DETERMINACIÓN DE ACIDO ACETILSALICILICO

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EXPERINCIA Nº DETERMINACION DE SALICILATOS EN MATERIAL BIOLOGICO INTRODUCCION El ácido acetílsalicílico es la causa de más intoxicaciones accidentales en niños que cualquier otra sustancia. Este analgésico tan extraordinariamente útil se usa con tanta amplitud y se dispone de él con tanta facilidad que los niños con frecuencia ingieren una cantidad tóxica por comer las tabletas saborizadas como si fueran caramelos. Las dosis tóxicas de salicilatos producen inicialmente estimulación del sistema nervioso central, este podría reflejarse en hiperventilación, rubor y fiebre. Por desgracia en un caso no reconocido de envenenamiento por salicilatos puede pensarse en un caso de infección y entonces se le administra más aspirina al paciente por un vano intento por bajar la fiebre. La estimulación del sistema nervioso central va seguida de depresión. PRUEBA PRELIMINAR DE ORINA: PRUEBA RAPIDA CUALITATIVA: los salicilatos se pueden determinar en los fluidos biológicos mediante una prueba rápida basada en la formación de un complejo de color morado-violeta entre el Fe+++ y los fenoles. Materiales y reactivos: Cloruro de mercurio Acido clorhídrico (0.1 mol / l) Nitrato férrico NaOH 0.1 mol/L Muestra Soporte universal y nueces Malla de asbesto Beaker Embudo de filtración Papel filtro Mechero PROCEDIMIENTO: Lleve 5ml de orina a un tubo de ensayo, agregue 1ml de reactivo cloruro férrico al 10%, la aparición de un color morado-violeta persistente nos indicará la presencia de salicilatos. Esta prueba es muy sensible y es positiva en orina después de la ingestión de solamente 300 mg de ácido acetil salicílico. Es sensible para ácido acetíl salicílico, salicilatos de sodio, fenilo, metilo, y los derivados fenólicos. DETERMINACION CUANTITATIVA: El procedimiento se basa en la formación de un complejo de color violeta entre el hierro férrico y los fenoles. Esta reacción no es especifica de los salicilatos, pero no ocurre falsos negativos. En este método y con el objeto de precipitar las proteínas séricas, el reactivo lleva incorporado cloruro mercúrico y ácido clorhídrico. La presencia de nitrato férrico en altas concentraciones previene la inhibición del desarrollo del color producido por la presencia de fosfatos y oxalatos. PROCEDIMIENTO PARA LA ORINA: Para determinar salicilatos en orina, deben tenerse en cuenta los siguientes puntos: La orina debe diluirse con agua destilada antes del análisis, la manera corriente de trabajar es hacer diluciones del 1:2 (1ml de orina + 1mlde agua), o del 1:5 (1ml de orina + 4ml de agua).

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EXPERINCIA Nº

DETERMINACION DE SALICILATOS EN MATERIAL BIOLOGICO

INTRODUCCION

El ácido acetílsalicílico es la causa de más intoxicaciones accidentales en niños que cualquier otra sustancia. Este

analgésico tan extraordinariamente útil se usa con tanta amplitud y se dispone de él con tanta facilidad que los niños

con frecuencia ingieren una cantidad tóxica por comer las tabletas saborizadas como si fueran caramelos.

Las dosis tóxicas de salicilatos producen inicialmente estimulación del sistema nervioso central, este podría

reflejarse en hiperventilación, rubor y fiebre. Por desgracia en un caso no reconocido de envenenamiento por

salicilatos puede pensarse en un caso de infección y entonces se le administra más aspirina al paciente por un vano

intento por bajar la fiebre. La estimulación del sistema nervioso central va seguida de depresión.

PRUEBA PRELIMINAR DE ORINA:

PRUEBA RAPIDA CUALITATIVA: los salicilatos se pueden determinar en los fluidos biológicos mediante una

prueba rápida basada en la formación de un complejo de color morado-violeta entre el Fe+++ y los fenoles.

