7/23/2019 Validacion Del Metodo Analtico Para Nimesulida Por UV-Vis
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INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL
UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE BIOTECNOLOGIA
VALIDACIN DEL MTODO ANALITICO PARA NIMESULIDA PORESPECTROFOTOMETRIA U.V
INFORME TCNICO DE LA OPCION CURRICULAR EN LA MODALIDAD DE:
ESTANCIA INDUSTRIAL
QUE PARA OBTENER EL TITULO DEINGENIERO FARMACEUTICO
PRESENTA:
ALONSO CHVEZ GUADALUPE
ASESORES:
EXTERNO: QFB BEATRIZ GONZLEZ SNCHEZINTERNO: QFB MA. ESTHER BAUTIZTA R
Mxico, D.F. a 19 mayo de 2008.
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INDICE
I. HISTORIA DE LA EMPRESA .2
2. SIMBOLOS Y ABREVIATURAS .7
3.INTRODUCCION .8
3.1 Ficha tcnica de Nimesulida .8
3.2 Validacin de Mtodos Analticos 10
3.3 Clasificacin de Mtodos
Analticos
11
3.4Parmetros a Evaluar 12
3.5 Informe del proceso de
Validacin
17
4.JUSTIFICACION 18
5. OBJETIVOS 19
6. METODOLOGIA 20
6.1 Mtodo Potenciomtrico 20
6.2Mtodo Espectrofotometrico 22
7. RESULTADOS 26
7.1 Mtodo Potenciomtrico 26
7.2 Mtodo Espectrofotometrico 36
8. COMPARACION DE METODOS 50
9.ANALISIS DE RESULTADOS 53
10.CONCLUSIONES 54
11. BIBLIOGRAFIA 55
12.ANEXOS 56
1
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I. HISTORIA DE LA EMPRESA.
El 7 de enero de 1953 nace Mavi Farmacutica en la ciudad de Mxico, con el objeto de
fabricar medicamentos de uso humano, de calidad reconocida y a precio accesible para
la mayora, buscando la formacin integral y el bienestar de sus empleados.
Es fundada por la familia Alonso Vilatela, es una empresa mexicana financiada en sutotalidad por capital nacional. Despus de 8 exitoso aos, en 1961 los socios fundan una
segunda empresa llamada Laboratorios Euromex, con el objetivo de proveer un mayor
numero de especialidades farmacuticas. En le ao de 1980, se forma un grupo
industrial Farmex como empresa controladora de laboratorios Euromex y Mavi
Farmacutica. Ese mismo ao se adquiere la empresa Corporacin Farmacutica.
De esta manera, Grupo Industrial Farmex se convierte en un conglomerado fuerte y
solid. Buscando una mayor integracin, en 1984 crea Qumica Fina Farmex, empresaproductora de principios activos farmacuticos. Estas materias primas se comercializan
tanto en el mercado nacional como internacional.
Atendiendo los siguientes sectores.
* Lnea comercial (Mavi farmacutica, laboratorio Euromex)
* Sector Salud (Mavi farmacutica, laboratorio Euromex)
* Lnea frmaco qumica (qumica fina Farmex)
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I:I LOCALIZACIN DE LA PLANTA:
Direccin:
Calle Triangulo esquina con Osa Menor, Colonia Prado Churubusco, S/N, CP 04370,Delegacin Coyoacn.
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I.2 MISION:
Desarrollar, producir y comercializar medicamentos para atender la salud humana, de
calidad reconocida y a precio accesible, impulsando la formacin integral y el bienestar
de sus empleados y generando una retribucin justa para los accionistas que asegure la
permanencia y Crecimiento de la organizacin.
I.3 POLITICA DE CALIDAD:
En nuestra organizacin la calidad se demuestra:
* Desarrollando y produciendo medicamentos conforme a lo que dispone la Ley
General de Salud.
* Desempeando actividades dando cumplimiento a La NOM 059 y la ISO
9001:2000
* Esforzndose continuamente en mejora de procesos, y el ambiente de trabajo,
la comunicacin con clientes, proveedores y empleados.
* Verificando la satisfaccin de nuestros clientes, la capacidad de proveedores y
eficacia de los procesos.
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I.4 LINEA DE PRODUCTOS GENERALES DE LA EMPRESA:
1.
ANALGESICOS
2.
ANTIBIOTICOS
3. ANTIMICROBIANOS
LINEA DE PRODUCTOS ESPECIFICOS DE LA EMPRESA.
NOMBRE COMERCIAL SUSTANCIA ACT IVA PRESENTACINACITAB Acido acetil saliclico Caja c/20 tabletasAMIKAVI Amikacina Caja c/ 1 ampolletaARTROBEN CREMA Bencidamina Caja c/1 tubo de 60 gARTROBEN SPRAY Bencidamina Caja c/frasco de 30 mLAXTIN Fluoxetina Caja c/14 cpsulasBACTOKINA Lincomicina Caja c/ 6 ampolletasBIOTAxIL Amoxicilina Caja c/ frasco 75 mLCATONA Captopril Caja c/30 tabletas
DALATINA Clindamicina Caja c/1 tubo de 30 gDISTENTAL Bromuro de pinaverio Caja c/14 tabletasEUFLUXIN Ciprofloxacino Caja c/12 comprimidosEURIFAM Rifampicina Caja c/16 cpsulasEUROLOL Metoprolol Caja c/20 tabletasFENAGEL Diclofenaco dietil amonio Caja c/1 tubo 60gFLUOSEP Ofloxacino Caja c/10 grageasFLUXIBIT Loratadina/ambroxol Caja c/1 frasco de 120 mLINFLANOX Naproxeno Caja c/12 tabletasITAMOL Subsalicilato de bismuto Caja c/24 tabletas
masticables
LESACLOR SUSPENSION Aciclovir Caja c/ 1 frasco 125 mLLESIDEN Nimesulida Caja c/ 1 frasco 60 mLMACROFURIN Nitrofurantona Caja c/40 cpsulasMAVICAM Meloxicam Caja c/ 14 tabletasMAVIDOL Ketorolaco Caja c/10 tabletas
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ORTOCOL FORTE DICLOFENACO/COMPLEJOB CAJA C/30 GRAGEASSINFRAC Alendronato sdico Caja c/30 tabletasTAXENAN Naproxeno/Paracetamol Caja c/10 tabletas
UREZOL Fenazopiridina Caja c/20 tabletasVIKROL Claritromicina Caja c/10 tabletasXINAMIN Complejo B Caja c/30 tabletas
GNERICOS INTERCAMBIABLES
SUSTANCIA ACTIVA PRESENTACION
CINARIZINA Caja c/60 tabletasCLARITROMICINA Caja c/10 tabletasCLINDAMICINA Caja c/ 16 capsulasDICLOFENACO Caja c/ 2 ampolletasDIFENHIDRAMINA Caja c/ 1 frascoFLUCONAZOL Caja c/ frascoHIDRALAZINA Caja c/5 ampolletasKETAMINA Caja c/ 1 frascoKETOROLACO Caja c/ 3 ampolletasLORATADINA Caja c/ 1 frascoMICONAZOL Caja c/ 1 tubo
ONDANSETRON Caja c/ 3 ampolletasTERBUTALNA Caja c/ 3 ampolletasENALAPRIL Caja c/10 tabletasFENAZOPIRIDINA Caja c/ 20 tabletasFENOBARBITAL Caja c/1 frascoPEROXIDO DE BENZOILO Caja c/ 1 frascoRIFAMPICINA Caja c/ 1 frascoSULFATO FERROSO Caja c/ 1 frasco
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2. SIMBOLOS Y ABREVIATURAS:
Cuando se haga referencia a los siguientes smbolos o abreviaturas se entera:
S Desviacin estndar
S2 Varianza
S12 Varianza del mtodo 1
S22 Varianza del mtodo 2
F0.025,n2-1,n1-1 Valor de la distribucin F de fisher asociado a una
confianza del 2.5% y agrados de libertad
establecidos.
