BARDOS ROSADOS

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Bioensayo agudo de Barbos Rosados Delgado Gutiérrez, Judith Alumno de la asignatura de Calidad de Agua de la Facultad de Oceanografa, !es"uera, Ciencias Alimentari as y Acuicultura# Calidad de agua teora A$o académico% &'()

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Bioensayo agudo de Barbos Rosados

Delgado Gutiérrez, Judith

Alumno de la asignatura de Calidad de Agua de la Facultad de Oceanografa,

!es"uera, Ciencias Alimentarias y Acuicultura#

Calidad de agua teora

A$o académico% &'()

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Resumen

*e determin+ la concentraci+n letal media del lomo en la esecie de los eces Bardos

Rosados, mediante una rueba de to-icidad aguda realizada en bioensayos est.ticos a /0

horas 1C2)'3/0h4# *e e5aluaron los rinciales efectos del contaminante sobre la estructura

de estos organismos acu.ticos a corto lazo y en los ar.metros hematol+gicos# 2a

concentraci+n letal media de lomo ara el Bardos Rosados fue de '6'#'(6'#(%(6('6&' en /0

h y se obser5aron los siguientes biomarcadores e-ternos% 7ado let.rgico en la suerficie,

oacidad de la c+rnea, cambios en la igmentaci+n de la iel, asfi-ia# 8odos los comuestos

de lomo son t+-icos en diferente grado, deendiendo de su naturaleza "umica y grado de

solubilidad de cada comuesto, los m.s t+-icos son los comuestos org.nicos#

Desde hace mucho tiemo se sabe "ue el lomo es 5enenoso, tiene efectos t+-icos ara las

 lantas, el lancton y dem.s organismos acu.ticos# 2os comuestos de lomo en los eces

les origina la formaci+n de una elcula coagulante y les ro5oca alteraciones

hematol+gicas#

9l laboratorio cuenta con un .rea ara mantener culti5os de distintas esecies y una ara la

realizaci+n de los bioensayos de to-icidad con esecies animales y 5egetales# *e realizo

una limieza del laboratorio as como la realizaci+n de un in5entario el cual deber. estar 

 egado en dicho laboratorio# 9l ob:eti5o de este bioensayo es obser5ar sntomas o efectos

 reliminares "ue causa el contaminante m.s no la mortalidad y construir una cur5a de

 orcenta:e de mortalidad de los eces 5ersus las diferentes concentraciones del

contaminante#

Palabras clave: 2aboratorio, bioensayos, lomo

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Abstract

A5erage lethal concentration of lead found in the secies of fish !in; Bardos, through acute

to-icity test erformed on static at /0 hours 1C2)'3/0h4 bioassays# 8he main effects of the

 ollutant on the structure of these short3term a"uatic organisms and hematologic

 arameters <ere e5aluated# 8he median lethal concentration lead to the Bardos !in; <ere

', '#'(, '#( (, (', &' in /0 h the follo<ing e-ternal biomar;ers <ere obser5ed% *<im

lethargic surface, corneal oacity, changes in igmentation s;in suffocation# All lead

comounds are to-ic to 5arying degrees, deending on their chemical nature and e-tent of 

solubility of each comound, the organic comounds are to-ic#

=t has long been ;no<n that lead is oisonous, has to-ic effects on lants, lan;ton and

other a"uatic organisms# 2ead comounds in fish originates them forming a coagulant film

and causes them haematological disorders#

8he laboratory has an area to maintain cros of different secies and to erform to-icity

 bioassays animal and lant secies# Cleaning the laboratory as <ell as an in5entory <hich

must be stuc; in the laboratory it <as conducted# 8he urose of this bioassay is to obser5e

symtoms or reliminary effects caused by ollution but not the mortality cur5e and build a

mortality rate of fish 5ersus the different concentrations of the ollutant#

>ey<ords% 2aboratory bioassays, lead

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Bioensayos

*eg?n Rodrguez y 9sclaés, 1(//)4 2os bioensayos de to-icidad ermiten e5aluar el

grado de afectaci+n "ue una sustancia "umica tiene en organismos 5i5os y éstos ueden ser 

agudos o cr+nicos# 2as ruebas agudas cuantifican las concentraciones letales de un

-enobi+tico a una esecie en articular# 9l 5alor calculado se denomina concentraci+n letal

media 1C2)'4 y corresonde a la concentraci+n de un -enobi+tico "ue causa la muerte al

)' @ de la oblaci+n e-erimental al cabo de un tiemo determinado, generalmente en o

/0 horas# 9n contraste, las ruebas cr+nicas estiman la concentraci+n efecto media

1C9)'4 de la sustancia de rueba "ue causa un efecto al )' @ de la oblaci+n e-erimental,

al cabo de un tiemo determinado

*eg?n illamar, 1(//04 !ara regular las descargas de aguas residuales t+-icas hay "ue

utilizar datos de ensayos de to-icidad hechos con organismos 5i5os y confiar en estos

datos, adem.s de efectuar estudios detallados de las caractersticas fsicas y "umicas de los

contaminantes y de los cambios "ue ocurren desués de su descarga en el medio# Cuando se

 uedan describir con recisi+n en términos "umicos y fsicos los comonentes t+-icos de

un contaminante y se disonga de técnicas analticas ertinentes y de suficiente

informaci+n acerca de la to-icidad de esos comonentes ara los organismos acu.ticos, se

 odr.n establecer normas ara tales contaminantes en 5alores numéricos ara los

comonentes t+-icos 1FAO, (/(4# 2os bioensayos de to-icidad con agentes contaminantes

en organismos 5i5os ba:o condiciones de laboratorio, se han incrementado en estos ?ltimos

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tiemos debido a la bre5edad con "ue se obtiene la informaci+n sobre las dosis letales y

subletales 1C2)'4 "ue afectan negati5amente organismos 5i5os en los ambientes marinos,

estuarinos y dulceacucolas #

*eg?n !alacios y !ereira 1(//E4 9l uso de bioensayos ara la e5aluaci+n de to-icidad de

sustancias liberadas al medio a tra5és de efluentes, ha lle5ado a la utilizaci+n de

 biomonitores roios de los ambientes e5aluados, lo cual fa5orece indirectamente la

 reser5aci+n de la biodi5ersidad local# *in embargo, la 5ariabilidad en la alicaci+n de las

técnicas e-erimentales ara el mantenimiento de organismos sil5estres afecta la

interretaci+n y comaraci+n de los resultados entre laboratorios, or lo "ue se hace

necesario desarrollar metodologas estandarizadas ara establecer condiciones controladas#

*eg?n 2e<ontin, 1(/E4 tilizar organismos ro5enientes directamente del h.bitat natural

 uede distorsionar los resultados obtenidos or fuentes de 5ariabilidad no re5istas, como

nutrici+n, din.mica de la oblaci+n, estrés or deredaci+n, etc# 9stas 5ariables ueden ser 

controladas o eliminadas con las oblaciones de laboratorio6 adem.s, el entrecruzamiento

consanguneo "ue ocurre a lo largo del tiemo en esas oblaciones, resulta en una

considerable reducci+n de la 5ariabilidad genética#

*eg?n Reish y Oshida, 1(/E4 2os bioensayos, o ruebas de to-icidad son e-erimentos

