Pract 4 Quimica
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I. Introducción Los carbohidratos incluyen los azucares y sustancias relacionadas, simples y complejas, naturales y sintéticas, y constituyen el tipo de compuestos más ampliamente distribuido en la naturaleza. El nombre de carbohidrato es muy antiguo y debe su origen a la observación de que muchos compuestos de esta clase, incluyendo los tres más abundantes glucosa,sacarosaycelulosa. La oxidación de los azucares fue concebida inicialmente como una herramienta para determinación estructural. Esta función ha sido parcialmente superada, aunque no en su totalidad, por las técnicas espectroscópicas. La espectrofotometría de absorción ultravioleta-visible fue uno de los primeros métodos físicos que se aplicó al análisis cuantitativo y a la determinación de estructuras, sin embargo, la escasa formación cualitativa que proporciona la espectrofotometría UV-Vis impide la resolución simultánea, de manera sencilla, de mezclas de componentes con espectros solapados.
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I Introduccioacuten
Los carbohidratos incluyen los azucares y sustancias relacionadas simples y complejas
naturales y sinteacuteticas y constituyen el tipo de compuestos maacutes ampliamente distribuido
en la naturaleza El nombre de carbohidrato es muy antiguo y debe su origen a la
observacioacuten de que muchos compuestos de esta clase incluyendo los tres maacutes
abundantes glucosasacarosaycelulosa
La oxidacioacuten de los azucares fue concebida inicialmente como una herramienta para
determinacioacuten estructural Esta funcioacuten ha sido parcialmente superada aunque no en su
totalidad por las teacutecnicas espectroscoacutepicas La espectrofotometriacutea de absorcioacuten
ultravioleta-visible fue uno de los primeros meacutetodos fiacutesicos que se aplicoacute al anaacutelisis
cuantitativo y a la determinacioacuten de estructuras sin embargo la escasa formacioacuten
cualitativa que proporciona la espectrofotometriacutea UV-Vis impide la resolucioacuten
simultaacutenea de manera sencilla de mezclas de componentes con espectros solapados
II Marco teoacuterico
Determinacioacuten de la glucosa por meacutetodos espectroscoacutepicos
Los meacutetodos espectroscoacutepicos de anaacutelisis se basan en la medida de la radiacioacuten electromagneacutetica emitida o absorbida por la materia Los meacutetodos de emisioacuten utilizan la radiacioacuten emitida cuando un soluto es excitado por energiacutea teacutermica eleacutectrica o energiacutea radiante Los meacutetodos de absorcioacuten por el contrario estaacuten basados en la diminucioacuten de la potencia (o atenuacioacuten) de la radiacioacuten ndash electromagneacutetica como consecuencia de la absorcioacuten que se produce en su interaccioacuten con el soluto
Los meacutetodos espectroscoacutepicos se consideran como una de las mejores y maacutes atizadas teacutecnicas instrumentales a disposicioacuten del cientiacutefico para la adquisicioacuten de informacioacuten tanto cuantitativa como cualitativa
Los meacutetodos espectroscoacutepicos se clasifican seguacuten la regioacuten del espectro electromagneacutetico que esteacute implicada siendo las maacutes importantes las regiones de rayos x ultravioleta visible infrarroja microondas y radiofrecuencia
Meacutetodo quiacutemico La o-toluidina se condensa inicialmente con el grupo aldehiacutedo de la glucosa para formar una mezcla en equilibrio de la glucosamina y la base de schiff correspondiente Las reacciones que tienen lugar despueacutes de la condensacioacuten original producen una mezcla de cromoacutegenos verdes con una longitud de onda analiacutetica a 630nm