F0.975,n2-1,n1-1 Valor de la distribucin F de fisher asociado a una
confianza del 97.5% y agrados de libertad
establecidos.
SB2 Varianza del mtodo 2
SA2 Varianza del mtodo 1
b Pendiente
r2 Coeficiente de determinacin
CV Coeficiente de variacin
LD Limite de deteccin
LC Limite de cuantificacin
x Media aritmtica de xy Media aritmtica de y
n Numero de mediciones o recobros o blancos o
muestras o determinaciones.
SRf Sustancia de referencia
22/1
2 Razn de varianzas poblacionales
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3 INT RODUCCION:
3.1 FICHA TECNICA DE NIMESULIDA
Nimesulida es una molcula derivada de la sulfonanilida con accin antiinflamatoria,
antipirtica y analgsica que pertenece al grupo de los antiinflamatorios no esteroideos.
ESTRUCTURA
Nimesulida difiere de otros AINES por poseer una sulfonanilida, como su grupo acdico
funcional, que le dota de un perfil farmacolgico nico. Nimesulida inhibe la
prostaglandina sintetasa, tambin conocida como ciclooxigenasa, que modifica los
lmites de produccin de prostaglandina. Su potencia inhibitoria de la ciclooxigenasa se
considera intermedia cuando se compara con otros AINES. Se ha demostrado
recientemente que la ciclooxigenasa existe en dos formas isomorfas en el organismo,
denominadas COX-1 y COX-2. La COX-1 es una enzima constitutiva que produce
prostaglandinas que son esenciales para el mantenimiento de la homeostasis vascular ylas funciones gstricas y renales normales. La COX-2 es una enzima inducible que es
responsable de la liberacin de prostaglandinas durante la inflamacin. Segn esto,
parece positivo que la actividad antiinflamatoria positiva de los AINES se puede atribuir
a su capacidad para inhibir la COX-2, mientras que las reacciones adversas asociadas se
deben a su capacidad para inhibir la COX-1.
Nimesulida posee un efecto "scavenger" que interfiere con la produccin de radicales
libres por los leucocitos sin inhibir la quimiotaxis y la fagocitosis. Los productos de losradicales libres directa e indirectamente lesionan los tejidos del husped y contribuyen
al mantenimiento del proceso inflamatorio.
Nimesulida protege la lesin tisular que ocurre durante la inflamacin y "cortacircuita"
el proceso inflamatorio. De esta manera, ejerce un potente efecto antiinflamatorio in
vivo.
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Pr opi edades f ar macoci nt i cas
Nimesulida es bien absorbido por va oral y alcanza la concentracin plasmtica mximaen 1-3 horas; tiene una semivida de 2-3 horas y una duracin de accin de 6-8 h; por va
rectal el pico plasmtico se alcanza en aproximadamente 4 h con un tiempo de
eliminacin de alrededor de 5 horas.
La administracin diaria de 1 comprimido, cada 12 horas, con 100 mg de Nimesulida,
que es la dosis usual en las patologas con un componente inflamatorio, logra el estado
de equilibrio en 24-36 horas. La administracin reiterada no da lugar a fenmenos de
acumulacin.
Nimesulida se une ampliamente (99%) a las protenas plasmticas y posee un volumen de
distribucin aparente estimado de 0,19 a 0,35 l/kg tras la administracin oral.
Nimesulida se metaboliza en gran medida (1 a 3 % de la dosis se excreta invariable en la
orina) en varios metabolitos que se excretan principalmente en la orina (aprox. 70%) o
en heces (aprox. 20%). El frmaco es casi completamente biotransformado en 4-hidroxi-
nimesulida en ambas formas libre y conjugada, metabolito que parece contribuir a laactividad antiinflamatoria del compuesto.
Nimesulida se excreta principalmente por va urinaria (80%) y en menor cuanta por
heces (20%).
Indicaciones Teraputicas
Tratamiento sintomtico de la artropata degenerativa (artrosis).
Tratamiento de procesos inflamatorios y dolorosos agudos de diversas etiologas tales
como postoperatorio y traumatismos musculoesquelticos.
Dismenorrea primaria y como antipirtico.
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3.2 VALIDACIN DE MTODOS ANALITICOS:
En la industria farmacutica siempre acta buscando la calidad de los medicamentos y
de los procesos de fabricacin, por lo que es plenamente importante garantizar que el
medicamento es seguro, eficaz y eso se garantiza mediante la validacin.
Es por eso que los mtodos analticos deben cumplir con las exigencias de:
La Direccin general de medicamentos insumos y drogas (Digemid)
Reglamento de Insumos para la Salud, publicado en el diario Oficial el 4 de Febrero de
1988 referente a los establecimientos que destinen la fabricacin de insumos
(medicamentos, frmacos, materias primas y aditivos).
La Norma Oficial Mexicana NOM-059-SSA-1993 Buenas Prcticas de Manufactura de
productos farmacuticos, que establece los siguientes puntos:
1.
NUMERAL DE LA NORMA (5.6.3): Que se lleven acabo estudios de validacin de
los procesos de fabricacin y de los sistemas involucrados.
2.
NUMERAL DE LA NORMA (9.11.3): Los Mtodos Analticos deben ser validados, de
acuerdo con lo establecido en el apartado 9.12 Control de Laboratorio
Analtico
3. NUMERAL DE LA NORMA (9.12.3): Se debe contar con mtodos de anlisis
validados para producto a granel, terminado y materia prima en caso de no
aparecer en cualquier farmacopea internacional ni en la FEUM.
Norma Oficial Mexicana NOM-164-SSA1-1998 Buenas Prcticas de Fabricacin para
Frmacos que establece:
1. NUMERAL DE LA NORMA (16.1): Los controles de laboratorio e inspecciones deben
apoyarse en normas, PNOs o manuales que contengan las especificaciones para
garantizar la confiabilidad de sus resultados.
2.
NUMERAL DE LA NORMA (16.1.5): Validacin de Mtodos Analticos utilizados por
la empresa, NO farmacopeicos o farmacopeicos que tengan desviaciones frente a
la farmacopea de referencia.
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Buenas Prcticas de Laboratorio.
Un laboratorio de anlisis debe tener como principal propsito la produccin de datosanalticos de alta calidad por medio de uso d mediciones analiticas que sean precisas,
confiables y adecuadas para tal fin. Esto puede alcanzarse si se cuenta con un sistema
planificado y documentado de la calidad de las actividades, para esto el laboratorio
necesitara operar bajo un sistema de garanta de calidad que incluya una extensa
documentacin de sus actividades.
La validacin de un mtodo analtico, garantiza la calidad del medicamento, as mismo
es necesaria por que:
1.
proporciona alto grado de confianza, seguridad den mtodo y calidad en los
resultados.
2.
permite el conocimiento profundo del mtodo, si como las caractersticas.
3.
este conocimiento y seguridad ayuda a la disminucin de fallas y repeticiones,
por que lleva al ahorro de costos asociados y a cumplir con los tiempos previstos
de anlisis.
3.3 CLASIFICACION DE MTODOS ANALITICOS:
1.- En funcin de su estado Regulatorio:
* Mtodos farmacopeicos.
* Mtodos No farmacopeicos.
2.- En funcin de su aplicacin:
* Mtodos para producto a granel.
* Mtodos para producto terminado.
* Mtodos para Materia Prima.
* Mtodos indicadores de Estabilidad.
3.- En funcin de la Naturaleza de la respuesta analtica:
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* Mtodos fsico-qumicos.
* Mtodos Biolgicos.
4.- En funcin de propsito analtico:
* Mtodos para cuantificar el analito.
* Mtodos para establecer la presencia del analito a un lmite.
* Mtodos para identificar el analito.
5.- En funcin de la naturaleza del sistema de medicin:
* Mtodos en los cuales el instrumento de medicin de la respuesta analtica,
permite medir el ruido (cromatogramas, espectrofotmetro).
