeccionales: se forman como resultado de la infección: Físicos y químicos. Ejemplos:
Físicos: Tilosas, gomas, acumulación de agregados celulares.
Químicos: fenoles (metabolitos secundarios): FITOALEXINAS
ASPECTOS O ENFOQUES DE LA RESISTENCIA DE LAS PLANTAS A LOS FITOPATÒGENOS
• ASPECTO PATOFISIOLÓGICO:
• Pre infeccionales: están presentes antes de la infección: físicos y químicos. Ejemplos: Físicos: dureza de cutícula,
Químicos: sustancias tóxicas como la
pirocatequina.
• Post-infeccionales: se forman como resultado de la infección: Físicos y químicos. Ejemplos:
Físicos: Tilosas, gomas, acumulación de agregados celulares.
Químicos: fenoles (metabolitos secundarios): FITOALEXINAS
RESISTENCIA SISTÉMICA EN PLANTAS CONTRA FITOPATÓGENOS
Las plantas pueden generar resistencia cuando son tratadas con agentes bióticos patogénicos o no patogénicos, virulentos o no virulentos, fragmentos de la pared celular, extractos de plantas o incluso sustancias químicas sintéticas.
Este fenómeno conocido como resistencia inducida, puede ser local o sistémica y, si bien no conduce a una resistencia total, sin embargo reduce la severidad e incidencia de lesiones.
M. Delgado J. 2017.
RESISTENCIA SISTÉMICA EN PLANTAS CONTRA FITOPATÓGENOS
La resistencia inducida contra patógenos microbianos, puede dividirse en : Resistencia Sistémica Adquirida
(SAR) y Resistencia Sistémica Inducida (ISR).
M. Delgado J. 2017.
RESISTENCIA SISTÉMICA ADQUIRIDA (SAR)
Es el fenómeno mediante el cual las plantas desarrollan unaresistencia sistémica de amplio espectro al ataque depatógenos y se inicia con una infección localizada(penetración o intento de penetración del patógeno) o conun tratamiento localizado con los llamados activadores deresistencia ( ácido 2,6- dicloroisonicotinico, Bion/Actigard(acibenzolar-S-metil (ASM), Syngenta), Regalia Maxx(extracto de Reynoutria sachalinensis), Elexa (chitosan,SafeScience, USA), y Messenger (harpin protein, EdenBioscience, USA).
M. Delgado J. 2017.
Patógeno
Receptores de la
célula del
hospedero
Elicitores del patógenoElicitores del patógeno
Activación
de la
respuesta de
defensa
Elicitores
del patógeno
Receptores de la célula del
hospederoReceptores activados
Elicitores
reaccionan con
los receptores
de la célula Activación de receptores
Membrana celular
CitoplasmaParedcelular
Producción o activación de ácido salicílico y otras señales transductoras
Proteínas relacionadas con la patogénesis: PR
Agrios, 2005. Adaptado por Delgado, 2017.
RESISTENCIA SISTÉMICA ADQUIRIDA. Inhibe el inicio de nuevas infecciones en la planta
Proteína ligada al ADN altera la
expresión del gen.
Colapso oxidativoDisrupción de la membrana
Atividad de las lipoxigenasas: AJAtividad de las fenoloxidasas y
acumulación de fenoles: ASColapso o muerte de la célula
HR
Reacción de hipersensibilidad en tabaco, cuando es infiltrado con una bacteria fitopatógena.
M. Delgado J. 2017.
Patógeno
Receptores de la
célula del
hospedero
Elicitores del patógenoElicitores del patógeno
Activación
de la
respuesta de
defensa
Elicitores
del patógeno
Receptores de la célula del
hospederoReceptores activados
Elicitores
reaccionan con
los receptores
de la célula Activación de receptores
Membrana celular
CitoplasmaParedcelular
Producción o activación de ácido salicílico y otras señales transductoras
Proteínas relacionadas con la patogénesis: PR
Agrios, 2005. Adaptado por Delgado, 2017.
RESISTENCIA SISTÉMICA ADQUIRIDA. Inhibe el inicio de nuevas infecciones en la planta
Proteína ligada al ADN altera la
expresión del gen.
Colapso oxidativoDisrupción de la membrana
Atividad de las lipoxigenasas: AJAtividad de las fenoloxidasas y
acumulación de fenoles: ASColapso o muerte de la célula
HR
X
X
Ciclo de
Krebs
GLICOLOSIS
C-6
C-2
Adaptado por M. Delgado J. 2017.