III parte experimental
Objetivos
Determinar el meacutetodo quiacutemico o-toluidina a traveacutes de la espectroscopia
Determinar la curva de calibracioacuten absorbancia vs concentracioacuten de glucosa para
los complejos glucosa-reactivo de antrona
Materiales
Reactivos Aacutecido sulfuacuterico Tiourea Antrona Glucosa
Procedimiento1 Preparar una muestra problema
Tubos de ensayos beaker tripode
Rejilla de metal Pinzas de madera Mechero bunsen
2 Llevar a una fiola con 25 ml de muestra patron adicionando 75 ml de agua destilada
3 Luego adicionar 2ml de antrona- sulfuacuterico y llevar a bantildeo maria
IV ResultadosLas absorbancias de cada
tubo de ensayo son
Primer tubo de ensayo 303
Segundo tubo de ensayo 317
Tercer tubo de ensayo 331
Cuarto tubo de ensayo 277
Quinto tubo de ensayo 316
Se muestra la curva de calibracioacuten de las soluciones del
complejo
El coeficiente de absorcioacuten se obtiene a partir de la pendiente
de la recta de ajuste por miacutenimo cuadrado
Al calibrar el equipo la absorbancia nos dio 1 pero debioacute ser 0
V Conclusiones
Se determinoacute el coeficiente de absorcioacuten para complejo glucosa-antrona a 620nm
A diferencia de la espectroscopia convencional en la cual se requiere construir una curva de calibracioacuten en un meacutetodo foto acuacutestico se requiere una solucioacuten estaacutendar
Los valores obtenidos son casi precisos mostrando la conveniencia del meacutetodo espectroscoacutepico en la cuantificacioacuten de glucosa por el meacutetodo de antrona
Interpretacioacuten
Luego de enfriar se procedioacute a llevar a la oscuridad para evitar la desnaturalizacioacuten por la luz
VI Cuestionario1- DESCRIBA LOS MEacuteTODOS QUE SE UTILIZAN PARA DETERMINAR LA CONCENTRACIOacuteN DE AZUCARES EN LIQUIDO BIOLOacuteGICO
Ej muestra sanguiacutenea
Meacutetodo cualitativo tiras colorimeacutetricas
La glucosa puede ensayarse cualitativamente con el uso de tiras colorimeacutetricas Este test usa glucosa oxidasa que cataliza la oxidacioacuten de d-glucosa a aacutecido gluconico con formacioacuten de h2o2 En presencia de la enzima oxidasa el h2o2 generado oxida un cromoacutegeno (orto-dianicidina) produciendo cambio de color que indica la presencia de glucosa Este meacutetodo es especiacutefico para la glucosa y la detecta cuando su concentracioacuten esta sobre rango normal
Meacutetodo cuantitativo
Meacutetodo quiacutemico o-toluidina
La o-toluidina se condensa inicialmente con el grupo aldehiacutedo de la glucosa para formar una mezcla en equilibrio de la glucosilamina y la base de schiff correspondiente las reacciones que tienen lugar despueacutes de la condensacioacuten original producen una mezcla de cromoacutegenos verdes con una longitud de onda analiacutetica a 63nm
Meacutetodo enzimaacutetico trinder-100 (sigma)
El meacutetodo enzimaacutetico se basa en la especificidad de la enzima glucosa oxidasa (god) por la b-d-glucosa La enzima cataliza la oxidacioacuten de la glucosa por oxigeno molecular dando el d-gluconato y peroacutexido de hidrogeno (h2o2 agua oxigenada) Para detectar y cuantificar esta oxidacioacuten se ocupa una reaccioacuten acoplada
2- GRAFICAR LOS RESULTADOS OBTENIDOS EN LA PRAacuteCTICA DE DETERMINACIOacuteN DE LA GLUCOSA POR MEacuteTODOS ESPECTROSCOacutePICOS
VII Bibliografiacutea
Disponibleenhttps
wwwmedicionespectrscopicosdelcoeficientedeabsorciona620nmparacomplejo
sglucosa-reactivodeantrona Acceso 24 de enero 2016
Disponible en httpswwwmetodoespectroscopicoyfotoacustico Acceso 24 de
enero 2016
Disponible en httpswwwmetodosparamuestradeglucosa-