* Mtodos en los cuales el instrumento de medicin de la respuesta analtica, no
permite medir el ruido (potencimetros, buretas, etc.).
3.4 LAS CARACTERSTICAS DEL DESEMPEO DEL MTODO SE EXPRESA EN
FUNCIN DE LOS SIGUIENTES PARMETROS:
Selectividad
Capacidad de un mtodo analtico para determinar nicamente los componentes que se
pretenden medir.
Sensibilidad
Es la pendiente de la recta de calibracin que se obtiene cuando el resultado (o seal)
de la medida o una funcin de la misma se representa frente a la cantidad o
concentracin del analito.
Linealidad del sistema:
Criterios de aceptacin:
El valor del coeficiente de determinacin r2 deber ser 0.98
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El intervalo de confianza para la pendiente debe incluir la unidad
El coeficiente de variacin CV deber ser:
3% Si es qumico o espectrofotomtrico.
2% Si es volumtrico o cromatografico.
5% Si es microbiolgico
El porcentaje de recobro deber ser:
98-102% Si el mtodo es cromatografico, volumtrico.
97-103% Si el mtodo es qumico o espectrofotomtrico.
95-105% Si el mtodo es microbiolgico.
Linealidad del mtodo analtico:
Es su capacidad para demostrar que los resultados de la prueba son directamente
proporcionales a ala concentracin del analito dentro de un rango dado. Se clasifica en
dos:
1.
Cuando se conocen los componentes de la muestra y es posible preparar un
placebo analtico.
2.
No se conocen los componentes de la muestra.
Criterios de aceptacin:
El valor del coeficiente de determinacin r2 deber ser 0.98
El intervalo de confianza para la pendiente debe incluir la unidadEl coeficiente de variacin CV deber ser:
3% Si es qumico o espectrofotomtrico.
2% Si es volumtrico o cromatografico.
5% Si es microbiolgico
El porcentaje de recobro deber ser:
98-102% Si el mtodo es cromatografico, volumtrico.
97-103% Si el mtodo es qumico o espectrofotomtrico.
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95-105% Si el mtodo es microbiolgico.
Linealidad en el intervalo de aplicacin
La pendiente de la recta de calibracin debe ser constante en todo el intervalo de
aplicacin del procedimiento de medida. El lmite inferior de dicho intervalo vendr
determinado por el valor obtenido para el lmite de cuantificacin del mtodo. El lmite
superior del intervalo estar condicionado, en general, por la prdida de linealidad en
la curva de calibracin.
Exactitud:
Es la proximidad entre los resultados obtenidos por este mtodo y el valor real. La
exactitud del mtodo analtico se debe establecerse a lo largo de todo un rango.
Criterios de aceptacin:
El intervalo de confianza para la diferencia de las dos medias poblacionales del
porcentaje de recobro, debe incluir el valor de cero. Cualquier otro criterio debe ser
justificado.
Rango:
Es el intervalo entre los niveles superior e inferior, en el que se ha demostrado un nivel
adecuado de precisin, exactitud y linealidad del mtodo tal cual esta escrito.
Repetibilidad:
a.
Cualitativamente
Es el grado de concordancia entre resultados sucesivos obtenidos con el mismo
mtodo sobre una materia idntica sometida al ensayo, en las mismas
condiciones (siempre el mismo operador, igual aparato, igual laboratorio y en
pequeos intervalos de tiempo).
b.
Cuantitativamente
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Es el valor por debajo del cual est situado, con una probabilidad especificada,
el valor absoluto de la diferencia entre dos resultados individuales obtenidos en
las condiciones anteriormente expuestas.
En ausencia de otra indicacin se entender que la probabilidad es del 95%.
Criterios de aceptacin:
El intervalo d confianza para la razn de varianzas, deber incluir el valor de 1.
Cualquier otro criterio debe ser justificado.
Reproducibilidad:
a.
Cualitativamente
Es el grado de concordancia entre dos resultados individuales obtenidos con el
mismo mtodo sobre una materia idntica sometida al ensayo, pero en
condiciones diferentes (operadores distintos, aparatos diferentes, distintos
laboratorios y/o pocas diferentes).
b.
Cuantitativamente
Es el valor por debajo del cual est situado, con una probabilidad especificada,
el valor absoluto de la diferencia entre dos resultados individuales obtenidos en
las condiciones anteriormente expuestas.
En ausencia de otra indicacin se entender que la probabilidad es del 95%.
Lmite de deteccin:
Es la menor cantidad de analito que puede ser detectada y diferenciada de un blanco,
pero no necesariamente cuantificada con un nivel aceptable de exactitud y precisin.
Criterios de aceptacin:
El LD debe ser menor a la especificacin.
El valor del coeficiente de determinacin r2 deber ser 0.98
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El intervalo de confianza para la pendiente no debe incluir el cero.
Lmite de cuantificacin:
Es la cantidad o concentracin mnima que puede determinarse con un nivel aceptable
de exactitud y precisin.
Criterios de aceptacin:
El LC debe ser menor a la especificacin.
El valor del coeficiente de determinacin r2 deber ser 0.98
El intervalo de confianza para la pendiente no debe incluir el cero
Incertidumbre de la medida:
Estimacin que caracteriza el intervalo de valores en el que se sita generalmente, con
una alta probabilidad, el valor verdadero de la magnitud medida.
La incertidumbre de la medida incluye, en general, varios componentes. Algunos
pueden estimarse a partir de la distribucin estadstica de los resultados de una serie de
mediciones y pueden caracterizarse por la desviacin tpica muestral. La estimacin de
otros componentes solamente puede basarse en la experiencia o en otras informaciones.
Incertidumbre global:
Es una cantidad utilizada para caracterizar, como un todo, la incertidumbre del
resultado dado por un equipo o un procedimiento de medida.
Precisin:
Es el grado de concordancia entre los resultados obtenidos aplicando el mtodo
repetidas veces, bajo condiciones determinadas. La precisin slo depende de la
distribucin de errores aleatorios.
Criterios de aceptacin:
El intervalo de confianza para la pendiente debe incluir el valor de 1.
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3.5 INFORME DEL PROCESO DE VALIDACIN
El protocolo de validacin deber incluir al menos la siguiente informacin:
a.
Titulo
b. Propsito u objetivo.
c. Responsabilidades
d. Plan de prueba
e. Criterios de aceptacin
El informe de validacin deber incluir al menos la siguiente informacin:
a.
Descripcin completa de la muestra, especificando.
o Tiempo y condiciones de muestreo.
o Cantidad mnima necesaria.
o Instrumental y recipientes adecuados para la toma y conservacin
de las muestras.
o Aditivos cuando sean necesarios.
o Precauciones a tomar una vez recogida la muestra (por ejemplo:
tiempo y temperatura de conservacin).
b. Descripcin completa del mtodo analtico.
c. Concentraciones ensayadas.
d.
Valores obtenidos en los ensayos realizados.
e.
Valores calculados para la precisin, r2 y CV para cada concentracin.
f.
Justificacin tcnica de la omisin de algn ensayo.
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4.JUSTIFICACIN:
Hoy en da la competencia cada vez es ms fuerte en la Industria Farmacutica. Es por
eso que el contar con mtodos validados para el anlisis de materia prima, producto a
granel y terminado confiere alto grado de confiabilidad en la elaboracin de un
producto, proporcionando as la calidad del producto para quien lo consuma,
garantizando el fin para el cual fue creado.
La validacin de un procedimiento de medida, certifica mediante estudios de
laboratorio, que las caractersticas de dicho procedimiento cumplen las especificaciones
relativas al uso previsto de los resultados analticos.
La validacin permite el conocimiento de las caractersticas de funcionamiento del
mtodo y proporciona un alto grado de confianza en el mismo y en los resultados
obtenidos al aplicarlo mediante evidencia documentada y aprobada por el sistema de
calidad de la empresa.
