7/21/2019 Informe Aminoacidos Por TLC

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Anlisis de aminocidos por TLC

Amino acid anlisis by TLC

Autores:Osorio L.J, Arias T.

Corporacin tecnolgica de Bogot. Tecnologa en regencia de farmacia

Bogot, Colombia

Fecha 16/03/01!

Taria"#$%ctb.ed&.co

RESUMEN

Una clase de cromatografa de gran utilidad es en

capa fina y este sirve para separar pequeas

cantidades de una mezcla por la diferencia de

solubilidad entre dos sistemas disolventes. El

sistema cromatografico tiene dos elementos:

El primero es el soporte es decir el disolvente A.

El segundo es la fase mvil en este caso el

disolvente B. Es una tcnica simple primero por

el material que se necesita !una placa absorbente

de slice y una c"mara cromatografica# y el

segundo porque el procedimiento es f"cil de

llevarse a cabo. Esta tcnica utiliza un par"metro

e$perimental conocido como %f !factor de

retraso#& este relaciona la solubilidad relativa de

un compuesto entre la fase estacionaria y la fase

mvil. 'a nin(idrina es importante porque con

ella la sustancia se revela y se identifica entre la

separacin de una mezcla de amino"cidos.

)alabras *lave: *romatografa& capa fina&

sistemas disolventes& factor de retraso&

nin(idrina.

ABSTRACT

+ne class of c(romatograp(y of utility is in fine

layer and t(is serves for separate small quantities

of a mi$ture for t(e difference of solubility

bet,een t,o solvents systems.

-ey ords: Amp(oteric species& p/& isoelecetric

point& linear regression& points buffer. 0(e

c(romatograp(y system (ave t,o elements:

0(e first is t(e support t(is mean solvent A.

0(e second mobile p(ase is in t(is case t(e

solvent B. 0(is is a simple tec(nique for t(e

material ,(at ,e need !one absorbent plaque of

slice and one c(romatograp(ic camera# and for

t(e easy process. 0(is tec(nique use one

e$perimental parameter 1no, as %f !delay

factor#& t(is relates t(e relativity solubility of one

compound bet,een stationary fase and movil

fase. 0(e nin(idrina is very important because

,it( (er t(e substance is revealed bet,een t(e

separation of one amino acid mi$ture&

-ey ords: c(romatograp(y& fine layer& disolvent

sistems& delay factor& nin(idrina.

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INTRODUCCIN

En bioqumica se utiliza muc(os mtodos para

separar diversas sustancias& medir peso molculas

de los polmeros& distinguir diferentes aspectos

en la estructura de las sustancias y poder evaluar

la pureza de los compuestos aislados. Estos

mtodos de cromatografa se basan en el mismo

procedimiento general: las sustancias de la

muestra son disueltas en una fase mvil y luego

se (ace pasar por un medio estacionario que

interact2a con cada uno de los compuestos

individuales y el resultado de esto nos muestra

varios grados por la obstaculizacin del flu3o en

diferentes medidas. El resultado final es que cada

una de las sustancias (an migrado en diferentes

velocidades.

El tipo de interaccin entre la fase estacionaria y

los componentes de la muestra es lo que nos

ayuda a distinguir n tipo de cromatografa de

otro. 4ic(a interaccin se basa en uno de los

siguientes principios: intercambio inico

solubilidad& absorcin y cribado. Una estrategia

com2n en empacar el material de fase

estacionaria en una columna y luego permitir que

la fase mvil fluya a travs de esta& en ocasiones

con ayuda de algo depresin. )or razones obvias&

estos mtodos se les llaman com2nmente como

cromatografa en columna.

5e debe tener muy en cuenta los mtodos

colorimtricos de determinacin de amino"cidos&

que se basan en la reaccin especfica de estos

con determinados compuestos& dando derivados

coloreados.

'a formacin de color se toma como resultado

positivo e indica su presencia& mientas que el no

desarrollo de color es indicativo de que no est"

presente.