"ue miden el efecto de uno o m.s contaminantes en una o m.s esecies

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*eg?n FAO, 1(/(4# *e entiende or bioensayo un ensayo en "ue un te:ido, organismo o

gruo de organismos 5i5os se usan como reacti5o ara determinar la otencia de cual"uier 

sustancia fisiol+gicamente acti5a cuya acti5idad se desconoce

*eg?n 9sclaés, 1(///4 ermiten e5aluar el grado de to-icidad de una sustancia "umica,

un efluente, un cuero de agua, etc#, emleando organismos 5i5os

*eg?n Castillo 1&''4 9n el camo de la to-icologa y la ecoto-icologia es necesario

determinar el efecto "ue roduce uno o 5arios comuestos "umicos 1resuntamente

t+-icos4 a los indi5iduos de una determinada esecie6 as como su caacidad de

acumulaci+n en los te:idos 5i5os y, en general, su comortamiento en el comortamiento

 bi+tico del ecosistema# 2os e-erimentos dise$ados ara este fin son los denominados

bioensayosH# 2a FAO define el termino bioensayo como% tests en los cuales un te:ido

5i5o, organismo o gruo de organismos, se usan como reacti5os ara la determinaci+n de la

 otencia de alguna substancia acti5a fisiol+gicamenteH#

9ste tio de e-erimentos se uede utilizar ara determinar la to-icidad de contaminantes

 ara diferentes esecies de organismo, registrando la mortalidad "ue roducen, u otros

efectos no letales 1subletales4 "ue onen en eligro la suer5i5encia de los indi5iduos o de

las oblaciones en el medio natural, como or e:emlo efectos sobre el comortamiento, la

reroducci+n o el metabolismo#

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9n un sentido m.s amlio, los bioensayos incluyen también tests de acumulaci+n de los

t+-icos en los organismos, diferenci.ndose entre las diferentes 5as de entrada de los

-enobi+ticos# Iientras "ue los animales terrestres acumulan contaminantes rincialmente

a tra5és del alimento, en el medio acu.tico se ueden distinguir tres rocesos bien

diferenciados% bioconcentraci+n, bioacumulaci+n y biomagnificaci+n#

2a bioconcentraci+n es el roceso or el cual los organismos, esecialmente los acu.ticos,

 ueden absorber y concentrar sustancias, como los laguicidas, directamente del medio

1agua4 "ue les rodea, a tra5és de su suerficie resiratoria y de su iel# Cuando este roceso

considera, adem.s de la absorci+n directa del medio, la absorci+n de las sustancias en el

tracto digesti5o a artir de los alimentos se conoce como bioacumulación#

9stos rocesos ocurren cuando un organismo absorbe una cantidad de sustancia mayor a la

"ue uede eliminar y or ello la sustancia se acumula dentro de su cuero#

9l otencial de bioconcentraci+n o bioacumulaci+n de una sustancia se uede estimar a

 artir de su coeficiente de artici+n octanolagua 1> o<4, el cual nos indica la caacidad de

una sustancia de disol5erse en la grasa y, or lo tanto, de almacenarse en el te:ido adioso

de los organismos# 8ambién uede medirse directamente a tra5és del factor de

 bioconcentraci+n 1BCF o Bioconcentration Factor4, el cual es la cifra "ue e-resa la

relaci+n entre la concentraci+n de la sustancia en un organismo y la concentraci+n de la

misma en el ambiente# *e calcula di5idiendo la concentraci+n en los te:idos entre la

concentraci+n de e-osici+n o en el medio circundante# De esta manera, un BCF de ('''

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significa "ue el organismo concentra el roducto hasta un 5alor mil 5eces suerior al del

ambiente#

2a bioacumulaci+n es imortante or"ue nos indica las osibilidades de "ue las sustancias

se transfieran a lo largo de la cadena alimenticia 1biomagnificaci+n4#

Aun"ue la comida es la rincial 5a de entrada de contaminantes en las esecies terrestres,

en la mayora de los organismos acu.ticos redominan los rocesos de bioconcentraci+n#

2os bioensayos utilizados en ecoto-icologia acu.tica se clasifican, en funci+n de su

duraci+n y del método "ue se emlea ara a$adir el to-ico al agua, de la siguiente manera%

Test a corto plazo: 9l eriodo de tiemo oscila entre y /0 horas y normalmente

no se suministra comida a los organismos de e-erimentaci+n6 la gran 5enta:a de

este tio de bioensayos es la raidez de los resultados#

Test a largo plazo: *u duraci+n oscila entre E y uno o 5arios meses6 la 5enta:a "ue

 resenta frente a los anteriores es su mayor fiabilidad#

Test estático:  *on bioensayos generalmente de corta duraci+n en los "ue los

organismos est.n durante todo el eriodo de e-erimentaci+n en el mismo medio# Test de renovación o estático con renovación: 9n este tio de bioensayo el medio

se renue5a eri+dicamente#

Test de flujo:  9s el m.s sofisticado, ya "ue el medio se 5a reno5ando

continuamente mediante sistemas de circulaci+n y dosificaci+n autom.tica#

!ara 5alorar la concentraci+n de bioconcentraci+n "ue osee un comuesto se utiliza el

Factor de Bioconcentraci+n 1BCF4, "ue se define con el cociente entre la concentraci+n de

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comuesto en un organismo determinado 1C'4 y su concentraci+n en el agua 1Ca4, en

condiciones de e"uilibrio%

9ste ar.metro to-icol+gico es de rimera imortancia en los estudios sobre la eligrosidad

de un determinado comuesto ara la 5ida# !uede determinarse e-erimentalmente

mediante ensayos largos, caros y "ue asumen "ue la cinética de las reacciones de entrada y

deuraci+n del contaminante es de rimer orden# Asimismo, se ha determinado

e-erimentalmente "ue las reacciones de deuraci+n de 5arios comuestos, ara eces,

resonden en las etaas iniciales a cinéticas de segundo orden# Dicho factor también uede

deducirse a artir de algunas roiedades del comuesto "umico en cuesti+n, tales como su

coeficiente de artici+n octanolagua 1> o<4 y su solubilidad en agua 1*<4#

2a caacidad ara bioconcentrarse de un laguicida se 5e afectada también or los factores

"ue influyen en la calidad del agua 1temeratura, K, salinidad, dureza y o-igeno disuelto4,

as como or las caractersticas biol+gicas roias de la esecie e-uesta 1se-o, talla,

contenido en lidos, tasa de crecimiento, acti5idad fisiol+gica y estado nutricional4# !or lo

tanto, todos estos factores deber.n tenerse en cuenta a la hora de dise$ar un bioensayo ara

la determinaci+n del Factor de Bioconcentraci+n de un comuesto en un ser 5i5o#

Diferentes organismos internacionales tales como la !9CD, la A*8I o la * 9!A han

emitido una serie de recomendaciones ara la realizaci+n de este tio de ensayos con el fin

de conseguir "ue los resultados de estos sean comarables, es decir, una estandarizaci+n de

los ar.metros "ue se obtengan# 1burnison, (//4# 9sta es una tarea ardua debido a la

comle:idad de los ensayos como consecuencia de las 5ariables "ue inter5ienen# 9n

general, las recomendaciones 5an encaminadas a la definici+n ine"u5oca de los diferentes