La validacin de un Mtodo Analtico constituye un instrumento importante para
garantizar la calidad de un medicamento, puesto que confiere la fiabilidad a los
resultados obtenidos en el anlisis, asegurando as que cumplan con los parmetros de
calidad establecidos.
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5. OBJETIVOS:
OBJETIVO GENERAL:
Validar el mtodo analtico para la valoracin de Nimesulida
materia prima:
* Por UV
* Por titulacin potenciomtrica.
Realizar la comparacin de mtodos mediante la validacin para
demostrar que se pueden utilizar indistintamente y que se puede
reemplazar el mtodo espectrofotomtrico por el potenciomtrico.
OBJETIVOS ESPECIFICOS:
Comprobar mediante los resultados obtenidos de la validacin, que
el mtodo espectrofotomtrico se puede reemplazar como mtodo
rutinario de control de calidad.
Demostrar la aplicabilidad del mtodo a las instalaciones y
equipo con el que se cuenta en la empresa.
Comprobar que se cumplen con las especificaciones para dichomtodo.
Demostrar que el mtodo por UV sea reproducible, lineal, exacto.
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6 METODOLOGIA:
6.1 T ITULACIN POTENCIOMETRICA
a) Mt odo de anl i sis de la va lor aci n:
Pesar con exactitud aproximadamente 240 mg de la muestra, transferir a un matraz
erlenmeyer de 250 y disolver en 30 ml. de Acetona RA y 20 ml de Agua purificada.
Titular con solucin 0.1 M de hidrxido de sodio. Determinar en punto de equivalencia
potencio mtricamente. Cada mililitro de solucin de 0.1M de hidrxido de sodio
equivale a 30.83 mg de Nimesulida.
REACTIVOS:
Agua purificada.
Acetona RA
Nimesulida MP lote: NM/3330107
Hidrxido de sodio 0.1 M SV
cido clorhdrico 0.1M SV
EQUIPO Y MATERIAL:
Parrilla de agitacin Thermolyne
Bureta Kimax de 50 ml.
Balanza analtica Sartorius BP 2215
Matraz erlenmeyer Kimax de 250 ml.
Pinzas para bureta.
Pipetas de 20,10 ml.
Agitador magntico
Esptula de acero inoxidable.
Soporte universal.
Perilla de succin.
Potencimetro Sicnno.
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b)
Ensayos de val id acin:
1.- LINEALIDAD DEL SISTEMA DE MEDICION:
Construir una curva de calibracin a los niveles 40, 60, 80, 90, 100,110 %, por medio de
pesadas independientes, transferir a un matraz erlenmeyer y adicionar 30 ml. de
Acetona RA y 20 ml de Agua purificada. Titular con solucin 0.1 M de hidrxido de sodio.
Determinar en punto de equivalencia potenciomtricamente.
NIVEL% CANTIDAD ADICIONADA
(mg)
NO. DE REPLICAS
40 96 3
60 144 3
80 192 3
90 216 3
100 240 6
120 288 3
Criterios de aceptacin: se determinaran evaluando los resultados obtenidos por
regresin lineal.
Calcular la pendiente
El intercepto en y deber ser cercano a 0
El valor del coeficiente de correlacin r deber ser 0.99 o mayor
El intervalo de confianza para la pendiente no debe incluir el cero
El coeficiente de variacin CV deber ser menor al 1.5%
2.-PRECISION DEL SISTEMA:
Tomar los resultados obtenidos en el nivel al 100% y calcular los valores de , SD, y el
CV. El criterio de aceptacin es: CV 1.5%
3.- LINEALIDAD DEL METODO:
No aplica debido a que es materia prima y se toma la linealidad del sistema.
Calcular la pendiente
Calcular la ordenada al origenEl valor del coeficiente de determinacin r2 deber ser 0.98 o mayor
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El intervalo de confianza para la pendiente debe incluir la unidad
El coeficiente de variacin CV deber ser 2%
4.- EXACTITUD Y REPETIBILIDAD AL 100%:
No aplica debido a que es materia prima y se toma el la linealidad del sistema al nivel
100%. Determinar el CV total
El criterio de aceptacin es para el porcentaje de recobro: 98 al 102%
5.- REPRODUCIBILIDAD DEL METODO:
Realizar el anlisis como se indica en la parte a) de este protocolo. Con 2 analistas, endos das diferentes, por triplicado. Calcular el CV y realizar el anlisis de varianza.
El criterio de aceptacin para el porcentaje de recobro es: 2% .
6.2 ESPECTROFOTOMETRA U.V
REACTIVOS:
Nimesulida SRef. Lote No: 117H1019
Nimesulida Lote No: NM/3330107 (materia prima)
Agua Purificada
Hidrxido de sodio SV
EQUIPO, INSTRUMENTOS Y MATERIAL:
Espectrofotmetro Hawlett Packard
Perilla de succin
Esptula de acero inoxidable
Balanza analtica (Sartorius)
Matraces aforados de 50, 100 y 200 mL
Pipeta volumtrica de 2, 3, 4, 5, 6 y 7mL
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a)
Mt odo de anl i sis de l a va lor aci n:
Preparacin de la referencia:
Transferir alrededor de 50 mg Nimesulida SRef a un matraz volumtrico de 100 mL.
disolver y aforar con hidrxido de sodio 0.1 N, transferir una alcuota de 2 mL. de
solucin a un matraz volumtrico de 100 mL, diluir a volumen con agua y mezclar.
Preparacin de la muestra:
Seguir el tratamiento de la preparacin de la referencia pero con la muestra.
Procedimiento:
Determinar las absorbancias de ambas preparaciones en celdas de 1cm, a la longitud de
onda mxima de absorbancia, utilizando como blanco de ajuste Hidrxido de sodio 0.1
N. Calcular el porcentaje de Nimesulida en la muestra por medio de la siguiente
frmula:
(Am/Aref)(Cref/Cm)100
Donde:
Am/Aref = Las absorbancias de la preparacin de la muestra y la preparacin de la
referencia, respectivamente.
Cref/Cm = Las concentraciones en miligramos por mililitro de la preparacin de la
referencia y de la preparacin de la muestra, respectivamente.
b) Ensayos de val id acin:
1. LINEALIDAD DEL SISTEMA DE MEDICIN:
Construir una curva de calibracin de la respuesta del equipo contra la cantidad
adicionada de principio activo, a los niveles 40, 60, 80, 100,120 y 140 %, partiendo de
una solucin patrn (Stock). Tomar el volumen de alcuota de acuerdo con la siguiente
tabla y llevar aforo a 50 mL con agua.
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NIVEL%
VOL. ALICUOTAmL
No. REPLICAS
40 2 360 3 380 4 3100 5 6120 6 3140 7 3
Leer todas las muestras a 392 nm en celdas de 1.0 cm. Registrar los resultados y
calcular los valores de m, b, mr, br, r y r
2
.
El valor del coeficiente de determinacin r2 deber ser de 0.98 o mayor.
El coeficiente de variacin CV deber ser menor al 1.5%
2.-PRECISIN DEL SISTEMA:
Tomar los resultados obtenidos con el nivel al 100 % de la linealidad del sistema y
calcular los valores de x, y el C.V.
El criterio de aceptacin es: CV 1.5%
3. LINEALIDAD DEL MTODO:
Construir una curva de calibracin a los niveles 40, 60, 80, 100, 120, 140 mezclar y
llevar al aforo con Hidrxido de sodio 0.1 N. Transferir una alcuota de 2 mL de la
solucin a un matraz volumtrico de 100 mL, diluir a volumen con agua y mezclar.
Analizar por sextuplicado y en das diferentes, al azar, incluyendo en cada da la
preparacin de reactivos y soluciones de referencia.
NIVEL % CANTIDAD (mg) No. REPLICAS
40 20 6
60 30 6
80 40 6
100 50 6
120 60 6
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140 70 6
Calcular:
Calcular el porcentaje de recobro.