C-4
Ciclo de
Krebs
GLICOLOSIS
Ácido Salicìlico
C-6
C-2
Fenil-alanina-liasa, Tirosinasa
Adaptado por M. Delgado J. 2017.
FUNDAMENTOS
RESISTENCIA SISTÉMICA INDUCIDA (ISR)
En contraste al SAR, la ISR desarrolla como resultado de la colonización de las raíces de plantas por ciertos strains de rizobacterias que promueven el desarrollo (PGPR), y se produce por la intermediación de las vías metabólicas del acido jasmónico (JA) y etileno (ET).
M. Delgado J. 2017.
Martín A. Delgado J.Bertha Carrera S.
Ciclo de Krebs
Acetato malonato y acetato mevalonato: IRS
Ácido Jasmónico
Adaptado por M. Delgado J. 2017.
C-4
Ciclo de
Krebs
GLICOLOSIS
ETILENO: ISR
Jazmonato: ISRAcetato: ISR
Ácido Salicìlico
Adaptado por M. Delgado J. 2017.
Trichoderma también general ISR
• Análisis de señales moleculares involucradas en el mecanismo de defensa y aplicación de inhibidores específicos han mostrado que el etileno y el ácido jasmónico están envueltos en el efecto protector conferido por Trichoderma sp contra Pseudomonassyringae pv lachrymans.
• Shores, M., Yedidia, I., and Chet, I. 2005.
Phytopathology 95: 76- 84.
M. Delgado J. 2017.
ESTRÉS ABIÓTICOS INTERFIEREN LA EFICACIA DE INDUCTORES DE RESISTENCIA EN EL CAMPO.
• Las plantas responden a los estrés abióticos mediante señales hormonales que pueden interferir el mecanismo de resistencia sistémica inducida.
• Roatti et al. (2013) sometieron a plantas de vid a estrés por altas temperaturas, por sequia o por ambos con el propósito de investigar el efecto de estos estreses sobre la resistencia inducida por Trichodermaharzianum T39 al desarrollo del Mildiu causado por Plasmoparaviticola.
• La resistencia inducida por el T39 no fue afectada cuando la planta se expuso a altas temperaturas o a la sequía, sin embargo si fue significantemente reducida cuando la planta fue expuesta a ambos factores.
• Phytopathology 103: 1227- 1234.
M. Delgado J. 2017.
NO SIEMPRE LOS RIZOSFÉRICOS GENERAN RESISTENCIA SISTÉMICA INDUCIDA EN LA PLANTA.
• Morrison (et al 2017), recientemente encontraron que la cepa LBUM636 de Pseudomonas fluorescens inhibe el desarrollo de Phytophthora infestans, (tizón de la papa) debido a que produce un metabolito que actúa como potente antibiótico identificado como el ácido Phenazine-1-Carboxilico.
• Morrison et al. (2017). Phytopathology 107: 273- 279.
OBJETIVO
• El objetivo de esta investigación consistió enevaluar la respuesta de plantones de palto de lavar. Zutano, al ataque de Lasiodiplodiatheobromae, cuando éstos fueron tratados conproductos inorgánicos, orgánicos y otros deorigen biológico, entre ellos, por ejemplo, elproducto Regalia Maxx (Extracto del algaReynoutria sacchalinensis) producto RegaliaMaxx, y otros de origen orgánico o biológico.
TABLA 1. PRODUCTOS ESAYADOS COMO POSIBLES PROMOTORES DE RESISTENCIA SISTÉMICA CONTRA
LASIODIPLODIA THEOBROMAE EN PLANTONES DE PALTO DE LA VAR. ZUTANO. CASA MALLA. TRUJILLO, LA LIBERTAD,
2017.
No.