MATERIALES M!TODOS

6 )laca de silica

6 )lanc(a de calentamiento6 *apilar

6 vaso de precipitado 78ml

Cromatografa en capa fina de aminocidos

El mtodo general consiste en colocar 9ml de la

fase mvil !Butanol: "cido actico: agua# en un

vaso de precipitado de 788 ml se procede a tapar

con un vidrio de relo3 y se de3a saturar la c"mara

por 79 mn.

'uego sobre la placa de silica con un l"piz se

traz una lnea de 7 cm desde la base y sobre

esta con un capilar se procedi a sembrar las

muestras de amino"cidos y m"s la bebida

comercial.

'a placa de silica se coloc en un vaso de

precipitado previamente preparado con la fase

mvil y se esper que la fase mvil recorriera la

placa (asta que esta llegara a 7 cm del lmite

superior de la placa.

5e procedi a retirar la placa del vaso y esta se

de3 secar por 9mn en estufa para despus

colocarle el agente revelador en este caso fue

nin(idrina al 8& ; lo cual se llev a estufa de

calentamiento.

RESULTADOS ANALISIS DERESULTADOS"

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Al realizar el ensayo de cromatografia en capa

fina para aminoacidos& se obtuvo el siguiente

resultado: !

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estacionaria& es decir& a menor %f la sustancia

queda m"s retenida en la fase estacionaria y a

mayor %f la sustancia no est" unida con fuerza a

la fase estacionaria y es arrastrada por la fase

mvil.

*on base en la tabla & las estructuras de los

amino"cidos influyen en la cromatografa& debido

a su radical& ya que ellos cambian la polaridad de

la molcula& por el car"cter de los "tomos& por

e3emplo& el glutamato es m"s polar por tener un

grupo acido carbo$lico adicional a la estructura

b"sica de amino"cido& caso contrario a la

fenilalanina& la cual por tener un benceno en su

estructura es apolar.

Cocacola #ero

4e acuerdo a la imagen 7& los puntos = y 9 se

relacionan de manera similar en su rf& es decir& el

desplazamiento en la capa de silica es igual& ya

que la fenilalanina es compuesto principal del

aspartame& el cual es el edulcorante de la

*oca*ola >ero& por ellos se observan las mismas

caractersticas del amino"cido en la bebida y ello

permiti que ambos corrieran a travs de la placa

de la misma forma.

CONCLUSIONES"

0eniendo en cuenta que la fase mvil es polar&

posemos concluir que la velocidad de

desplazamiento de cada amino"cido depende de

la polaridad& entre m"s polar sea el amino"cido&

este se queda m"s retenido en la fase estacionaria

'a nin(idrina es un revelador especfico para

sustancias con grupo amino libre& por ello es muy

efectiva en la determinacin de amino"cidos.

'a cromatografa en capa fina es un mtodo degran utilidad ya que aprovec(a las diferencias de

polaridad de los compuestos para clasificarlos& es

una tcnica sencilla& eficiente y de ba3o costo& lo

cual (ace que sea muy viable.

El rf nos sirve como par"metro para evaluar el

desplazamiento de la muestra& respecto a la

distancia total de la placa de slica y distancia

recorrida por el solvente& por ello nos da un

indicio de la polaridad de la muestra.

BIBLIO$RA%&A

?omez /enz& A.& @ alcarcel *ases& .

!7CDD#. Tecnica" analitica" de

"eparacion.Barcelona: %evert 5.A.

orrin Fovo& .& @ Abril 4iaz& . F.

!s.f.#. 'eparacin de aminocido" por

cromatografa en capa fina ( deteccin

mediante reaccin con ninhidrina.

%ecuperado el 7G de arzo de 879& de

(ttp:HH,,,.uco.esHdptosHbioquimica6

biol6molHpdfsH77;8*%+A0+?%AI;*=;D4A;84E;8*A)A;8I