El valor del coeficiente de determinacin r2 deber ser 0.98 o mayor
El coeficiente de variacin CV deber ser 3%
4.-EXACTITUD Y REPETIBILIDAD:
Emplear los resultados obtenidos en la linealidad del mtodo, en nivel 100% y
determinar el coeficiente de variacin del % recuperado.
El criterio de aceptacin para el porcentaje de recobro es: 97-103%.
5. REPRODUCIBILIDAD DEL MTODO:
Realizar el anlisis como se indica en la parte A) de este protocolo, con 2 analistas, en
dos das diferentes, Calcular los % recuperados, C.V. y realizar el anlisis de varianza
con el porcentaje recuperado.
El criterio de aceptacin para el porcentaje de recobro es: 3%.
6. LIMITE DE DETECCIN Y CUANTIFICACIN:
Con lo s resultados obtenidos en la curva de calibracin de la linealidad del sistema
calcular el valor de la pendiente (b1), el coeficiente de determinacin (r2) y la
desviacin estndar de la regresin (Sx/y) y con ellos obtener el limite de deteccin y
cuantificacin.
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7 RESULTADOS:
7.1 MTODO POR T ITULACIN POTENCIOMETRICA
LINEALIDAD DEL SISTEMA
Para determinar el volumen real de titulacin se realizo el mtodo de la segunda
derivada, por el que se determino el volumen real ocupado por cada muestra y en cada
nivel. Este volumen es necesario para el calculo del porcentaje recuperado en cada
muestra ya que cada 1 mL de NaOH es equivalente a 30.83 mg de Nimesulida.
Ejemplo de clculo (M5 del nivel al 100%): obtencin de 2da derivada, hoja de
calculo exel.
MUESTRA 5 NIVEL 100 % 2 DA DERIVADAV(mL) volts E V Vr E/V (E/Vra) Vda Vda 2E/V2)
0 109 -33 0.2 0.1 -165 100 0.2 0.2 5000.2 76 -13 0.2 0.3 -65 -5 0.2 0.4 -25
0.4 63 -14 0.2 0.5 -70 25 0.2 0.6 1250.6 49 -9 0.2 0.7 -45 0 0.2 0.8 00.8 40 -9 0.2 0.9 -45 -20 0.2 1 -1001 31 -13 0.2 1.1 -65 35 0.2 1.2 175
1.2 18 -6 0.2 1.3 -30 10 0.2 1.4 501.4 12 -4 0.2 1.5 -20 0 0.2 1.6 01.6 8 -4 0.2 1.7 -20 0 0.2 1.8 01.8 4 -4 0.2 1.9 -20 5 0.2 2 252 0 -3 0.2 2.1 -15 -5 0.2 2.2 -25
2.2 -3 -4 0.2 2.3 -20 5 0.2 2.4 252.4 -7 -3 0.2 2.5 -15 -5 0.2 2.6 -25
2.6 -10 -4 0.2 2.7 -20 0 0.2 2.8 02.8 -14 -4 0.2 2.9 -20 5 0.2 3 253 -18 -3 0.2 3.1 -15 0 0.2 3.2 0
3.2 -21 -3 0.2 3.3 -15 0 0.2 3.4 03.4 -24 -3 0.2 3.5 -15 5 0.2 3.6 253.6 -27 -2 0.2 3.7 -10 0 0.2 3.8 03.8 -29 -2 0.2 3.9 -10 -5 0.2 4 -254 -31 -3 0.2 4.1 -15 0 0.2 4.2 0
4.2 -34 -3 0.2 4.3 -15 -5 0.2 4.4 -254.4 -37 -4 0.2 4.5 -20 0 0.2 4.6 04.6 -41 -4 0.2 4.7 -20 10 0.2 4.8 50
4.8 -45 -2 0.2 4.9 -10 5 0.2 5 255 -47 -1 0.2 5.1 -5 -5 0.2 5.2 -25
5.2 -48 -2 0.2 5.3 -10 -5 0.2 5.4 -25
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5.4 -50 -3 0.2 5.5 -15 15 0.2 5.6 755.6 -53 0 0.2 5.7 0 -30 0.2 5.8 -150
5.8 -53 -6 0.2 5.9 -30 15 0.2 6 756 -59 -3 0.2 6.1 -15 0 0.2 6.2 0
6.2 -62 -3 0.2 6.3 -15 -10 0.2 6.4 -506.4 -65 -5 0.2 6.5 -25 0 0.2 6.6 06.6 -70 -5 0.2 6.7 -25 0 0.2 6.8 06.8 -75 -5 0.2 6.9 -25 -5 0.2 7 -257 -80 -6 0.2 7.1 -30 0 0.2 7.2 0
7.2 -86 -6 0.2 7.3 -30 -5 0.2 7.4 -257.4 -92 -7 0.2 7.5 -35 -15 0.2 7.6 -757.6 -99 -10 0.2 7.7 -50 -75 0.2 7.8 -3757.8 -109 -25 0.2 7.9 -125 -520 0.2 8 -2600
8 -134 -129 0.2 8.1 -645 540 0.2 8.2 27008.2 -263 -21 0.2 8.3 -105 55 0.2 8.4 2758.4 -284 -10 0.2 8.5 -50 10 0.2 8.6 508.6 -294 -8 0.2 8.7 -40 5 0.2 8.8 258.8 -302 -7 0.2 8.9 -35 10 0.2 9 509 -309 -5 0.2 9.1 -25 -35 0.2 9.2 -175
9.2 -314 -12 0.2 9.3 -60 -20 0.2 9.4 -1009.4 -326 -16 0.2 9.5 -80 35 0.2 9.6 1759.6 -342 -9 0.2 9.7 -45 -15 0.2 9.8 -759.8 -351 -12 0.2 9.9 -6010 -363
MUESTRAS DEL NIVEL 40%
2da DERIVADA M1,M2,M3 NIVEL 40%DETERMINACION DEL PUNTO DE EQUIVALENCIA
METODO POTENCIOMETRICO
-5000
-4000
-3000
-2000
-1000
0
1000
2000
3000
4000
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0
Vr
2E/V2)
Muestra 1
Muestra 2
Muestra 3
3.3
Gr af ica 1. Muest ra 1,2,3-40% det erminacin del punt o de equivalencia para
Nimesuli da , mt odo po t enci omt r i co
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MUESTRAS DEL NIVEL 60%
2da DERIVADA M1,M2,M3 NIVEL 60%DETERMINACION DEL PUNTO DE EQUIVALENCIA
METODO POTENCIOMETRICO
-3000
-2000
-1000
0
1000
2000
3000
0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0
Vr
2E/V2)
Muestra 1
Muestra 2
Muestra 3
4.9
Graf ica 2. Muest r a 1,2,3-60% det erminacin del punt o de equivalencia para
Nimesuli da , mt odo pot enci omt r i co
MUESTRAS DEL NIVEL 80%
2da DERIVADA M1,M2,M3 NIVEL 80%DETERMINACION DEL PUNTO DE EQUIVALENCIA
METODO POTENCIOMETRICO
-2500
-2000
-1500
-1000
-500
0
500
1000
1500
2000
0 1 2 3 4 5 6 7
Vr
2E/V2)
8
Muestra 1
Muestra 2
Muestra 3
6.6
6.7
Gra f ica 3. Muestr a 1,2, 3-80% det ermi nacin del punt o de equival encia par aNimesuli da , mt odo pot enci omt r i coMUESTRAS DEL NIVEL 90%
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MUESTRAS DEL NIVEL 100%
2da DERIVADA M2 100%DETERMINACIN DEL PUNTO DE EQUIVALENCIA
MTODO POTENCIOMETRICO
-2500
-2000
-1500
-1000
-500
0
500
1000
1500
2000
2500
0 2 4 6 8 10
Vr
2E/V2)
12
8.3
Gra f ica 4. Muest ra 2-100% deter minacin del punto de equival encia par a
Nimesuli da , mt odo po t enci omt r i co
MUESTRAS DEL NIVEL 120%
2da DERIVADA M1 120%DETERMINACIN DEL PUNTO DE EQUIVALENCIA
MTODO POTENCIOMETRICO
-1000
-500
0
500
1000
1500
0 2 4 6 8 10 12
Vr
2E/V2)
14
9.7
Gra f ica 5. Muest ra 1-120% deter minacin del punto de equival encia par a
Nimesuli da , mt odo po t enci omt r i c
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LINEALIDAD DEL SISTEMA
Linealidad del sistema de medicin para Nimesulida.