TRAT.PRODUCTO
CONCENTRACIÓN DE APLICACIÓN
L/200 L (follaje o suelo-drench)
1 REGALIA MAXX: Extracto de Reynoutria sachalinensis 0.4 (Follaje)
2 REGALIA MAXX: Extracto de Reynoutria sachalinensis 0.5 (Follaje)
3 JMR2: Producto nanotecnológico 1.0 ( Follaje)
4 B.N. Bacteria aislada de cáscara de café. 106 ufc/mL
5
ALE 155. Paenibacillus macerans aislada de rizósfera de
espárrago106 ufc/mL
6 BP-1. Bacteria endofita de palto 106 ufc/mL
7 BP-2. Bacteria endofita de palto 106 ufc/mL
8 CODAPHOS CU: Fosfito de Cu 0.6
9 CODAPHOS K: Fosfito de K 0.5
10
DALGIN ACTIVE: Aminoácidos. Extracto de algas con
vitaminas. 0.6
11
LICHTOR: Carbohidratos, Ácido urónico, A. Succínico,
Mg, M.O., Aminácidos activos1.0
12 Trich-1. Trichoderma virens endofito de piña 106 ufc/mL
13 Trich-2. Trichoderma virens endofito de piña 106 ufc/mL
14
AVIBIOL: enmienda orgánica líquida. Fermentación
anaeróbica de estiércol de gallinas ponedoras 20.0
15 TESTIGO AGUA 0.0
Aplicación de los tratamientos.
• Los tratamientos fueron aplicados al follaje, como aspersiónmediante una pistola de pintar de alta presión GS 1450, cuyodiámetro de boquilla fue de 1.5.-1.7mm, con capacidad de 600mL, abanico de 110-220 mm y presión de trabajo 4.8 bar,proveniente de una bomba WORK con 2HP. Para tratamientosaplicados al suelo, se calculó primero el agua necesaria parallegar en la maceta a capacidad de campo y, según este volumeny la concentración de aplicación, se calculó la cantidad deproducto a aplicar. Se efectuaron dos aplicaciones de losproductos en las fechas siguientes:
• Primera aplicación: 22 de junio del 2017.
• Segunda Aplicación: 22 de julio del 2017.
Determinación de la altura de plantas.
Esta variable se obtuvo un día antes de la inoculación.
La altura fue tomada, en metros, desde la base del tallo hasta la última bifurcación de una ramilla.
• Inoculación.• La inoculación se efectuó el 22 de agosto del 2017, 31 días después de
haber efectuado la segunda aplicación de los tratamientos.
• El inóculo de Lasiodiplodia theobramae, se obtuvo de los picnidios formados en los residuos de poda que fueron traídos del campo, específicamente del Fundo Norte Verde, Virú La Libertad.
• El material fue limpiado exteriormente y con la ayuda de una pizeta con agua se lavaron los picnidios concentrando el material fungoso hasta tener una suspensión equivalente a 106 conidias maduras/mL según el contaje realizado con la cámara Neubauer.
• Para la inoculación se podaron los plantones a 1m de altura y en el tejido vascular expuesto se depositó 50 microlitros de la suspensión de conidios, lo cual fue equivalente a 50,000 conidias/plantón.
• Concluida la inoculación, la herida fue cubierta con cinta parafilm para evitar desecación y posible contaminación con agentes extraños.
•Evaluación de daños:• La evaluación del daño producido por Lasiodiplodia
theobromae tuvo dos componentes:
• a) Lesión externa causada por L. t. cuya intensidad fue expresada en mm, como indicador del avance de la infección en el plantón
• b) Evaluación del avance sistémico de L.t. en tejido externamente asintomático.
Descarte
Avance del patógeno
Resistenca de la planta
?
• Determinación del contenido de Ácido Jasmónico y Ácido Salicílico.
• La presencia de estos compuestos en el tejido vegetal, por lo general, está asociada a respuesta de resistencia sistémica inducida (ácido jasmónico y etileno) o resistencia sistémica adquirida ( ácido salicílico)( Reglinski y Walters, 2009).
• Para tal fin se concertó el servicio de análisis cromatográficos(Cromatotografía de Gases de Alta Perfomance. BC-CMA 500) ofrecido por la Firma Baltic Control CMA S.A. Lima , Perú.
• Para la toma de muestra se cortó 10 cm de tallo de cada repetición, con lo cual se obtuvo más de 400g de tejido de cada uno de los tratamientos que se consideraron para los análisis.
• Se incluyó el Tratamiento Testigo, que consistió en aplicación de agua y una muestra adicional conformada por 10 cm de tallo de plantones que no fueron inoculados ni habían sido cortados.
Determinación del peso de raíces.
Después de la toma de muestra para el análisis cromotográfico, se extrajo el plantón cortándose la raíz en la base y eliminándose los restos de la semilla (pepa). La raíz fue cuidadosamente lavada y secada con toallas de papel para después ser pesada, según tratamiento.