biologicaenelorganismo Acceso 24 de enero 2016
Determinacioacuten de la glucosa por meacutetodos espectroscoacutepicos
Los meacutetodos espectroscoacutepicos de anaacutelisis se basan en la medida de la radiacioacuten electromagneacutetica emitida o absorbida por la materia Los meacutetodos de emisioacuten utilizan la radiacioacuten emitida cuando un soluto es excitado por energiacutea teacutermica eleacutectrica o energiacutea radiante Los meacutetodos de absorcioacuten por el contrario estaacuten basados en la diminucioacuten de la potencia (o atenuacioacuten) de la radiacioacuten ndash electromagneacutetica como consecuencia de la absorcioacuten que se produce en su interaccioacuten con el soluto
Los meacutetodos espectroscoacutepicos se consideran como una de las mejores y maacutes atizadas teacutecnicas instrumentales a disposicioacuten del cientiacutefico para la adquisicioacuten de informacioacuten tanto cuantitativa como cualitativa
Los meacutetodos espectroscoacutepicos se clasifican seguacuten la regioacuten del espectro electromagneacutetico que esteacute implicada siendo las maacutes importantes las regiones de rayos x ultravioleta visible infrarroja microondas y radiofrecuencia
Meacutetodo quiacutemico La o-toluidina se condensa inicialmente con el grupo aldehiacutedo de la glucosa para formar una mezcla en equilibrio de la glucosamina y la base de schiff correspondiente Las reacciones que tienen lugar despueacutes de la condensacioacuten original producen una mezcla de cromoacutegenos verdes con una longitud de onda analiacutetica a 630nm
III parte experimental
Objetivos
Determinar el meacutetodo quiacutemico o-toluidina a traveacutes de la espectroscopia
Determinar la curva de calibracioacuten absorbancia vs concentracioacuten de glucosa para
los complejos glucosa-reactivo de antrona
Materiales
Reactivos Aacutecido sulfuacuterico Tiourea Antrona Glucosa
Procedimiento1 Preparar una muestra problema
Tubos de ensayos beaker tripode
Rejilla de metal Pinzas de madera Mechero bunsen
2 Llevar a una fiola con 25 ml de muestra patron adicionando 75 ml de agua destilada
3 Luego adicionar 2ml de antrona- sulfuacuterico y llevar a bantildeo maria
IV ResultadosLas absorbancias de cada
tubo de ensayo son
Primer tubo de ensayo 303
Segundo tubo de ensayo 317
Tercer tubo de ensayo 331
Cuarto tubo de ensayo 277
Quinto tubo de ensayo 316
Se muestra la curva de calibracioacuten de las soluciones del
complejo
El coeficiente de absorcioacuten se obtiene a partir de la pendiente
de la recta de ajuste por miacutenimo cuadrado
Al calibrar el equipo la absorbancia nos dio 1 pero debioacute ser 0
V Conclusiones
Se determinoacute el coeficiente de absorcioacuten para complejo glucosa-antrona a 620nm
A diferencia de la espectroscopia convencional en la cual se requiere construir una curva de calibracioacuten en un meacutetodo foto acuacutestico se requiere una solucioacuten estaacutendar
Los valores obtenidos son casi precisos mostrando la conveniencia del meacutetodo espectroscoacutepico en la cuantificacioacuten de glucosa por el meacutetodo de antrona
Interpretacioacuten
Luego de enfriar se procedioacute a llevar a la oscuridad para evitar la desnaturalizacioacuten por la luz
VI Cuestionario1- DESCRIBA LOS MEacuteTODOS QUE SE UTILIZAN PARA DETERMINAR LA CONCENTRACIOacuteN DE AZUCARES EN LIQUIDO BIOLOacuteGICO
Ej muestra sanguiacutenea
Meacutetodo cualitativo tiras colorimeacutetricas