NIVEL(%)
mgAdicionados
Replicanmero
RESPUESTAvolumen
Media SD CV ( %)
40 96.0000123
3.300003.300003.30000
3.300 0.0 0.0
60 144.0000123
4.900004.900004.90000
4.900 0.0 0.0
80 192.0000123
6.600006.700006.60000
6.633 0.0577 0.87
90 216.0000 123
7.300007.400007.30000
7.333 0.05774 0.79
100 240.0000
123456
8.300008.300008.100008.300008.100008.30000
8.233 0.10328 1.25
120 288.0000123
9.700009.700009.70000
9.700 0.0 0.0
Tabla 1 Lineali dad d el sist ema de medici n par a Nimesuli da, mt odo
pot enci omt r i co
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GRAFICA: LINEALIDAD DEL SISTEMA
LINEALIDADDE
LSISTEMA
PARA
NIMESULID
A
METODO
POTENCIOMETRICO
y=0.0
336x+0.1
R2
=0.9
992
0246810
12
0
50
100
150
200
250
300
350
mgAdicionados
VolumenmL
Graf ica 6 Lineali dad del sist ema de medicin par a Nimesuli da, mt odo
pot enci omt r i co.
b= 0.1 m= 0.0336 r=0.9996
br= 0.011 mr=0.9850 r2= 0.9992
Cumple con los criterios de aceptacin: SI
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PRECISIN DEL SISTEMA AL 100%
Precisin del sistema para Nimesulida
# RE RESPUESTA (VOLUMEN)PLICA
12345
6
8.300008.400008.100008.300008.10000
8.30000T abl a 2. Pr eci si n de st ema par a Ni mesul i d o pot enci omt r ico.
x= 8.250 = 0.12274 C.V.= 1.48
Cumple con los criterios de aceptacin: SI
XACTITUD AL NIVEL100%
xactitud del mtodo para Nimesulida
NO.REPLICA
% RECU RADO X DESVIACION C.V.
l si a , mt od
E
E
PE
12
3456
101.72
100 35 3. 4 1. 5
101.46
99.22101.6799.221 01.72
.8
0
2
Tab la 3 . Exact mt odo pa ra Nimesul i da , mt odo po tenci omt r i co
% de Recobro= 98-102% = 100.835% C.V.= 1.25
Cumple con los criterios de aceptacin: SI
i t ud del
x
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LINEALIDAD DEL MTODO
Linealidad del mtodo para Nimesulida.
Nivel Replica mg (x)adicionados
mg (y)rec s
uperado(%) nmero
%rec.
Media Media CVX Y Y
4096.000 97.06 101.10
96.03 97.06 0.003123
96.10096.000
97.0697.06
101.00101.10
60144.200 144.11 99.94
144.23 144.08 0.041123
144.200144.300
144.11144.01
99.9499.80
80192.400 194.11 100.89
192.63 199.09 0.870123
192.500192.500
197.05194.12
102.1100.84
90216.400 214.71 99.22
216.17 215.68 0.78123
216.300215.800
217.69214.70
100.6299.49
100
240.000 244.13 101.72
240.18 242.16 1.257
123456
240.600240.100240.100240.100240.000
244.11238.23244.11238.23244.13
101.4699.22101.6799.22101.72
120288.000 285.29 99.06
288.20 285.29 0.001123
288.200288.400
285.29285.29
98.9998.92
Tabla 4 Lineal i dad del o t odo pot enci omt r i co. mt od par a Nimesul ida, m
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GRAFICA: LINEALIDAD DEL METODO
Grf i ca 7 Lineal i dad del mt odo pa r a Nimesul i da , mt odo pot enci omt r i co
b= 2.764 m= 0 876 r=0.9997
r2= 0.9993
Cumple con los criterios de aceptacin: SI
LINEALIDADD
ELMETODO
PARANIMESULIDAMETODO
POTENCIOMETRICO
y=0.9
876x+2.7
643
R
2=
0.9
993
050
100
150
200
250
300
350
0
50
100
150
200
250
300
350
mgAdicionados
.9
34
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REPRODUCIBILIDAD DEL METODO
Analista
Resultados en %
Da 1 2
199.22
101.631101.631
101.588101.71599.26
101.631 99.262 101.588
101.631101.67101.631
Tabl a 5. Reproducibi l idad del mt odo p Nimesul i da, mt odo potenciomt ri co
X= 101.04 = 1.08 C.V.= 1.07
Cumple con los criterios de aceptacin: SI
TABLA DE ANALISIS DE VARIANZA
Fuente
variacin
Gra
ara
dosde de
Liber tad
Suma deCuadrados
Cuadrado F
calc da
F
tab lasmedio
u alde
Analista 1 0.38 0.38 0.78 18.51
Da 2 0.97 0.49 0.34 4.46
Error 8 11.5 1.44
Total 11 12.85
Tab nl i si s var i an a Nimesul i da, mt od pot enci omt ri co
Cumple con los criterios de aceptacin: SI
l a 6 A de za par o
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7.2 MTODO POR ESPECTROFOTOMETRIA UV.
INEALIDAD DEL SISTEMAL
Espect r o1. Lineali dad d el sist ema de medici n par a Nimesulida, mt odo
espect r of omt r i co
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LINEALIDAD DEL SISTEMA
Linealidad del sistema de medicin para Nimesulida.
NIVEL Concentracin Replica RESPUESTA Media SD CV ( %)(%) [ mg / mL ] Abs
40 4.00000.18601
0.189 0.00258 1.37123
0.191120.18922
60 6.0000 0.28308 0.284 0.00078 0.28123
0.284590.28419
80 8.00000.37360
0.376 0.00372 0.99123
0.373420.37996
100 10.0000
0.46727
0.469 0.00231 0.49
123456
0.467850.470770.466960.471560.47209
120 12.00000.56365
0.561 0.00250 0.45123
0.558660.56084
140 14.00000.65360
0.655 0.00161 0.25123
0.655000.65682
Ta bla 6 Lineali dad del sistema de par a Nimesuli da, mt odomedicin
espect r of ot omt r ico.
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GRAFICA: LINEALIDAD DEL SISTEMA
b= 0.004 m= 0.0465 r=1.00
Cumple con los criterios de aceptacin: SI
E
SPECTROFOTOMETRIAUV
y
=
0.
0465x
+
0.
004
R2
=
1
0
0.
1
0.
2
0.
3
0.
4
0.
5
0.
6
0.
7
0
2
4
6
8
10
12
14
16
ug/mL
Abs
LINEALIDA
DDELSISTEMAPARANIMESULIDA
Gr af ica 8. Lineali dad d el sist ema de medici n par a Nimesuli da, mt odo
espect r of omt r i co
br= 0.0089 mr=0.9915 r2=1.00
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PRECISIN DEL SISTEMA AL 100%
Precisin del sistema para Nimesulida
# RE RESPUESTA (ABS)PLICA
12345
6
0.467270.467850.470770.466960.47156
0.47209
T abl a 6. Pr esi ci n de st ema par a Ni mesul i d o pot enci omt r ico.
x= 0.469 = 0.00231 C.V.= 0.49
Cumple con los criterios de aceptacin: SI
XACTITUD AL NIVEL100%
xactitud del mtodo para Nimesulida
NO.REPLICA
% RECU RADO X DESVIACION C.V.
l si a , mt od
E
E
PE
12
3456
100.5599.94
100.90101.0699.08100.52
100 34 0.728846 0.728846.