•RESULTADOS
TABLA 2: ALTURA DE PLANTONES DE PALTO TRATADOS CON PRODUCTOS POSIBLES PROMOTORES DE RESISTENCIA
SISTÉMICA CONTRA LASIODIPLODIA THEOBROMAE .
CASA MALLA. TRUJILLO, LA LIBERTAD, 2017.
TRAT. PRODUCT.CONC. DE APL.L/200L
(DRECH)
ALTURA DE PLANTA EN M
21.08.17.
I II III TOTAL PROM
1 REGALIA MAXX 0.4 (Follaje) 1.59 1.49 1.52 4.60 1.53
2 REGALIA MAXX 0.5 (Follaje) 1.28 1.13 1.36 3.77 1.26
3 JMR2 1 ( Follaje) 1.32 1.32 1.23 3.87 1.29
4 B.N. 106 ufc/mL 1.23 1.64 1.20 4.07 1.36
5 ALE 155 106 ufc/mL 1.37 1.48 1.39 4.24 1.41
6 BP-1 106 ufc/mL 1.47 1.45 1.62 4.54 1.51
7 BP-2 106 ufc/mL 1.62 1.42 1.39 4.43 1.48
8 CODAPHOS CU 0.6 1.30 1.32 1.30 3.92 1.31
9 CODAPHOS K 0.5 1.20 1.28 1.12 3.60 1.20
10 DALGIN ACTIVE 0.6 1.47 1.48 1.52 4.47 1.49
11 LICTHOR 1.0 1.50 1.50 1.54 4.54 1.51
12 Trich-1 106 ufc/mL 1.31 1.45 1.47 4.23 1.41
13 Trich-2 106 ufc/mL 1.31 1.30 1.39 4.00 1.30
14 AVIBIOL 20.0 1.50 1.48 1.42 4.40 1.46
15 TEST. AGUA 0.0 1.27 1.50 1.26 4.03 1.34
16 TEST.LASIO. 106 c/mL 1.32 1.24 1.40 3.96 1.32
Tipo I de
suma de
cuadrados Gl
Media
cuadrátic
a F Sig.
Bloques 63,292 2 31,646 ,320 ,729
Tratamient
o4725,146 15 315,010 3,186 ,003
Error 2966,042 30 98,868
Total 933773,000 48
Total
corregido 7754,479 47
Análisis de Varianza de la Alrura de platones de palto
Trujullo, La Libertad, Perú, 2017.
Origen
1 2 3 4 5 6
Codaphos K 0.5 L/200L 3 120,0000
Regalia Maxx 0.5L / 200L ( Follaje) 3 125,6667 125,6667
JMR2 1L/ 200L 3 129,0000 129,0000 129,0000
Codaphos Cu 0.6 L/200L 3 130,6667 130,6667 130,6667 130,6667
Lasiodiplodia 1 06 c/ mL 3 132,0000 132,0000 132,0000 132,0000 132,0000
Tricho-2 106 ufc/ mL 3 133,3333 133,3333 133,3333 133,3333 133,3333
Agua 3 134,3333 134,3333 134,3333 134,3333 134,3333 134,3333
B.N. 106 ufc/mL 3 135,6667 135,6667 135,6667 135,6667 135,6667 135,6667
Tricho-1 106 ufc/mL 3 141,0000 141,0000 141,0000 141,0000 141,0000
ALE-155 106ufc/ mL 3 141,3333 141,3333 141,3333 141,3333 141,3333
Avibiol 20L/200L 3 146,6667 146,6667 146,6667 146,6667
BP-2 106 ufc/mL 3 147,6667 147,6667 147,6667 147,6667
Dalgin Active 0.6L/200L 3 149,0000 149,0000 149,0000
BP-1 106 ufc/mL 3 151,3333 151,3333
Licthor 1L/200L 3 151,3333 151,3333
Regalia Maxx 0.4L / 200L ( Follaje) 3 153,3333
Sig. ,106 ,108 ,058 ,063 ,051 ,054
Se visualizan las medias para los grupos en los subconjuntos homogéneos.
Se basa en las medias observadas.a. Utiliza el tamaño de la muestra de la media armónica = 3,000.
b. Alfa = 0,05.
Prueba de Duncan de la Altura de Plantones de palto var. Zutano
Trujllo, La Libertad, 2017.