La glucosa puede ensayarse cualitativamente con el uso de tiras colorimeacutetricas Este test usa glucosa oxidasa que cataliza la oxidacioacuten de d-glucosa a aacutecido gluconico con formacioacuten de h2o2 En presencia de la enzima oxidasa el h2o2 generado oxida un cromoacutegeno (orto-dianicidina) produciendo cambio de color que indica la presencia de glucosa Este meacutetodo es especiacutefico para la glucosa y la detecta cuando su concentracioacuten esta sobre rango normal
Meacutetodo cuantitativo
Meacutetodo quiacutemico o-toluidina
La o-toluidina se condensa inicialmente con el grupo aldehiacutedo de la glucosa para formar una mezcla en equilibrio de la glucosilamina y la base de schiff correspondiente las reacciones que tienen lugar despueacutes de la condensacioacuten original producen una mezcla de cromoacutegenos verdes con una longitud de onda analiacutetica a 63nm
Meacutetodo enzimaacutetico trinder-100 (sigma)
El meacutetodo enzimaacutetico se basa en la especificidad de la enzima glucosa oxidasa (god) por la b-d-glucosa La enzima cataliza la oxidacioacuten de la glucosa por oxigeno molecular dando el d-gluconato y peroacutexido de hidrogeno (h2o2 agua oxigenada) Para detectar y cuantificar esta oxidacioacuten se ocupa una reaccioacuten acoplada
2- GRAFICAR LOS RESULTADOS OBTENIDOS EN LA PRAacuteCTICA DE DETERMINACIOacuteN DE LA GLUCOSA POR MEacuteTODOS ESPECTROSCOacutePICOS
VII Bibliografiacutea
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III parte experimental
Objetivos
Determinar el meacutetodo quiacutemico o-toluidina a traveacutes de la espectroscopia
Determinar la curva de calibracioacuten absorbancia vs concentracioacuten de glucosa para
los complejos glucosa-reactivo de antrona
Materiales
Reactivos Aacutecido sulfuacuterico Tiourea Antrona Glucosa
Procedimiento1 Preparar una muestra problema
Tubos de ensayos beaker tripode
Rejilla de metal Pinzas de madera Mechero bunsen
2 Llevar a una fiola con 25 ml de muestra patron adicionando 75 ml de agua destilada
3 Luego adicionar 2ml de antrona- sulfuacuterico y llevar a bantildeo maria
IV ResultadosLas absorbancias de cada
tubo de ensayo son
Primer tubo de ensayo 303
Segundo tubo de ensayo 317
Tercer tubo de ensayo 331
Cuarto tubo de ensayo 277
Quinto tubo de ensayo 316
Se muestra la curva de calibracioacuten de las soluciones del
complejo
El coeficiente de absorcioacuten se obtiene a partir de la pendiente
de la recta de ajuste por miacutenimo cuadrado
Al calibrar el equipo la absorbancia nos dio 1 pero debioacute ser 0
V Conclusiones
Se determinoacute el coeficiente de absorcioacuten para complejo glucosa-antrona a 620nm
A diferencia de la espectroscopia convencional en la cual se requiere construir una curva de calibracioacuten en un meacutetodo foto acuacutestico se requiere una solucioacuten estaacutendar
Los valores obtenidos son casi precisos mostrando la conveniencia del meacutetodo espectroscoacutepico en la cuantificacioacuten de glucosa por el meacutetodo de antrona
Interpretacioacuten
Luego de enfriar se procedioacute a llevar a la oscuridad para evitar la desnaturalizacioacuten por la luz
VI Cuestionario1- DESCRIBA LOS MEacuteTODOS QUE SE UTILIZAN PARA DETERMINAR LA CONCENTRACIOacuteN DE AZUCARES EN LIQUIDO BIOLOacuteGICO
Ej muestra sanguiacutenea
Meacutetodo cualitativo tiras colorimeacutetricas
La glucosa puede ensayarse cualitativamente con el uso de tiras colorimeacutetricas Este test usa glucosa oxidasa que cataliza la oxidacioacuten de d-glucosa a aacutecido gluconico con formacioacuten de h2o2 En presencia de la enzima oxidasa el h2o2 generado oxida un cromoacutegeno (orto-dianicidina) produciendo cambio de color que indica la presencia de glucosa Este meacutetodo es especiacutefico para la glucosa y la detecta cuando su concentracioacuten esta sobre rango normal