Materiales y reactivos:

Cloruro de mercurio

Acido clorhídrico (0.1 mol / l)

Nitrato férrico

NaOH 0.1 mol/L

Muestra

Soporte universal y nueces

Malla de asbesto

Beaker

Embudo de filtración

Papel filtro

Mechero

PROCEDIMIENTO:

Lleve 5ml de orina a un tubo de ensayo, agregue 1ml de reactivo cloruro férrico al 10%, la aparición de un color

morado-violeta persistente nos indicará la presencia de salicilatos.

Esta prueba es muy sensible y es positiva en orina después de la ingestión de solamente 300 mg de ácido acetil

salicílico.

Es sensible para ácido acetíl salicílico, salicilatos de sodio, fenilo, metilo, y los derivados fenólicos.

DETERMINACION CUANTITATIVA:

El procedimiento se basa en la formación de un complejo de color violeta entre el hierro férrico y los fenoles. Esta

reacción no es especifica de los salicilatos, pero no ocurre falsos negativos.

En este método y con el objeto de precipitar las proteínas séricas, el reactivo lleva incorporado cloruro mercúrico y

ácido clorhídrico. La presencia de nitrato férrico en altas concentraciones previene la inhibición del desarrollo del

color producido por la presencia de fosfatos y oxalatos.

PROCEDIMIENTO PARA LA ORINA: Para determinar salicilatos en orina, deben tenerse en cuenta los siguientes puntos:

La orina debe diluirse con agua destilada antes del análisis, la manera corriente de trabajar es hacer diluciones del

1:2 (1ml de orina + 1mlde agua), o del 1:5 (1ml de orina + 4ml de agua).

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La orina diluida debe calentarse suavemente antes del análisis con el objeto de eliminar los cuerpos cetónicos. Dejar

enfriar completamente.

Es necesario hacer un blanco biológico de orina diluida, esto se hace determinando la D.O de una mezcla de 1ml de

orina diluida y 5ml del reactivo de Trinder. En caso de presentarse turbidez la mezcla debe centrifugarse y

determinar la D.O del sobrenadante.

1. tubo muestra (orina problema) 1ml + 5ml reactivo color.

2. tubo blanco (agua destilada) 1ml + 5ml reactivo color.

3. tubo blanco biológico 1ml + 5 ml reactivo color.

4. tubo estándar acido salicílico 1ml + 5ml reactivo color.

Determinar la densidad óptica de cada tubo a 540 mu, usando el tubo Nº 2 (blanco) para cuadrar el fotómetro a cero

de D.O (100% de transmitancía).

La concentración de salicilatos en la orina se calcula por la siguiente formula:

Salicilatos = D.O muestra problema – D.O blanco biológico

(mg/100ml ------------------------------------------------ X(concentración patrón)X( factor de dilución

D.O estándar (mg/100ml)

INTERPRETACION: la relación entre las cifras séricas de salicilato ( en mg/100ml) en las primeras seis horas

después del envenenamiento es la siguiente:

Menos de 45 = nivel terapéutico

45 a 65 = intoxicación ligera.

65 a 90 = intoxicación moderada 90 a 120 = intoxicación grave

Más de 120 = usualmente mortal.

Reactivo Trinder: mezclar 40 g de HgCl disuelto en 800 ml de H2O destilada con 120 ml de HCl (1 M) y

40 g de nitrato férrico. Diluir hasta volumen final de 1 L con agua destilada.

Precauciones:

Consulte la M.S.D.S. para mayor información.

Tenga cuidado con:

Cloruro de Mercurio: esta sustancia es nociva y peligrosa para el medio ambiente. Irrita los ojos, la piel y

las vías respiratorias. Perjudicial para el medio ambiente.

Ácido Clorhídrico (HCl): esta sustancia provoca quemaduras e irrita las vías respiratorias. En caso de

contacto con los ojos, lave inmediatamente y con abundante agua. En caso de accidente o malestar, acuda

inmediatamente al médico.

Nitrato de Hierro (Fe (NO3)3*9H2O): esta sustancia presenta peligro de fuego en contacto con materias

combustibles. Irrita los ojos y la piel. En caso de contacto con los ojos, lave inmediatamente y abundante con agua y

obtenga atención médica.