Tratamiento N
Subconjunto
TABLA 3: MAGNITUD DE LA LESIÓN CAUSADA POR LASIODIPLODIA THEOBROMAE EN PLANTONES DE PALTO TRATADOS CON PRODUCTOS POSIBLES PROMOTORES DE RESISTENCIA SISTÉMICA:
CASA MALLA. TRUJILLO, LA LIBEERTAD, 2017.
TRAT. PRODUCTO
CONCENTRACIÓN
DE APLICACIÓN
L/200 L (follaje o
suelo)
MEDICION DE LESIONES EN MM
17/10/2017
TOTAL PROMEDIO PUESTOI II III
1REGALIA MAXX: Extracto de Reynoutria
sachalinensis0.4 (Follaje) 7.0 5.0 9.0 21.0 7.0 4
2REGALIA MAXX: Extracto de Reynoutria
sachalinensis0.5 (Follaje) 5.0 3.0 9.0 17.0 5.6 3
3 JMR2: Producto nanotecnológico 1 ( Follaje) 6.0 5.0 9.0 16.0 5.3 2
4 B.N. Bacteria aislada de cáscara de café. 106 ufc/mL 6.0 9.0 6.0 21.0 7.0 4
5ALE 155. Paenibacillus macerans aislada de
rizósfera de espárrago106 ufc/mL 20.0 20.0 14.0 54.0 18.0 10
6 BP-1. Bacteria endofita de palto 106 ufc/mL 7.0 9.0 7.0 23.0 7.6 5
7 BP-2. Bacteria endofita de palto 106 ufc/mL 9.0 10.0 10.0 29.0 9.6 6
8 CODAPHOS CU. Fosfito de Cu 0.6 11.0 14.0 11.0 36.0 12.0 7
3 CODAPHOS K: Fosfito de K 0.5 5.0 4.0 6.0 15.0 5.0 1
10DALGIN ACTIVE: Aminoácidos. Extracto de
algas con vitaminas.0.6 31.0 6.0 22.0 59.0 19.6 11
11LICHTOR: Carbohidratos, Ácido urónico, A.
Succínico, Mg, M.O., Aminácidos activos1.0 9.0 26.0 11.0 46.0 15.3 9
12 Trich-1. Trichoderma endofito de piña 106 ufc/mL 6.0 6.0 25.0 37.0 12.3 8
13 Trich-2. Trichoderma endofito de piña 106 ufc/mL 5.0 5.0 5.0 15.0 5,0 1
14
AVIBIOL: enmienda orgánica líquida.
Fermentación anaeróbica de estiércol de gallinas
ponedoras
20.0 9.0 35.0 34.0 78.0 26.0 12
15 TESTIGO AGUA 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0
16 TESTIGO: Lasiodiplodia thoebromae 106 c/mL 4.0 4.0 21.0 29.0 9.6 6
Tipo I de suma
de cuadradosGl
Media
cuadrá
tica
F Sig.
Tratamiento 1419.083 15 94.606 1.130 0.374
Bloques 78.881 2 39.441 0.471 0.629
Error 2511.952 30 83.732
Total 11262.000 48
Total corregido 4009.917 47
ENSAYO 3: ANVA DE MAGNITUD DE LA LESIÓN
PRODUCIDA POR Lasiodiplodia theombromae EN
PLANTONES DE PALTO DE LA VAR. ZUTANO TRATADOS
CON PROMOTORES DE RESISTENCIA SISTÉMICA. CASA
MALL. TRUJILLO, LA LIBERTAD, 2017.
Fuente
a. R al cuadrado = ,374 (R al cuadrado ajustada = ,019)
1 2 3
T-Agua 0.0 2 1.0000
Codaphos K 0.5 3 6.0000 6.0000
Trich-2 106 ufc/mL 3 6.6667 6.6667
Regalia Maxx 0.5 3 7.0000 7.0000
Regalia Maxx 0.4 3 8.0000 8.0000
BP-1 106 ufc/mL 3 8.6667 8.6667 8.6667
BP-2 106 ufc/mL 3 10.6667 10.6667 10.6667
JMR2 1 3 12.0000 12.0000 12.0000
T-Lasiodiplodia 106 ufc/mL 3 13.0000 13.0000 13.0000
Codaphos Cu 0.6 3 14.0000 14.0000 14.0000
ALE-155 106 ufc/mL 4 14.5000 14.5000 14.5000
B.N. 106 ufc/mL 4 15.0000 15.0000 15.0000
Trich-1 106 ufc/mL 3 16.0000 16.0000 16.0000
Licthor 1.0 3 16.3333 16.3333 16.3333
Dalgin Active 0.6 3 20.6667 20.6667
Avibiol 20 2 26.5000
Sig. 0.099 0.114 0.054
Se visualizan las medias para los grupos en los subconjuntos
homogéneos.a. Utiliza el tamaño de la muestra de la media armónica = 2,909.