Meacutetodo cuantitativo
Meacutetodo quiacutemico o-toluidina
La o-toluidina se condensa inicialmente con el grupo aldehiacutedo de la glucosa para formar una mezcla en equilibrio de la glucosilamina y la base de schiff correspondiente las reacciones que tienen lugar despueacutes de la condensacioacuten original producen una mezcla de cromoacutegenos verdes con una longitud de onda analiacutetica a 63nm
Meacutetodo enzimaacutetico trinder-100 (sigma)
El meacutetodo enzimaacutetico se basa en la especificidad de la enzima glucosa oxidasa (god) por la b-d-glucosa La enzima cataliza la oxidacioacuten de la glucosa por oxigeno molecular dando el d-gluconato y peroacutexido de hidrogeno (h2o2 agua oxigenada) Para detectar y cuantificar esta oxidacioacuten se ocupa una reaccioacuten acoplada
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Determinar el meacutetodo quiacutemico o-toluidina a traveacutes de la espectroscopia
Determinar la curva de calibracioacuten absorbancia vs concentracioacuten de glucosa para
los complejos glucosa-reactivo de antrona
Materiales
Reactivos Aacutecido sulfuacuterico Tiourea Antrona Glucosa
Procedimiento1 Preparar una muestra problema
Tubos de ensayos beaker tripode
Rejilla de metal Pinzas de madera Mechero bunsen
2 Llevar a una fiola con 25 ml de muestra patron adicionando 75 ml de agua destilada
3 Luego adicionar 2ml de antrona- sulfuacuterico y llevar a bantildeo maria
IV ResultadosLas absorbancias de cada
tubo de ensayo son
Primer tubo de ensayo 303
Segundo tubo de ensayo 317
Tercer tubo de ensayo 331
Cuarto tubo de ensayo 277
Quinto tubo de ensayo 316
Se muestra la curva de calibracioacuten de las soluciones del
complejo
El coeficiente de absorcioacuten se obtiene a partir de la pendiente
de la recta de ajuste por miacutenimo cuadrado
Al calibrar el equipo la absorbancia nos dio 1 pero debioacute ser 0
V Conclusiones
Se determinoacute el coeficiente de absorcioacuten para complejo glucosa-antrona a 620nm
A diferencia de la espectroscopia convencional en la cual se requiere construir una curva de calibracioacuten en un meacutetodo foto acuacutestico se requiere una solucioacuten estaacutendar
Los valores obtenidos son casi precisos mostrando la conveniencia del meacutetodo espectroscoacutepico en la cuantificacioacuten de glucosa por el meacutetodo de antrona
Interpretacioacuten
Luego de enfriar se procedioacute a llevar a la oscuridad para evitar la desnaturalizacioacuten por la luz
VI Cuestionario1- DESCRIBA LOS MEacuteTODOS QUE SE UTILIZAN PARA DETERMINAR LA CONCENTRACIOacuteN DE AZUCARES EN LIQUIDO BIOLOacuteGICO
Ej muestra sanguiacutenea
Meacutetodo cualitativo tiras colorimeacutetricas
La glucosa puede ensayarse cualitativamente con el uso de tiras colorimeacutetricas Este test usa glucosa oxidasa que cataliza la oxidacioacuten de d-glucosa a aacutecido gluconico con formacioacuten de h2o2 En presencia de la enzima oxidasa el h2o2 generado oxida un cromoacutegeno (orto-dianicidina) produciendo cambio de color que indica la presencia de glucosa Este meacutetodo es especiacutefico para la glucosa y la detecta cuando su concentracioacuten esta sobre rango normal
Meacutetodo cuantitativo
Meacutetodo quiacutemico o-toluidina
La o-toluidina se condensa inicialmente con el grupo aldehiacutedo de la glucosa para formar una mezcla en equilibrio de la glucosilamina y la base de schiff correspondiente las reacciones que tienen lugar despueacutes de la condensacioacuten original producen una mezcla de cromoacutegenos verdes con una longitud de onda analiacutetica a 63nm
Meacutetodo enzimaacutetico trinder-100 (sigma)