Tab la 7 . Exact mt odo pa ra Nimesul i da , mt odo po tenci omt r i co
% de Recobro= 97-103% x= 100.34% C.V.= 0.73
Cumple con los criterios de aceptacin: Si
i t ud del
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LINEALIDAD DEL MTODO
Espect r o 2. Lineal id ad del mt odo par a Nimesuli da, mt odo espect r of omt r ico
muest ra s de los niveles 120, 140y 40 %
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LINEALIDAD DEL MTODO
Espect r o 3. Lineal id ad del mt odo par a Nimesuli da, mt odo espect r of omt r ico
muest ras de los niveles 100, 80y 60 %
41
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LINEALIDAD DEL MTODO
Linealidad del mtodo para Nimesulida.
Nivel Replica madicionados
g (X) Mg (Y) % Medirec.
a Media CVrec osuperad(%) nmero X Y Y
40102.15
20.16 20.18 1.50
123456
20.30020.20020.10020.10020.10020.000
20.7419.8520.1920.1420.1519.98
98.29100.46100.18100.2499.91
6028.70 30.65 0.52
123456
30.50030.50030.40030.40030.40030.000
30.7630.7830.6830.6830.6630.34
100.84100.92100.92100.91100.85101.14
8040.08 39.92 0.90
123456
40.40040.00040.10040.00040.00040.000
40.5439.6040.1239.6239.8839.75
100.3598.99100.0599.0699.7199.37
100100.551
23456
50.10050.00050.30050.30050.00050.000
50.3849.9750.7550.8349.5450.26
99.94100.90101.0699.08100.52
50.12 50.29 0.97
12060.03 59.08 0.30
1
23456
60.000
60.00060.00060.20060.00060.000
58.91
58.8759.2759.2159.0059.24
98.19
98.1198.7898.3698.3498.73
140102.15
70.08 70.23 1.19
123456
70.00070.10070.10070.10070.10070.100
71.5168.9070.4270.2370.2770.04
98.292100.46100.18100.2499.91
Tab la 7 Linea l idad de l mt odo p mesu l ida , mt odo espect ro f o tomt r ico .ara Ni
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GRAFICA: LINEALIDAD DEL METODO
Grf i ca 9. Linea li dad del mt odo p ar a Nimesuli da , mt odo espect r of omt r i co
b= 0.2656 m= 0.9923 r=0.9997 r2= 0.9995
Cumple con los criterios de aceptacin: SI
LINEALIDADD
ELMTODO
PARA
NIMESULID
A
MTODO
ESPECTROFOTOMETRICO
y=0.9
923x+0.2
656
R2
=0.9
995
010
20
30
40
50
60
70
80
0
20
40
60
8
mgAdicionados
0
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REPRODUCIBILIDAD DEL METODO
Analista
Resultados en %
Da 1 2
1100.13 101.1999.86899.828
99.491101.29
99.373 99.752 99.54
99.43199.96100.0
Tabl a 8. Repr oduci bi li dad del mt odo par a Nimesuli da, mt odo
X= 99.99 = 0 3 C.V.= 0.63
Cumple con los criterios de aceptacin: SI
TABLA DE ANALISIS DE VARIANZA
Fuente
variacin
Grado
espect r of ot omt r ico
.6
Suma de Cuadr adosCuadrados mediode de
Liber tad
F
calc da
F
tab lasu alde
Analista 1 0.38 0.38 1.69 18.51Da 2 0.97 0.49 2.26 4.46
Error 8 11.5 1.44
Total 11 12.85
Tabla l i si s d r i anza imesul i , mt odo pect r of ot t r i co
Cumple con los criterios de aceptacin: SI
9 An e va par a N da es om
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REPRODUCIBILIDAD DEL METODO
nalista 1: Da 1A
Espect r o 4. Repr oduci bi li dad del mt odo par a Nimesuli da , mt odo
espect r of omt r i co
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REPRODUCIBILIDAD DEL METODO
nalista 2: Da 1A
Espect r o 5. Repr oduci bi li dad del mt odo par a Nimesuli da, mt odo
espect r of omt r i co
46
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REPRODUCIBILIDAD DEL METODO
nalista 1: Da 2A
Espect r o 6. Repr oduci bi li dad del mt odo par a Nimesuli da , mt odo
espect r of omt r i co
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REPRODUCIBILIDAD DEL METODO
nalista 2: Da 2A
Espect r o 7. Repr oduci bi li dad del mt odo par a Nimesuli da, mt odo
espect r of omt r i co
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ESTNDAR UTILIZADO EN LA REPRODUCIBILIDAD DEL METODO-DIA 1
ESTNDAR UTILIZADO EN LA REPRODUCIBILIDAD DEL METODO-DIA 2
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8. COMPARACION DE LOS METODOS
REPETITIBILIDAD EN EXACTITUD:
METODO A(UV)
METODO B(POTENCIOMETRICO)
1 100.55 101.72
2 99.94 101.46
3 100.90 99.224 101.06 101.67
5 99.08 99.22
6 100.52 101.72
y 602.05 605.01
y2 054160413.3565 61014.
n 6 6
S2 0.53121 1.57415
S12 menor
S22 mayor
F0.025,n2-1,n1-1 0.14
F0.975,n2-1,n1-1 7.15
T a 9. Compar mt odos, r epet i t i b i l i dad en exact i t ud
valo de confianza
22/12 21.1875
Los parmet de desempe s mtodos son igua lo que se puede usar
indistintame Ya que el in e confianza incluye
Los clculos fectuaron de exo 1
abl acin de
Inter
0.4148
ros o de lo les por
nte. tervalo d el 1.
se e acuerdo al an
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REPETITIBILIDAD EN LINEALIDAD DEL METODO
A (UV) METODO B (POTENCIOMETRICO)METODOCantidad
adicionadmg mg
aCantidad
recuperada % de recobro % de recobroCantidad
adicionadaCantidad
recupmg
eradamg
20.3 20.74 102.15 101.1 96.0 97.0620.2 19.85 96.1 97.0698.29 101.020.1 20.19 96.0 97.06100.46 101.120.1 20.14 144.2 144.1100.18 99.9420.1 20.15 100.24 99.94 144.2 144.120.0 19.98 99.91 99.8 144.3 144.0130.5 30.76 100.84 100.89 192.4 194.1130.5 30.78 100.92 102.1 192.5 197.0530.4 30.68 100.92 100.84 19.5 194.12
30.4 30.68 100.91 99.22 216.4 214.7130.4 30.66 100.85 100.62 216.3 217.6430.0 30.34 101.14 99.49 215.8 214.740.4 40.54 100.35 101.72 240.0 244.1240.0 39.6 98.99 101.46 240.6 244.1240.1 40.12 100.05 99.22 240.1 238.2340.0 39.62 99.06 101.67 240.1 244.1240.0 39.88 99.71 99.22 240.1 238.2340.0 39.75 99.37 101.72 24.0 244.1350.1 50.38 100.55 99.06 288.0 285.2950.0 49.97 99.94 98.99 288.2 285.2950.3 100.9 98 950.75 .92 288.4 285.2
50.3 50.83 101.0650.0 49.54 99.0850.0 5 100.520.2660.0 58.91 98.1960.0 58.87 98.1160.0 59.27 98.7860.2 59.21 98.3660.0 59.0 98.3460.0 59.24 98.7370.0 71.51 102.1570.1 68.9 98.02970.1 70.42 100.46
70.1 70.23 100.1870.1 70.27 100.2470.1 70.04 99.91y 3598.1032 2108.02y2 359 53668.61 21 21629.75n 36 22S2 1.203381 459.1043801
F0.02 1-15,n2-1,n 0.32
F0.97 1-15,n2-1,n 3.36
Tabl a 10. Compar a e mt odo t i t i b i l i d i neal i dad del mt odo cin d s, r epe ad en l
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Intervalo de confianza no incluy idad, por que cumple con las especificaciones
puede hacer uso indistinto de los mto s.