b. Los tamaños de grupo no son iguales. Se utiliza la media
armónica de los tamaños de grupo. Los niveles de error de tipo I c. Alfa = 0.05.
kg-
L/200L
ENSAYO 3: DUNCAN DE MAGNITUD DE LA
LESIÓN PRODUCIDA POR Lasiodiplodia
theombromae EN PLANTONES DE PALTO DE LA
VAR. ZUTANO TRATADOS CON PROMOTORES
DE RESISTENCIA SISTÉMICA. CASA MALL.
TRUJILLO, LA LIBERTAD, 2017.
TratamientoN
Subconjunto
TABLA 4. COLONIZACIÓN DE LASIODIPLODIA THEOBROMAE EN TEJIDO VASCULAR Y CORTICAL DE PLANTONES DE PALTO VAR. ZUTANO,
TRATADOS CON PRODUCTOS POSIBLES PROMOTORES DE RESISTENCIA SISTÉMICA. CASA MALLA. TRUJILLO,
LA LIBERTAD, 2017.
TRAT. PRODUCT.CONC. DE APL.L/200L
(DRECH)
EVALUACIONES: Colonización de Lasiodiplodia sp. en tejido inoculado.
Medio de cultivo PDA enmendado
56 días después de la inoculación.
I II III SUMA PROM PUESTO
1 REGALIA MAXX 0.4 (Follaje) 60 100 60 220 73.30 4
2 REGALIA MAXX 0.5 (Follaje) 60 100 80 240 80.00 5
3 JMR2 1 ( Follaje) 60 40 100 200 66.67 3
4 B.N. 106 ufc/mL 100 100 80 280 93.33 6
5 ALE 155 106 ufc/mL 60 40 40 140 46.67 1
6 BP-1 106 ufc/mL 100 100 100 300 100.00 7
7 BP-2 106 ufc/mL 100 100 100 300 100.00 7
8 CODAPHOS CU 0.6 100 100 100 300 100.00 7
9 CODAPHOS K 0.5 100 100 100 300 100.00 7
10 DALGIN ACTIVE 0.6 0 100 40 140 46.67 1
11 LICHTOR 1.0 100 40 40 180 60.00 2
12 Trich-1 106 ufc/mL 40 100 100 240 80.00 5
13 Trich-2 106 ufc/mL 100 40 100 240 80.00 5
14 AVIBIOL 20.0 100 100 100 300 100.00 7
15 TEST. AGUA 0.0 0 0 0 0 0.00
16 TEST.LASIO. 106 c/mL 100 100 100 300 100.00 7
Avance del patógeno
Resistenca de la planta
46.6%
TABLA 5.CONTENIDO DE ÁCIDO JASMÓNICO Y ÁCIDO SALICÍLICO EN MUESTRAS DE TALLO
DE PLANTONES DE PALTO VAR. ZUTANO TRATADOS CON PRODUCTOS POSIBLES
PROMOTORES DE RESISTENIA SISTÉMICA CONTRA Lasiodiplodia theobromae. CASA MALLA,
TRUJILLO, LA LIBERTAD, 2017.
EXPRESADO EN P.P.M.
No.Muestra Ácido Jasmónico Ácido Salicílico
2Regalia Maxx: 0.5 L/100L 0.06 0.10
5ALE-155. Paenibacillus
macerans. 106 ufc/mL0.06 0.07
9 Codaphos K. 0.5L/200L 0.05 0.05
10 Dalgin Active.0.6L/200L 0.06 0.05
11 Licthor 1.0L/200L 0.06 0.05
13
Trich.-2( Trichoderma sp).106
ufc/mL0.03 0.03
15 Testigo-Agua 0.05 0.08
16 Lasiodiplodia 0.07 0.09
17 Testigo sin corte 0.04 <0.02
TABLA 6. PESO DE RAÍCES DE PLANTONES DE PALTO TRATADOS CON PRODUCTOS ORGÁNICOS Y
BIOLÓGICOS PARA PROMOVER RESISTENCIA SISTÉMICA CONTRA LASIODIPLODIA THEOBROMAE .