El meacutetodo enzimaacutetico se basa en la especificidad de la enzima glucosa oxidasa (god) por la b-d-glucosa La enzima cataliza la oxidacioacuten de la glucosa por oxigeno molecular dando el d-gluconato y peroacutexido de hidrogeno (h2o2 agua oxigenada) Para detectar y cuantificar esta oxidacioacuten se ocupa una reaccioacuten acoplada
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2 Llevar a una fiola con 25 ml de muestra patron adicionando 75 ml de agua destilada
3 Luego adicionar 2ml de antrona- sulfuacuterico y llevar a bantildeo maria
IV ResultadosLas absorbancias de cada
tubo de ensayo son
Primer tubo de ensayo 303
Segundo tubo de ensayo 317
Tercer tubo de ensayo 331
Cuarto tubo de ensayo 277
Quinto tubo de ensayo 316
Se muestra la curva de calibracioacuten de las soluciones del
complejo
El coeficiente de absorcioacuten se obtiene a partir de la pendiente
de la recta de ajuste por miacutenimo cuadrado
Al calibrar el equipo la absorbancia nos dio 1 pero debioacute ser 0
V Conclusiones
Se determinoacute el coeficiente de absorcioacuten para complejo glucosa-antrona a 620nm
A diferencia de la espectroscopia convencional en la cual se requiere construir una curva de calibracioacuten en un meacutetodo foto acuacutestico se requiere una solucioacuten estaacutendar
Los valores obtenidos son casi precisos mostrando la conveniencia del meacutetodo espectroscoacutepico en la cuantificacioacuten de glucosa por el meacutetodo de antrona
Interpretacioacuten
Luego de enfriar se procedioacute a llevar a la oscuridad para evitar la desnaturalizacioacuten por la luz
VI Cuestionario1- DESCRIBA LOS MEacuteTODOS QUE SE UTILIZAN PARA DETERMINAR LA CONCENTRACIOacuteN DE AZUCARES EN LIQUIDO BIOLOacuteGICO
Ej muestra sanguiacutenea
Meacutetodo cualitativo tiras colorimeacutetricas
La glucosa puede ensayarse cualitativamente con el uso de tiras colorimeacutetricas Este test usa glucosa oxidasa que cataliza la oxidacioacuten de d-glucosa a aacutecido gluconico con formacioacuten de h2o2 En presencia de la enzima oxidasa el h2o2 generado oxida un cromoacutegeno (orto-dianicidina) produciendo cambio de color que indica la presencia de glucosa Este meacutetodo es especiacutefico para la glucosa y la detecta cuando su concentracioacuten esta sobre rango normal
Meacutetodo cuantitativo
Meacutetodo quiacutemico o-toluidina
La o-toluidina se condensa inicialmente con el grupo aldehiacutedo de la glucosa para formar una mezcla en equilibrio de la glucosilamina y la base de schiff correspondiente las reacciones que tienen lugar despueacutes de la condensacioacuten original producen una mezcla de cromoacutegenos verdes con una longitud de onda analiacutetica a 63nm
Meacutetodo enzimaacutetico trinder-100 (sigma)
El meacutetodo enzimaacutetico se basa en la especificidad de la enzima glucosa oxidasa (god) por la b-d-glucosa La enzima cataliza la oxidacioacuten de la glucosa por oxigeno molecular dando el d-gluconato y peroacutexido de hidrogeno (h2o2 agua oxigenada) Para detectar y cuantificar esta oxidacioacuten se ocupa una reaccioacuten acoplada
2- GRAFICAR LOS RESULTADOS OBTENIDOS EN LA PRAacuteCTICA DE DETERMINACIOacuteN DE LA GLUCOSA POR MEacuteTODOS ESPECTROSCOacutePICOS
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Tercer tubo de ensayo 331
Cuarto tubo de ensayo 277
Quinto tubo de ensayo 316
Se muestra la curva de calibracioacuten de las soluciones del
complejo
El coeficiente de absorcioacuten se obtiene a partir de la pendiente
de la recta de ajuste por miacutenimo cuadrado
Al calibrar el equipo la absorbancia nos dio 1 pero debioacute ser 0
V Conclusiones