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 ar.metros to-icocinéticos y a e5itar determinaciones err+neas de estos como consciencia

del amlio rango de diferentes roiedades fsico "umicas "ue resentan los

contaminantes 1solubilidades, olaridades4, y el uso de carriers o 5ehculos ara la

disoluci+n en el medio acu.tico de comuestos oco solubles#

2as conclusiones de todos estos estudios se basan, finalmente, en datos analticos "ue

muchas 5eces son de difcil obtenci+n# 9n casos concretos de contaminantes de difcil

determinaci+n analtica, se re"uieren rocedimientos de an.lisis fiables y suficientemente

5alidados "ue ermitan la determinaci+n e-acta de la concentraci+n de los comuestos

ob:eto de estudio en la dieta, en el medio o en los organismos, deendiendo del ob:eti5o del

 bioensayo#

  Figura.1 Ejemplo de bioensayo

Pruebas de toxicidad

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*eg?n Ramrez 1&'')4 na rueba de to-icidad tica in5olucra un agente o estimulo 1or 

e:emlo, un esticida de, un metal esado o una muestra ambiental con contaminantes

"umicos4, el cual se alica a un organismo o gruo de organismos 1or e:emlo, un culti5o

 bacterial o de un alga, animales, o lantas4 al "ue denominaremos genéricamente su:eto,

sobre el "ue se e5al?a una cierta resuesta reseleccionada# 2a magnitud del estimulo o

dosis uede medirse como un eso, un 5olumen o una concentraci+n#

2a resuesta del su:eto se 5alora mediante la cuantificaci+n final de alguna caracterstica

1eso del cuero, ero del hgado, ritmo cardiaco, etc#4, el cambio de ella 1aumento en el

 eso cororal, disminuci+n en la resi+n sangunea4 o or la ocurrencia o no de un

determinado fen+meno 1muerte, inhibici+n del crecimiento, una contracci+n muscular, etc4#

!artiendo de la base de "ue la magnitud o la frecuencia de la resuesta deender.n de la

dosis alicada, las ruebas de to-icidad suelen dise$arse utilizando distintas dosis# 2a

informaci+n obtenida de este tio de ensayos ermite la cuantificaci+n de la relaci+n entre

las dos 5ariables 1dosis y resuesta4, caracterizando to-icol+gica o ecoto-icol+gicamente al

comuesto# 7ormalmente, las ruebas de to-icidad se dise$an ara comarar o estimar la

 otencia de un agente con relaci+n a una rearaci+n est.ndar o control#

9s imortante destacar "ue la resuesta a una dosis en articular se 5er. afectada en mayor 

o menos medida or factores no controlados durante el e-erimento#

Toxicidad Aguda

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*eg?n !alacios, I# y !ereira 1(//E4 2a to-icidad aguda tiene or ob:eto determinar los

efectos de una dosis ?nica y muy ele5ada de una sustancia# sualmente, el unto final del

estudio es la muerte del animal y la to-icidad aguda se e-resa or la dosis letal )', "ue

5iene a reresentar m.s o menos la dosis de la sustancia "ue roduce la muerte en el )'@

de los animales#

2a obser5aci+n de los animales se lle5a a cabo desués de la administraci+n de la sustancia

y dura hasta ( das, desués de los cuales los animales son sacrificados y autosiados# 9n

general, el test se realiza con ) gruos de (' animales de cada se-o, aun"ue e-isten algunos

métodos abre5iados "ue intentan reducir el n?mero de animales a sacrificar#

2a determinaci+n de la D2)' se suele lle5ar a cabo en rata y rat+n or al menos dos 5as de

administraci+n entre las cinco osibles 1i#5#, i#m# i# s#c# y oral4# 9n el erro y otros

animales de tama$o arecido, el unto final del estudio no suele ser la muerte del animal,

sino la determinaci+n de la dosis "ue roduce unos se5eros efectos ad5ersos

2a e-erimentaci+n a concentraciones subletales se lle5an a cabo con e-osiciones

cr+nicas de duraci+n mucho m.s rolongadas "ue las e-osiciones agudas y las m.s usadas

son las siguientes%

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Pruebas de ciclo vital 3 9n esta rueba todos los estadios del ciclo 5ital son e-uestos al

agente t+-ico# 2a rueba se inicia con los hue5os o etaas embrionarias temranas y se

e-onen hasta la madurez, la o5odeosici+n y se contin?a hasta "ue la rogenie tiene L'

das de edad#

Pruebas de ciclo parcial 3 *on similares a la rueba cr+nica anterior, ero se inicia con

 :u5eniles y se contin?a hasta "ue la rogenie cumle L' das de edad# *e usa con esecies

"ue re"uieren erodos rolongados ara madurar#

Pruebas de embriónlarvas 3 *e obser5a el efecto del t+-ico sobre estos dos estadios de

desarrollo#

Prueba de velocidad de respiración 3 *e mide el efecto del t+-ico sobre la 5elocidad de

resiraci+n en un e-erimento de flu:o continuo#

9n base a e-erimentos a concentraciones subletales, se identifican los siguientes

 ar.metros%

• 2a concentraci+n m.s alta "ue no roduce efectos sobre el crecimiento,

reroducci+n, sobre5i5encia del ez de rueba, é-ito de la eclosi+n y crecimiento de

la rogenie

• 2a concentraci+n m.s ba:a "ue afecta cual"uiera de las 5ariables fisiol+gicas

anteriores#

Al rango entre los dos 5alores se le conoce como la Concentraci+n I.-ima Acetable del

8+-ico o CIA8#

Toxicidad !rónica

*eg?n 9sclaés, 1(///4 9stiman la concentraci+n efecto media 1C9)'4, la cual es la

concentraci+n de la sustancia de rueba "ue causa un efecto al )'@ de la oblaci+n

e-erimental, al cabo de un tiemo determinado6 deende del estado de 5ida considerado o

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del ciclo de 5ida del organismo emleado# Alternati5amente, un ensayo definiti5o uede

utilizarse ara estimar el tiemo re"uerido ara roducir un efecto al )'@ de los

organismos 189)'4, a una concentraci+n esecfica

Organismo de Prueba.

2a elecci+n de un organismo de rueba adecuado ara un Bioensayo deende del efecto

"ue se desea e5aluar y de las caractersticas del organismo, or e:emlo, un canario es un

organismo adecuado de un bioensayo ara detectar gases t+-icos o falta de o-geno en una

mina, or"ue se tiene el antecedente de su uso ara estos fines, los mineros entraban con un

canario y si el canario mora, or ser m.s sensible, ellos tenan la oortunidad de salir y no

correr la misma suerte# Otros e:emlos de organismos de rueba son, el uso de cerdos ara

detectar y colectar trufas, erros ara detectar e-losi5os y drogas, gametos de erizo de mar 

 ara detectar eco to-icidad en agua de mar, 9uglena gracilis ara detectar ni5eles de

5itamina B(&#

2o anterior es ?til ara asegurarse "ue la resuesta de una oblaci+n e-uesta a cierto

agente t+-ico se deba al efecto de éste y no a 5ariaciones tanto de la sensibilidad de los

organismos como de fallas oeracionales en la alicaci+n del método#

2os Organismos de rueba ueden ser%

M Organismos criados en 2aboratorio

M Organismos colectados en camo#

Tabla"# !rinciales 5enta:as y des5enta:as asociadas con las ruebas de to-icidad en el

laboratorio y los estudios de camo

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Tipo $entajas %esventajas

 