122. 2
2/1
2
1.8806
Los clculos se efe n de ac l anexo 2
PRECISIN DEL MTODO
ETODO A METODO B
e la un lo
y se do
0838 128
ctuaro uerdo a
M
DIA A A1 A21 A2 DIA
1100.1399.868
99.828
101.19
101.29
99.22101.631
101.588
101.631101.715
99.26
99.491 1
99.373 99.75 101.631
2 99.54
99.431
99.96
100.0
2 101.588
101.631
99.26
101.67
101.631
y 1199.851 y 1212.456
y2
6.978119974.5958 y2
12251n 1 122 n
SA2 0.399448 SB2 1.1680627
F0.025,11,11 0.29 F0.975,11,11 3.47
Tabla 11. Compar acin de mt odos, r epet it ib i l id ad en pr ecisin del mt odo
tervalo de confianza
0.8480 22/
12 .146944
Como intervalo ianza l 1, los parmetros de desempeo
por lo tanto los m se pue indistintamente.
Los clculos se efectuar anexo 3
In
15 10
el de conf incluye e son iguales
todos den usar
on de acuerdo al
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9. ANALISIS DE RESULTADOS:
Linealidad del sist
MET .5
% y al compararlos con los criterios de a tacin, este parmetro cumple con las
especificaciones ya que la concentracin es directamente proporcional a la unidad de
respuesta del sistema de odo espectrofotometrico
umple con los criterios establecidos.
ema:
ODO POTENCIOMETRICO: De acuerdo a los resultados obtenidos, r2= 0.9992 , CV1
cep
medicin, de igual manera el Mt
c
Linealidad del mtodo:Se realizo un grafico de mg adicionados VS mg recuperados, al cual se determin el
le con los criterios ya que el valor de2= 0.9993, CV 1.5 % este parmetro asegura la proporcionalidad directa sobre el
tervalo de trabajo. Para el caso del Mtodo espectrofotometrico cumple con el
riterio de aceptacin.
coeficiente de correlacin, este coeficiente cump
r
in
c
Precisin del sistema al 100%
rico como el espectrofotomtrico, son precisos ya quembos cumplen con los criterios de aceptacin ya que ninguno sobrepasa el 1.5 % con
Tanto el mtodo potenciomta
respecto al CV.
Exactitud y Repetitibilidad:
METODO POTENCIOMETRICO: Es exacto ya que la media del porcentaje de recobro tiene
un valor de 100.84% y el rango para el criterio de aceptacin es de 98-102%, tambin
cumple con CV1.5 %
METODO ESPECTROFOTOMETRICO: Este mtodo tiene un rango mas amplio de 97-103%
el valor de la media cae dentro del rango al tener unpara el porcentaje de recobro,
valor de 100.34% y no sobrepasar el lmite del CV2%.
Reproducibilidad:
Ambos mtodos son reproducibles ya que al realizar el anlisis de varianza resulta que
los diferentes analistas no interfieren con la reproducibilidad del mtodo.
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Comparacin de mtodos:
Al realizar el anlisis de varianza para determinar si los parmetros de desempeo
son iguales, resulta que cumple con los criterios establecidos para dichos
parmetros, por lo tanto los mtodos se pueden usar indistintamente, ya que esta
armetros reales y documentados.
4.
Reproducible
usar indistintamente, ya que se cumple con los
por el mtodo
potenciomtrico.
El mtodo se puede usar como mtodo rutinario de control, ya que las
todo espectrofotomtrico ya que este facilita el anlisisacortando el tiempo y cantidad de muestra.
en la industria farmacutica se requiere de anlisis rpidos perosempeo y el mtodo espectrofotomtrico
ecesidades para la empresa.
justificada su comparacin con p
10. CONCLUSIONES:
Mediante los resultados obtenidos durante el proceso de validacin se puede
afirmar que se cumplen con las especificaciones sealadas de cada parmetropor que el mtodo es:
1. Lineal
2.
Preciso
3.
Exacto
Los mtodos se pueden
parmetros necesarios para el uso indistinto de ellos.
El mtodo espectrofotomtrico mediante la validacin y comparacin cumple
con las especificaciones sealadas, el cual se desea remplazar
instalaciones y equipos son adecuados para la reproducibilidad de este.
Se prefiere el uso del M
Como se sabe
de calidad aceptada para su desatisface esas n
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11. BIBLIOGRAFIA:
xico (2000).
2.
Ley General de Salud (1997).
xicana NOM-059-SSAA-1993, Buenas Practicas de Fabricacin
para establecimientos de la industria qumico farmacutica dedicados a la
5. Gua de Validacin de Mtodos Analticos, 1 Edicin de Mayo2002.
Iberoamericana. 3 Ed. Mxico (1991).
8. European Pharmacopoeia, 5th Edicin, Vol. II, pp. 2101-2102
1. Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos, 7 Ed. M
3.
Reglamento de Insumos para la Salud.
4.
Norma Oficial Me
fabricacin de medicamentos.
6.
British Pharmacopoeia. Monograph Development: Methods of Analysis. Version en
CD-ROM, 1998.
7. Diseo y Anlisis de experimentos, Montgomery D.C. Grupo editorial
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12 . ANEXOS
Modelos de clculo.
ANEXO 1
56
7/23/2019 Validacion Del Metodo Analtico Para Nimesulida Por UV-Vis
58/69
INSTITUTO POLITCNICO NACIONALpg 57
UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE BIOTECNOLOGIA
57
7/23/2019 Validacion Del Metodo Analtico Para Nimesulida Por UV-Vis
59/69
INSTITUTO POLITCNICO NACIONALpg 58
UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE BIOTECNOLOGIA
ANEXO 2
58
7/23/2019 Validacion Del Metodo Analtico Para Nimesulida Por UV-Vis
60/69
INSTITUTO POLITCNICO NACIONALpg 59
UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE BIOTECNOLOGIA
59
7/23/2019 Validacion Del Metodo Analtico Para Nimesulida Por UV-Vis
61/69
INSTITUTO POLITCNICO NACIONALpg 60
UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE BIOTECNOLOGIA
60
7/23/2019 Validacion Del Metodo Analtico Para Nimesulida Por UV-Vis
62/69
INSTITUTO POLITCNICO NACIONALpg 61
UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE BIOTECNOLOGIA
ANEXO 3
61
7/23/2019 Validacion Del Metodo Analtico Para Nimesulida Por UV-Vis
63/69
INSTITUTO POLITCNICO NACIONALpg 62
UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE BIOTECNOLOGIA
62
7/23/2019 Validacion Del Metodo Analtico Para Nimesulida Por UV-Vis
64/69
INSTITUTO POLITCNICO NACIONALpg 63
UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE BIOTECNOLOGIA
TABLAS
63
7/23/2019 Validacion Del Metodo Analtico Para Nimesulida Por UV-Vis
65/69
INSTITUTO POLITCNICO NACIONALpg 64
UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE BIOTECNOLOGIA
64
7/23/2019 Validacion Del Metodo Analtico Para Nimesulida Por UV-Vis
66/69
INSTITUTO POLITCNICO NACIONALpg 65
UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE BIOTECNOLOGIA
65
7/23/2019 Validacion Del Metodo Analtico Para Nimesulida Por UV-Vis
67/69
INSTITUTO POLITCNICO NACIONALpg 66
UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE BIOTECNOLOGIA
66
7/23/2019 Validacion Del Metodo Analtico Para Nimesulida Por UV-Vis
68/69
INSTITUTO POLITCNICO NACIONALpg 67
UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE BIOTECNOLOGIA
67
7/23/2019 Validacion Del Metodo Analtico Para Nimesulida Por UV-Vis
69/69
INSTITUTO POLITCNICO NACIONALpg 68
UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE BIOTECNOLOGIA