Se determinoacute el coeficiente de absorcioacuten para complejo glucosa-antrona a 620nm
A diferencia de la espectroscopia convencional en la cual se requiere construir una curva de calibracioacuten en un meacutetodo foto acuacutestico se requiere una solucioacuten estaacutendar
Los valores obtenidos son casi precisos mostrando la conveniencia del meacutetodo espectroscoacutepico en la cuantificacioacuten de glucosa por el meacutetodo de antrona
Interpretacioacuten
Luego de enfriar se procedioacute a llevar a la oscuridad para evitar la desnaturalizacioacuten por la luz
VI Cuestionario1- DESCRIBA LOS MEacuteTODOS QUE SE UTILIZAN PARA DETERMINAR LA CONCENTRACIOacuteN DE AZUCARES EN LIQUIDO BIOLOacuteGICO
Ej muestra sanguiacutenea
Meacutetodo cualitativo tiras colorimeacutetricas
La glucosa puede ensayarse cualitativamente con el uso de tiras colorimeacutetricas Este test usa glucosa oxidasa que cataliza la oxidacioacuten de d-glucosa a aacutecido gluconico con formacioacuten de h2o2 En presencia de la enzima oxidasa el h2o2 generado oxida un cromoacutegeno (orto-dianicidina) produciendo cambio de color que indica la presencia de glucosa Este meacutetodo es especiacutefico para la glucosa y la detecta cuando su concentracioacuten esta sobre rango normal
Meacutetodo cuantitativo
Meacutetodo quiacutemico o-toluidina
La o-toluidina se condensa inicialmente con el grupo aldehiacutedo de la glucosa para formar una mezcla en equilibrio de la glucosilamina y la base de schiff correspondiente las reacciones que tienen lugar despueacutes de la condensacioacuten original producen una mezcla de cromoacutegenos verdes con una longitud de onda analiacutetica a 63nm
Meacutetodo enzimaacutetico trinder-100 (sigma)
El meacutetodo enzimaacutetico se basa en la especificidad de la enzima glucosa oxidasa (god) por la b-d-glucosa La enzima cataliza la oxidacioacuten de la glucosa por oxigeno molecular dando el d-gluconato y peroacutexido de hidrogeno (h2o2 agua oxigenada) Para detectar y cuantificar esta oxidacioacuten se ocupa una reaccioacuten acoplada
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La glucosa puede ensayarse cualitativamente con el uso de tiras colorimeacutetricas Este test usa glucosa oxidasa que cataliza la oxidacioacuten de d-glucosa a aacutecido gluconico con formacioacuten de h2o2 En presencia de la enzima oxidasa el h2o2 generado oxida un cromoacutegeno (orto-dianicidina) produciendo cambio de color que indica la presencia de glucosa Este meacutetodo es especiacutefico para la glucosa y la detecta cuando su concentracioacuten esta sobre rango normal
Meacutetodo cuantitativo
Meacutetodo quiacutemico o-toluidina
La o-toluidina se condensa inicialmente con el grupo aldehiacutedo de la glucosa para formar una mezcla en equilibrio de la glucosilamina y la base de schiff correspondiente las reacciones que tienen lugar despueacutes de la condensacioacuten original producen una mezcla de cromoacutegenos verdes con una longitud de onda analiacutetica a 63nm
Meacutetodo enzimaacutetico trinder-100 (sigma)
El meacutetodo enzimaacutetico se basa en la especificidad de la enzima glucosa oxidasa (god) por la b-d-glucosa La enzima cataliza la oxidacioacuten de la glucosa por oxigeno molecular dando el d-gluconato y peroacutexido de hidrogeno (h2o2 agua oxigenada) Para detectar y cuantificar esta oxidacioacuten se ocupa una reaccioacuten acoplada
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![Controles Electricos I, Pract. 4, Grupo 2, Dia Lunes.[1]](https://static.fdocuments.co/doc/165x107/557202c94979599169a414ae/controles-electricos-i-pract-4-grupo-2-dia-lunes1.jpg)