&aboratorio

Disonibilidad de

metodologas estandarizadas

Deficiencia de realismo

Comaraci+n de esecies de

diferentes ni5eles tr+ficos

=ncaacidad de redecir

efectos ba:o condiciones de

camo

!osibilidad de utilizar las

esecies m.s sensibles

Alicable solo en esecies

 robadas

 

!ampo

2os resultados ueden

correlacionarse con los datos

fsico3"umicos

=ncaacidad de aislar los

factores causantes

!roorciona e5idencia

incuestionable del deterioro

 7o utilizable ara ruebas de

hi+tesis

=ndica los contaminantes

resonsables de la afectaci+n

9n general, es referible utilizar organismos criados en el laboratorio en 5ez de los

recolectados en el camo or"ue los e-.menes estandarizados re"uieren de un

abastecimiento siemre disonible de organismos en buena salud ro5enientes de culti5os

de condiciones conocidas y constantes# 2os bioensayos hechos en el laboratorio usando

organismos recolectados en el camo han sido menos satisfactorios, con muy ocas

e-ceciones# 2os organismos recolectados en el camo son m.s satisfactorios cuando el

laboratorio est. cerca al lugar de recolecci+n y el abastecimiento de agua desde all est.

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siemre disonible, como es el caso de nuestro curso "ue cuenta con un laboratorio "ue

 ro5ee esas condiciones#

Selección de los Organismos para el Bioensayo

*eg?n Iason 1(/4 resume las caractersticas "ue debe oseer un organismo ara "ue sea

adecuado en la e:ecuci+n de bioensayos, en los siguientes untos%

9l organismo debe ser sensible a las sustancias analizadas#

Debe ertenecer al ecosistema acu.tico "ue se est. e5aluando#

*u distribuci+n debe ser amlia y su disonibilidad en cantidades suficientes tanto a

ni5el local como nacional#

Debe oder culti5arse f.cilmente en el laboratorio

Debe ser comatible con las técnicas de bioensayos#

2os organismos e"ue$os y de corto ciclo de 5ida son referibles# 2os in5ertebrados son

m.s utilizados, ero los eces se usan a menudo or su imortancia#

*eg?n 9sclaés, 1(///4

Reresentati5o de ambientes troicales, de amlia distribuci+n en el as o de

imortancia comercial#

Disonibilidad, ser f.ciles de encontrar, en n?mero suficiente y colectarse sin

dificultad# *e debe tomar en cuenta roblemas con el transorte# 

Con un tama$o suficientemente e"ue$o ara oseer los necesarios or e-eriencia

y "ue sean reresentati5os ara los estudios estadsticos#

De f.cil culti5o, lo "ue garantiza un adecuado suministro de organismos en los

ensayos y el establecimiento con e-actitud de la edad o estado de desarrollo# 2a

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edad es de suma imortancia en los bioensayos, ya "ue la sensibilidad uede 5ariar

significati5amente durante su desarrollo#

9secies con gran suscetibilidad a e-osiciones con sustancias -enobi+ticas#

Garantizando cubrir el eor de los escenarios, y roorcionando resultados "ue

ofrecen una alta rotecci+n al resto de la cadena tr+fica#

*eg?n Kenry 1(/4 la selecci+n de organismos ara bioensayos debe basarse en%

• 2os ob:eti5os del rograma to-icol+gico

• 2a informaci+n disonible sobre los osibles organismos

• 2as caractersticas de las esecies

• 2as instalaciones y e"uios de laboratorio

• 9l ni5el de caacitaci+n de los técnicos

Tabla"' Adatabilidad de los organismos como esecies ara bioensayos

Organismos ara

 bioensayos

Adatabilidad del organismo Com?nmente

utilizado como unorganismos ara

 bioensayosCulti5o de

laboratorio

Recolecci+n de camo

(# Algas 9-celente Iuy difcil de recolectarculti5o uro

*i

&# !rotozoos 9-celente Iuy difcil de recolectarculti5o uro

Iuy limitado

L# =n5ertebrados  

a# !lanct+nicos  

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(# Rotferos Bueno Iuy difcil de recolectar

culti5o uro

2imitado

&# Clad+ceros 9-celente Alta tasa de mortandad

desués de la recolecci+n de

camo

*i

L# Coéodos Iediano Alta tasa de mortandaddesués de la recolecci+n de

camo

2imitado

# Camarones Bueno Bueno *i

 b# Bénticos  (# Anélidos Iediano Iediano 2imitado

&# =nsectos Ba:o Iediano *i

L# Ioluscos Bueno Iediano *i

# Crust.ceos Ba:o Iediano  

# !eces 9-celente Alta tasa de mortandaddesués de la recolecci+n de

camo

*i

&aboratorio de Bioensayos

*eg?n Gutiérrez 1&''/4 9l 2aboratorio de Bioensayos se crea con la finalidad de

desarrollar, estandarizar y alicar bioensayos en e5aluaciones eco to-icol+gicas de

sustancias "umicas uras o comle:as, de to-icidad en sedimentos marinos o continentales

y monitoreo de efectos t+-icos de efluentes de residuos l"uidos industriales y domésticos,

"ue cubran las necesidades de e5aluaci+n ambiental de la emresa ri5ada y el sector 

 ?blico a ni5el regional y nacional#

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2os Bioensayos de to-icidad son una herramienta intensamente utilizada en ases

desarrollados, con el ob:eto de e5aluar en forma efecti5a y eficiente los efectos t+-icos

agudos y cr+nicos de la contaminaci+n en los organismos 5i5os# 9n la r.ctica, esta técnica

cuantifica la relaci+n concentraci+n3efecto de comuestos "umicos conocidos o mezclas

comle:as, or medio de resuestas biol+gicas medidas ba:o condiciones controladas y

estandarizadas 2as ruebas de to-icidad son una herramienta ?til ara determinar el grado

de to-icidad de los contaminantes y e5aluar el riesgo de los ecosistemas y la oblaci+n

e-uestos a estas sustancias "umicas# *e utilizan organismos de rueba animales o

5egetales ara e5aluar la to-icidad en muestras ambientales 1agua, aire, suelo y

sedimentos4#

9l laboratorio de Bioensayos se est. fortaleciendo ara dar resuesta a uno de los

 rinciales retos ambientales mundiales% 2a reducci+n de contaminantes rioritarios "ue

tienen efectos, a ni5el global, en la salud de los ecosistemas y oblaci+n, y "ue contribuyen

al cambio clim.ticoH#

9n los ecosistemas acu.ticos se ha incrementado dr.sticamente la contaminaci+n, debido a