CASA MALLA. TRUJILLO, LA LIBERTAD, 2017.
TRAT. PRODUCT.
CONC. DE
APL.L/200L
(DRECH)
PESO DE RAÍZ (GRAMOS)
29.11.17.TOTAL PROMEDIO
I II III
1 REGALIA MAXX 0.4 (Follaje) 171.0 220.1 156.9 548.0 182.7
2 REGALIA MAXX 0.5 (Follaje) 104.3 149.6 161.7 415.6 138.5
3 JMR2 1 ( Follaje) 126.3 190.6 143.1 460.0 153.3
4 B.N. 106 ufc/mL 128.2 133.2 320.6 582.0 194.0
5 ALE 155 106 ufc/mL 197.4 197.8 220.0 615.2 205.1
6 BP-1 106 ufc/mL 133.7 97.7 135.5 366.9 122.3
7 BP-2 106 ufc/mL 125.7 122.1 133.6 381.4 127.1
8 CODAPHOS CU 0.6 172.3 106.8 143.0 422.1 140.7
9 CODAPHOS K 0.5 152.2 131.3 177.2 460.7 153.6
10 DALGIN ACTIVE 0.6 132.9 115.2 122.1 370.2 123.4
11 LICHTOR 1.0 122.5 140.0 128.3 390.8 130.3
12 Trich-1 106 ufc/mL 91.8 180.9 210.2 482.9 161.0
13 Trich-2 106 ufc/mL 161.9 159.3 130.6 451.8 150.6
14 AVIBIOL 20.0 132.0 116.0 57.4 305.3 101.8
15 TEST. AGUA 0.0 187.7 83.3 99.3 370.3 123.4
16 TEST.LASIO. 106 c/mL 113.1 219.4 164.9 497.4 165.8
Tipo I de suma
de cuadrados gl
Media
cuadrática F Sig.
Bloques 198494,292 2 99247,146 ,528 ,595
Tratamient
o3606005,979 15 240400,399 1,278 ,275
Error 5643419,708 30 188113,990
Total 115082021,000 48
Total
corregido9447919,979 47
Análisis de Varianza del peso de raíz de palto var. Zutano
Trujillo, La Libertad, 2017.
Origen
a. R al cuadrado = ,403 (R al cuadrado ajustada = ,064)
1 2
Avibiol 20L/200L 3 101. 8
BP-1 106 ufc / mL 3 122.3 122.3
Dalgin Active 0.6 L/200L 3 123.4 123.4
Agua 3 123.4 123.4
BP-2 106 ufc/mL 3 127.1 127.1
Licthor 1L/200L 3 130.3 130.3
Regalia Maxx 0.5 L/200L (Follaje) 3 138.5 138.5
Codaphos Cu 0.6L/200L 3 140.7 140.7
Tricho-2 106 ufc/mL 3 150.6 150.6
JMR2 1L/200L (Follaje) 3 153.3 153.3
Codaphos K 0.5 L/200L 3 153.6 153.6
Tricho-1 106 ufc / mL 3 160.9 160.9
Lasiodiplodia 106 ufc/mL 3 165.8 165.8
Regalia Maxx 0.4 L/200L (Follaje) 3 182.7 182.7
B.N. 106 ufc / mL 3 194.0
ALE-155 106 ufc/mL 3 205.1
Sig. ,064 ,059
Prueb de Duncan del peso de raíz de palto var
Zutano
TratamientoN
Subconjunto
Conclusiones:• Los tratamientos en los que se observó el menor daño (lesión externa): Codaphos
K: 0.5 L/ 200L, Tricho-2; Trichoderma virens endófito de piña: 106 c/mL, JMR2, compuesto nanotecnológico: 1L/200L, Regalia Maxx 05.L/200L y Regalia Maxx0.4L/200L.
• El menor avance sistémico de Lasiosiplodia se encontró en el tejido tratado con Dalgin Active, Paenibacillus macerans strain ALE-155 y Licthor.
• El más alto contenido de ácido salicílico y ácido jasmónico se registró en el tejido tratado con 0.5L/ 200L de Regalia Maxx que, presentó 5 veces más que la muestra conformada por plantones que no habían sido cortados.
• Paenibacillus macerans starin ALE 155, B.N. (bacteria aislada de la cáscara del café) promovieron significativamente el desarrollo radicular de los plantones.
RECONOCIMIENTO
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