"ue son utilizados como 5ertederos de todas las descargas de desechos industriales y

residuos resultantes de un sinn?mero de acti5idades del hombre, lo "ue afecta en gran

medida a las comunidades "ue conforman dichos ecosistemas#

!or esa raz+n, es necesario cuantificar el da$o causado a los ecosistemas emleando

técnicas adecuadas y recisas "ue ermitan e5aluar las condiciones en las "ue se

encuentran% las ruebas de bioensayos son consideradas como una herramienta ?til en la

in5estigaci+n de este tio de roblemas#

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9stas ruebas se traducen tanto en la descrici+n y resencia de un organismo, como en la

determinaci+n de los lmites de tolerancia medios 182I)'4, denominada también

concentraci+n letal media 1C2)'4, con lo cual se uede establecer la eligrosidad de una

sustancia t+-ica 5ertida al medio ambiente acu.tico#

9n Ié-ico, se han establecido normas cuyos criterios ermiten determinar los ndices de

to-icidad "ue se encuentren en el medio ambiente acu.tico y "ue ocasionan una afectaci+n

en la 5ida de los organismos a corto, largo y mediano lazo#

2os bioensayos son or definici+n, ruebas en las "ue se usan organismos 5i5os ara

detectar o medir la resencia y efectos de una o m.s substancias t+-icas, as como

determinar el lmite de tolerancia de dichas substancias con resecto a los organismos#

2os ensayos biol+gicos son herramientas de diagn+stico adecuadas ara determinar el

efecto de agentes fsicos y "umicos sobre organismos de rueba ba:o condiciones

e-erimentales esecficas y controladas# 2os ro+sitos de la realizaci+n de los bioensayos

son%

• 95aluar la to-icidad "umica de los desechos industriales "ue afecten la 5ida

acu.tica#

• Determinar los efectos de los contaminantes en organismos acu.ticos dentro de su

medio natural o en condiciones controladas de laboratorio#

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• 9l laboratorio ara ensayos biol+gicos deber. contar con e"uiamiento aroiado

 ara realizar este tio de ruebas#

Figura &

Dentro de los re"uerimientos b.sicos y condiciones deseables ara la realizaci+n de tareas,

se considera imrescindible contar con%

N Abundante suministro de agua de calidad adecuada ara culti5o, mantenimiento y

realizaci+n de ruebas#

N =nfraestructura de iluminaci+n adecuada ara los organismos, con .reas de traba:o y

de mantenimiento de culti5os con temeratura ambiente estable de &'&PC#

N Cada bioensayo re"uiere materiales, reacti5os y e"uios roios, seg?n el tio "ue

se trate, sin embargo e-isten algunos "ue son comunes como los "ue se mencionan a

continuaci+n#

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Figura L

ReactivosN *e recomienda utilizar reacti5os "ue cumlan los re"uerimientos establecidos

 or la American Chemical *ociety ara reacti5os analticos, grado AC*#

N 2os reacti5os emleados como t+-icos de referencia deber.n ser de uso

e-clusi5o ara la rearaci+n de una soluci+n atr+n, tener un grado de ureza

del //@ y referentemente contar con certificado#N 2a mayora de las ruebas de to-icidad y el mantenimiento de culti5os re"uiere

de agua 8io = 1A!KA, (//4#

()uipos:

 *e deber. contar necesariamente con los siguientes e"uios%

Balanza analtica#

Autocla5e o sistema de esterilizaci+n

Iedidor de K 1ocional, se uede reemlazar con tiras indicadoras4#

Iedidor de o-geno disuelto#

Iedidor de conducti5idad# Iicroscoio +tico con aumento de (''-#

Iaterial biol+gico#

Organismos de rueba#

Bombas ara acuario#

Controlador de temeratura ambiente 1e"uio de aire acondicionado u otro4#

!otenci+metro#

8ituladores ara dureza y alcalinidad#

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  Figura# Balanza analtica

  Figura#E Iedidor  

de K

Figura#) Iedidor de conducti5idad

Figura#0 Bombas ara acuario

*ateriales básicos *etales:  2os m.s utilizados son el

hierro y sus aleaciones, cobre, n"uel, latino, lata y lomo# Con estos metales

se fabrican soortes, inzas, anillos, trodes, tri.ngulos, re:illas, sacacorchos,

reciientes ara agua, crisoles, es.tulas, mecheros y electrodos, entre otros# Porcelana:  *e fabrican c.sulas, crisoles, na5ecillas, es.tulas, embudos,

tri.ngulos, mortero y il+n#

*adera: Gradillas, soortes de ie ara tubos y embudos#

!orc+o: *e usa rincialmente en la elaboraci+n de taones#

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!auc+o: !ara fabricar mangueras y taones#

Asbesto:  *e emlea en la fabricaci+n de mallas, guantes y como aislante

térmico#

Teflón: tilizado en la fabricaci+n de mangueras, 5.l5ulas, lla5es ara buretas,

reciientes, ema"ues entre otros#

$idrio: 9s uno de los materiales m.s usados en el laboratorio# A"uél "ue se

destina a la fabricaci+n de e"uio de laboratorio debe ser resistente a los .cidos

y a los .lcalis y resonder a determinadas e-igencias térmicas y mec.nicas# A"u

tenemos a los Bea;ers, tubo de ensayos, embudo de searaci+n, embudo

Buchner, bal+n de destilaci+n, bal+n 5olumétrico, robeta, erlenmeyer, ietas,

 buretas, robetas, luna de relo:, agitador#

*,todos de colecta de los organismos de ensayo

Asectos a considerar en la colecta de los organismos

N 9l organismo de rueba uede ser de una fuente natural o ro5enir de un laboratorio

certificado#

N 7o deben lle5ar lantas, desechos, mudas de otros organismos, arena o gra5a ya "ue

 ueden da$ar a los organismos#

N Al colectar el organismo, se debe transferir directamente a los de+sitos

 re5iamente rearados con agua del lugar de colecta, ara ser transortados#

 7o se deben colectar muchas esecies al mismo tiemo#

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N *e ueden emlear diferentes artes de catura 1atarraya, chinchorro, red de

 lancton, etc#4, deendiendo de la regi+n de muestreo y del tio de organismos "ue 5a a

ser caturado#

N 7o se debe de:ar mucho tiemo fuera del agua a los organismos#

N 2a temeratura, el K, o-geno disuelto 1OD4, alcalinidad, dureza y salinidad, deben

ser determinados en el sitio de colecta ara indicar la calidad del agua en la "ue los

organismos deben ser colocados en el laboratorio#

N *i los organismos son culti5ados en el laboratorio estos se maniular.n de acuerdo a

lo establecido or la técnica ara su culti5o y eclosi+n#

N 8ransorte de los organismos de rueba

N Durante su transorte los organismos deben 5igilarse cuidadosamente e5itando "ue

se resionen unos contra otros, ara "ue no se maltraten#

N *i 5an a ser transortados a largas distancias or barco se les debe acomodar en

ca:as donde uedan ser mane:ados#

N *i su transorte es en cami+n se deben acomodar en de+sitos grandes,

suministr.ndoles agua del .rea donde fueron colectados, aire.ndola y refresc.ndola en

5erano y calent.ndola en in5ierno, con el ro+sito de mantenerla a la temeratura

adecuada#

Aclimatación y alimentación

9l eriodo de aclimataci+n debe estar determinado or el tio de organismo# 2a

adataci+n ser. aulatina ara e5itar la muerte del organismo rueba# Durante este

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 erodo, deben hacerse insecciones frecuentes de la calidad del agua y ara determinar 

alguna conducta anormal, enfermedades, cambios en color o dificultad ara comer#

Tratamiento de enfermedades

N !ara reducir las enfermedades y, or consiguiente, la mortalidad, se deben

 roorcionar condiciones fa5orables de o-geno y mantener una temeratura adecuada#

N Durante la aclimataci+n de los organismos, se debe obser5ar si la esecie resenta

anomalas en su comortamiento, or lo "ue se roceder. a realizar un an.lisis

fisiol+gico os3mortem, sobre todo en esecies caturadas en el medio natural, como lo

es en osti+n, mar+n, eces etc#

(mpacado de peces

N Descartar los esecmenes da$ados# 2a5ar indi5idualmente cada esécimen en agua

de mar o agua dulce natural y limia 1seg?n sean esecies marinas o de agua dulce4#

N 95itar usar agua del grifo, ya "ue ueden contener metales#

N !esar y medir los organismos#

N Colocar cada esécimen en una bolsa de l.stico o bien en un ael de aluminio y

e-traer el aire# Cerciorarse de "ue las esinas de las aletas y las artes esinosas no

 erforen la bolsa de l.stico yo ael de aluminio#

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N Colocar la bolsa de l.stico yo ael de aluminio "ue contiene el animal en otra

 bolsa de l.stico y marcarle con una eti"ueta# 9nrollarla ara e-traer el aire y oner 

N una banda el.stica alrededor de la doble bolsa# De esta forma la eti"ueta se

mantendr. seca#

Colocar todas las bolsas "ue contienen esecmenes de la misma muestra en una gran

 bolsa de l.stico o en una ca:a, con una eti"ueta interna, trasladar en un congelador#

Figura# 9macado de un ez

*anual de laboratorio de Biotoxicologia

-.R*A/ %( /(01R2%A% PARA &A 1T2&23A!24- %(& (/PA!2. (-

PR5!T2!A/ %( &AB.RAT.R2.

N se bata de laboratorio ara cada r.ctica y no utilice calzado destaado

N se guantes, taaboca, lentes de rotecci+n, y m.scara con filtros, cuando se

re"uieran#

N 7o ietee con la boca, use un ieteado

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N 7o se lle5e los dedos a la boca, o:os o nariz, ni resire directamente sobre ning?n

reacti5o ues sus 5aores ueden ser t+-icos

N 7o ingiera alimentos o bebidas en el laboratorio

N 7o use durante las r.cticas anillos, cadenas, rendedores, ulseras o collares

N 7o deosite alimentos en las ne5eras, ni consuma el hielo "ue all se roduce

N 7o se admiten en el laboratorio ersonas "ue no estén caacitadas#

N 7o ubi"ue bolsos, tulas, maletines o a"uetes, en los lugares de traba:o

Figura#/ Adecuada 5estimenta ara laboratorio

1T2&23A!24- %( R(A!T2$./

N 8odo reacti5o rearado debe rotularse con el nombre del reacti5o, la ersona "ue lo

 rear+ y la fecha de rearaci+n

N 7o arro:e or los sumideros .cidos, bases o alg?n otro reacti5o, or fa5or 

deostelos en los reciientes de desecho

N 95ite derrames de sustancias en las mesas de traba:o, as se re5iene "ue alg?n

coma$ero se "ueme la iel o se deteriore la roa#

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N 7o arro:e al iso ning?n reacti5o

N 7o arro:e al iso aeles u otros elementos# !or fa5or utilice el reciiente ara la

 basura#

Figura#(' *imbologa ara reacti5os "umicos

 Especie para el bioensayo: Bardos Rosado (Puntius conchonius) (Hamilton, 1822)

9ntre los Barbos, uno de los géneros or e-celencia dentro de los acuarios de agua dulce, se

encuentra el Barbo rosado, un 5istoso ez gregario y sim.tico 1aun"ue de gran tama$o4

muy mantenido or los acuari+filos sin e-eriencia debido a su gran resistencia y

adatabilidad a todo tio de condiciones acu.ticas y de mantenimiento, siendo, adem.s,

uno de los menos agresi5os#

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!resentan el cuero fuertemente comrimido lateralmente, una boca algo m.s grande "ue

otros barbos, o:os de medio tama$o, escamas bien 5isibles, grandes y brillantes y aletas

cortas, rgidas y fuertes# Disonen de m?sculos bastante desarrollados ara nadar con

raidez a la hora de alimentarse o huir de cual"uier eligro, llegando a saltar hasta ' cm

 or encima del agua# Iediante cra selecti5a se ha obtenido una 5ariedad denominada 5elo

"ue disone de aletas desroorcionadas, udiendo ser la caudal m.s larga "ue el roio

cuero del ez# *u coloraci+n fuera de la éoca de cra es oco llamati5a y b.sicamente

consiste en un marr+n le5emente anaran:ado o rosado or todo el cuero 1aletas incluidas4

 resentando un ocelo negro a cada lado del ed?nculo caudal y una mancha negra en la

 unta suerior de la aleta dorsal, algo "ue s+lo resentan los machos# 9l dimorfismo se-ual

"ueda atente or el estilizado y menor cuero de los machos resecto a las hembras, "ue

suelen ser algo m.s grandes y con la zona 5entral le5emente abultada# Como ocurre con el

resto de Barbos, durante la freza e-hiben una 5istosa lbrea "ue en los machos consiste en

un intenso color ro:o rosado or todo el cuero, mientras "ue las hembras desarrollan un

color naran:a ro:izo muy 5istoso# Fuera de la éoca de freza ambos se-os resentan el

mismo color# !ueden llegar a medir &' cm y sobreasar los (' a$os de 5ida#

 7o son nada e-igentes con las condiciones de mantenimiento ni la comosici+n del agua,

adat.ndose sin ninguna dificultad a todo tio de aguas y resistiendo muy bien los errores

comunes de cuidado de algunos rinciiantes y las infecciones arasit.rias# 9l acuario debe

tener un 5olumen mnimo de &'' litros ara albergar a unos 0 eces adultos# 2a decoraci+n

debe consistir en abundantes lantas sumergidas, troncos y iedras ara facilitarles

escondites, as como un sustrato oscuro y una luz ténue "ue refuerza los colores de sus

lbreas# 9l mo5imiento intenso y la aireaci+n del agua son condiciones muy beneficiosas

 ara ellos# 9l K uede estar entre ),) y /,), la dureza entre ' y ' QdGK y la temeratura

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 uede 5ariar entre () y L' QC, siendo muy aconse:able filtrar con turba ara mantener el

agua .cida y blanda, "ue adem.s estimula su reroducci+n# *oortan hasta &'' m de

nitrato y hasta ) de nitrito y amonio ero no es nada aconse:able mantenerlos ba:o estas

concentraciones ara e5itar "ue, a la larga, uedan enfermar gra5emente al debilitarse su

sietema immunitario#

*on de los Barbos menos agresi5os siemre "ue se mantengan en amlios gruos y en

acuarios de gran tama$o# *i se mantienen ocos e:emlares o en acuarios muy e"ue$os la

emrenden a mordiscos contra todos sus coma$eros mostrando esecial referencia or

las aletas de 5elo y las filiformes# 7o es tamoco buena idea su asociaci+n con eces

demasiado lentos o tmidos ya "ue, aun"ue raramente los Barbos los atacan, la

hieracti5idad de estos uede estresarlos mucho haciendo "ue de:en de alimentarse# !eces

demasiado e"ue$os como los Rasboras !igmeos u otros "ue uedan entrar or su boca son

de5orados# !ueden ser asociados con otros Barbos, Algunos tetras temeramentales, eces

de fondo acti5os y algun Cclido de medio tama$o y no e-cesi5amente timido "ue ueda

mantenerlos a Raya#

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Figura((#Bardos Rosados

 Ecologa

i5en en densos card?menes en ros, arroyos y canales "ue atra5iesan los corazones de lassel5as del *ureste Asi.tico, rincialmente en a"uellos "ue cuentan con abundante

5egetaci+n sumergida "ue les roorciona abundantes escondites de sus deredadores,esecialmente de las a5es acu.ticas#

 !limentaci"n

No presentan ningun problema para alimentarse en el acuario,aceptando escamas, gránulos, vivos, congelados y lioflizados, siendomuy buscadas por estos peces las Artemia vivas y las larvas de

mosquito, tambien vivas. ambi!n se comen la "ruta, las verduras y elpan llegando a aceptar incluso trocitos de c#ocolate. $na proporci%n de&'(&' entre alimentos proteicos )escamas y gránulos gen!ricos, presasvivas, ...* y vegetales )+uisantes, escamas vegetales, pastillas depirulina* los mantiene sanos y radiantes durante toda su vida.

-/0/

Tabla 3. Normas y regulaciones para el plomo

Agencia Medio Nivel Comentarios

CDC Sangre 10 µg/dL Asesoría; nivel para manejo individual

OSHA Sangre 40 µg/dL

60 µg/dL

Regulación; causa para notiicación escrita !

e"amen m#dico

Regulación; causa para la remoción de la uente

de e"posición por ra$ones m#dicas

ACGH Sangre %0 µg/dL Asesoría; indica la e"posición en el &alor

'm(ral Límite )*L&+

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OSHA Aire )lugar de

tra(ajo+

,0 µg/m-

%0 µg/m-

Regulación; Límite de ."posición ermisi(le

).L+ de oras en promedio )2ndustria

general+

3ivel de acción

CDC!NOSH Aire )lugar de

tra(ajo+

100 µg/m- Límite de ."posición Recomendado R.L )no5

ejecuta(le+

ACGH Aire )lugar de

tra(ajo+

1,0 µg/m-

,0 µg/m-

uía &alor 'm(ral Límite *L&/*7A *iempo

romedio onderado para el arsenato de

plomo

uía *L&/*7A para otras ormas de plomo

"#A Aire

)am(iente+

081, µg/m- Regulación; .st9ndar 3acional de :alidad de

Aire Am(iental 3AAS; promedio de % meses

"#A Suelo

)residencial+

400 ppm

)9reas de

 juego+

1<00 ppm

)no juego+

uía an9lisis de plomo en suelo; re=uerimiento

aplica(le solamente a los pro!ectos inanciados

con ondos ederales )40 :>R arte ?4, <001+

"#A Agua )de

(e(ida+

1, µg/L

0 µg/L

3ivel de acción para suministros p@(licos

(jetivo 3o5ejecuta(le; (jetivo de 3ivel

B9"imo :ontaminante B:L

$DA :omida &arios 3iveles de acción para varios tipos de comida;por ejemplo las latas de comida =ue teníansoldadura con plomo ! =ue !a est9n proi(idas8

C#SC intura 600 ppm

)0806C+

Regulación; por peso seco8 Da! un nuevo la

norma de plomo para la jo!ería inantil8

Tabla"6

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*,todo

!ara realizar la rearaci+n del laboratorio de Bioto-icologia, se re"uiri+ de los

siguientes asos#

(# *e realiz+ un in5entario del 2aboratorio de Bioto-icologia de la Facultad de

Oceanografa, !es"uera, Ciencias Alimentarias y Acuicultura#

acuarios de L'-L'-0'

N L ietas de )ml ,(ml, '#(ml

N ( ieta roth de '#(mlN ( bagueta

N (bosa de alimento balanceado

N *al

N Declorador 

N erde de mala"uitaN Azul de metileno

N Ch control

N 2e:a oet

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N !robeta

N Algod+nN 2.mara de luz

N Cilindro con tubos

N Bolsa en fubus

N & termostatos de L'<aireador N Aireador &&'<0'hz

N Boyu 0' lmin

N &e-tencionesN & aireadores de iedra &'2 uno con

fusi+n y otro sin fusi+nN Bomba recirculante de agua

N ) iedras de o-igenaci+n

N CintaN (term+metro de mano

N L filtros ara airear 

N ( desarmador 

N ) baldes

N Acuario de L'-L'-L' con e"uioN Acuario de L'-'-))con

searacionesN ( acuario de 0'-L'-L'de 5idrio

Figura#(& 9"uio ara bioensayo

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&# 2uego del realizar el in5entario, se rocedi+ a limiar el laboratorio con escobas y

sacando el ol5o de las mesas#

L# *e la5+ los acuarios con la ayuda de una eson:a, seguidamente se sifone+ el

acuario, ara la llegada de la esecie a analizar#

Figura#(L 2legada de la esecie a analizar 

# 2uego, se ech+ agua en

los acuarios ya limios,

seguidamente se hecho el declorador#

Figura#( 2lenado de los acuarios

)# *e limio y ordeno los materiales del laboratorio ara el inicio del bioensayo#

Figura#() 2lenado

e imlementaci+n

de los acuarios

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0# !rearaci+n de la muestra atr+n

!ara hacer el bioensayo agudo de /0h se 5a a traba:ar con 0 acuarios de las siguientes

concentraciones 1', '#'(, '#(, (, (',&'4 m de una soluci+n de lomo#

E# Realizar los c.lculos corresondientes ara cada acuario considerando "ue la

soluci+n atr+n

C.lculos ara cantidad de ml de cada concentraci+n

C(-(SC&-&

C(-(SC&-&

# na 5ez concluido de haber agregado el reacti5o del lomo se agregar una cierta

cantidad de eces or acuario#

Figura#(0 *acando eces del acuario inicial ara transortarlos a cada acuario de diferente

concentraci+n de Arseniato de sodio

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Figura#(E !eces colocadas en un reciiente 

Figura#( bicaci+n de (' eces or acuario

/# Anotar la hora de inicio y hacer el

control de los ar.metros m.s

imortantes#

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Figura#(/ Iedici+n de K

 

Figura#&' Iedici+n de la temeratura

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#igura$21 %eri&icando el grado de acide' 

Figura#&& *acando el ez muerto

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  Figura 2 0edici%n de p3en todos los acuarios

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2nterpretación

Kubo una e"ue$a cantidad de mortalidad debido a "ue eran unas concentraci+n

casi otimas#

2os eces estaban estresados debido al to-ico diluido en el agua se noto or su

nado#

!onclusiones

2as cinco concentraciones 1m4 de nitrato de lomo, ro5ocaron letalidad y anomalas a

ni5el morfol+gico si es "ue se utiliza en el desarrollo embrionario delos eces# 2as

concentraciones de '#) m, ( m y L m de nitrato de lomo son dosis letales 1D2)'4,

mientras "ue las dosis de '#( m y '#') m son dosis subletales, demostrando "ue la

mortalidad est. relacionada con las dosis alicadas## 9l mayor n?mero de malformaciones

se resentaan en la dosis de ',') m1 PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA FACULTAD

 DE ESTUDIOS AMBIENTALES Y RURALES CARRERA DE ECOLOGÍA Bogotá D.C.),

e-licando este comortamiento debido al tiemo de e-osici+n al comuesto, y orcenta:e

de indi5iduos 5i5os y muertos durante el desarrollo embrionario# 9s robable "ue el nitrato

de lomo afecte +rganos 5itales# 2a mayora de las malformaciones roducidas or las

concentraciones de nitrato de lomo#

.bservaciones

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• *e 5io "ue los acuarios est.n en buenas condiciones, y atas ara la crianza de la

esecie a in5estigar#

• *e necesit+ abundante agua ara llenar los acuarios#

• Kubo mortalidad en la escera desués del bioensayo#

%iscusión

2os efectos t+-icos del nitrato de lomo se ueden e5idenciar inicialmente en la mortalidad

de los eces en cada una de las concentraciones 1m4, siendo esta relaci+n directa, es

decir, "ue a mayor concentraci+n, mayor n?mero de indi5iduos muertos# !osiblemente, este

comuesto, afecte de manera irre5ersible alg?n +rgano interno de los embriones, cuya

alteraci+n no se ueda obser5ar macrosc+icamente, y sea la causa de muerte# 2as

malformaciones "ue resentan los embriones de trucha arcoris, son ad"uiridas durante la

embriogénesis y reercuten en los estadios m.s a5anzados del desarrollo, causando

mortalidades 5ariables en los ale5ines 1Burgos, (///4, retardo del crecimiento arcial o

comleto, o una alteraci+n funcional 1*adler, (/04# 2os efectos teratogénicos del nitrato de

 lomo son innumerables, es tal su magnitud "ue debemos 5er m.s all. de una alteraci+n a

ni5el morfol+gico, uesto "ue est.n imlicados rocesos imortantes a ni5el molecular,

celular e histol+gico "ue influyen en el desarrollo del embri+n# 9ntre las rinciales

funciones biol+gicas "ue osee el hierro, est. el transorte y almacenamiento de o-geno a

tra5és de la hemoglobina, la cual es inhibida or el lomo al interferir con 5arios asos

enzim.ticos de la ruta del gruo hemo 1Boccio, &''L4# 9secficamente, el lomo inhibe la

enzima A2AD 1.cido deltaminole5ulnico deshidrasa4, "ue debe con5ertir el A2A 1.cido

deltaminole5ulnico4 en orfobilin+geno, y también inhibe la ferro"uelatasa, la cual cataliza

la inserci+n del hierro en la rotoorfirina =T, ara formar la hemoglobina 1Figura &(4#

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Como consecuencia de esto, se roduce una disminuci+n de la roducci+n de gl+bulos ro:os

1Bellot, *F4 y or 0 tanto, la ruta del o-igeno se 5e disminuida, raz+n "ue odra e-licar 

el retardo en el desarrollo encef.lico 1Iicrocefalia4 de los embriones de Oncorhynchus

2a alteraci+n del .cido deltaminole5ulnico 1A2A4 or acci+n del lomo en la sntesis de la

hemoglobina, e-licara la hiolasia encef.lica, ya "ue esta enzima al estar localizada en

la membrana interna de la mitocondria 1Iedina et al#, &'''4 ocasionara da$os en las

células del cerebro, interrumiéndose as su desarrollo# E 2as dosis ele5adas de lomo

 roducen encefaloata#

2os encéfalos resentan manifestaciones histoatol+gicas seme:antes a las descritas en la

encefaloata humana 1O!*, (/E/4, y los efectos se ueden e-licar atribuyéndolos a

retardo del desarrollo encef.lico 1Iichaelson, (/EL U >rigman et al#, (/E en O!*, (/E/4#

*e ha interretado "ue estos resultados indican un retardo de la maduraci+n encef.lica

1O!*, (/E/4# 2a microftalma identificada en los embriones de *almon coho

1Oncorhynchus ;isutch4 y *almon del atl.ntico 1*almo salar4, al estar e-uestos a los

antibi+ticos enroflo-acino y eritromicina, es causada or la inducci+n arcial del

mesén"uima encef.lico sobre la 5escula +tica durante su desarrollo 1Gonz.lez, &''4# De

igual manera, la deficiencia de 5itamina A ro5oca esta anomala en el o:o# 12o5ell, (//

en Gonz.lez, &''4# 9l lomo al tener una acci+n to-ica sobre la sntesis de hemoglobina,

afecta de manera directa los gl+bulos ro:os, incrementando la fragilidad de la membrana

eritrocitaria y su osterior rutura 1Osorio et al#, *F4# *e sabe "ue el lomo altera las

 aredes de los 5asos sanguneos, de tal modo "ue se hacen m.s ermeables, y las fugas del

l"uido causan edema 1Chisolm, (/E(en Child, (/)4# 9ste sucedo, e-licara las

hemorragias "ue resentaron algunos de los embriones de O# my;iss en la arte osterior 

de la esina dorsal y saco 5itelino# *e sabe "ue el calcio es un elemento esencial ara la

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formaci+n y funcionamiento de estructuras musculares y +seas en desarrollo de los

organismos#

 9l lomo interfiere con el metabolismo del calcio, remlaz.ndolo y comort.ndose como

un segundo mensa:ero intracelular, alterando la distribuci+n del mismo en los

comartimientos dentro de la célula 1*#O#*, *F4# 9ste comortamiento de cometencia del

 lomo con el calcio, uede e-licar las alteraciones a ni5el de columna "ue resentaron los

embriones 1escoliosis, cifosis y lordosis4 al estar e-uestos a las concentraciones de

nitrato de lomo# 2a 5itamina C 1.cido asc+rbico4 es necesaria ara el desarrollo del te:ido

conecti5o, hueso y cartlago, y en casos de deficiencia se roduce una cur5atura anormal de

la columna 5ertebral de los eces, caracterizada or escoliosis y lordosis en la trucha

arcoris 1Gonz.lez, &''4#

2a deficiencia de magnesio en trucha arcoris ro5oca alteraciones "ue incluyen reducci+n

de la tasa de crecimiento, cur5atura de la columna 5ertebral y degeneraci+n de las fibras

musculares 12o5ell, (// en Gonz.lez, &''4# 9n cuanto a las anormalidades resentes en

las aletas caudales se ueden relacionar con las malformaciones de la esina dorsal, ya "ue

estos +rganos est.n conectados# >assenar 1(/)E en Child, (/)4 obser5+ "ue el lomo

 roduce una interferencia a ni5el de cadena alfa# 2os disturbios a ni5el cromos+mico

 odran e-licar en arte la reabsorci+n "ue ocurre en las células de las aletas caudales

mediante robables blo"ueos enzim.ticos causados or los cambios genéticos#

 9l lomo act?a como mit+geno, estimula la roliferaci+n celular, acti5ando la se$al de

transducci+n de la rotena "uinasa C 1!CV4 1Reetto, et al#, &''/4, "ue es una enzima

deendiente del calcio 5inculada con el crecimiento y la diferenciaci+n celular, y la

conser5aci+n de la barrera hematoencef.lica 1Iatte, &''L4# Como consecuencia, se

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 roduce aumento de la di5isi+n celular e hierlasia 1Reetto, et al#, &''/4, con lo "ue se

e-licara el aumento en el cristalino de los embriones#

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