PRACTICA N 3 CINTICA DE LA PRODUCCIN DE METABOLITOS

tiempo(h)

DO (600nm biomasa)

DO(500nm glucosa)

DO (550 nm)Actividad enzimatica

endo exo

0 0,46 0,209 0,092 0,169

2 0,48 0,084 0,348 0,295

3 0,59 0,08 0,38 0,309

4 0,665 0,077 0,403 0,31

5 0,672 0,075 0,484 0,15

24 0,67 0,063 0,721 0,352

tiempo(h) X(g/L)

BIOMASA S(g/L)

GLUCOSA P

UAE(END Y EXO)

0 1,089 0,3938 185,55

2 1,16 0,0326 798,72

3 1,55 0,0211 872,55

4 1,816 0,0124 911,08

5 1,841 0,0066 784,27

24 1,834 0,0000 1488,92

0

0,2

0,4

0,6

0,8

1

1,2

1,4

1,6

1,8

2

0 5 10 15 20 25 30

X(G

/L)

(H)

X(g/L)

y = 40,038x + 586,61

tiempo(h) X(g/L) S(g/L) rx rs u 1/s 1/u rs/x

0 1,089 0,3938 2,539

2 1,16 0,0326 0,154 0,124 0,132 30,629 7,549 0,132

3 1,55 0,0211 0,328 0,010 0,212 47,412 4,726 0,212

4 1,816 0,0124 0,146 0,007 0,080 80,491 12,481 0,080

5 1,841 0,0066 0,001 0,001 0,000 150,483 2045,556 0,000

24 1,834 0,0000

0,000 0,000

0,00

200,00

400,00

600,00

800,00

1000,00

1200,00

1400,00

1600,00

0 5 10 15 20 25 30

PU

AE(

END

Y E

XO

)

(H)

0,00000,0500

0,1000

0,1500

0,20000,2500

0,3000

0,3500

0,4000

0,4500

0 5 10 15 20 25 30

S(g/

L)

(h)

y = 0,1422x + 0,0144R = 0,0595

0

0,02

0,04

0,06

0,08

0,1

0,12

0 0,1 0,2 0,3

rs/x

u

rs/x

Lineal (rs/x)

y = 17,7x - 849,82R = 0,8491

-500

0

500

1000

1500

2000

2500

0,000 50,000 100,000 150,000 200,000

1/u

1/s

MTODOS

MTODOS DE ANLISIS

X: Materia seca S: Realizado con el reactivo DNS 1.- sal rochelle 40% 2.- o.5ml Rx Ebullicin LECTURA 550nm 5min 3ml DNS 1ml sal Rochelle H20 15ml P: Determinacin de la actividad enzimtica de la invertasa: Mezclar con 5ml de solucin 1 ml solucin enzimtica Buffer acetado 0.1 M pH = Sacarosa 4%

Incubacin 50C x 10 min

Inactivacin ebullicin 100C x 2 min

Luego mediremos la cantidad de azucares reductores por el mtodo DNS.

PROCEDIMIENTO:

Preparacin del pre cultivo: Levadura (saccharomyces cerevisiae) con un medio adecuado en 30C x 24 horas Preparacin de la curva de produccin de biomasa , consumo de sustrato (glucosa ) y produccin de invertasa vs tiempo.

t = 0 t = 2 t = 2 t = 3 t = 4 t = 5 t = 6 t = 7 t = 8 t = 10 t = 24 t=48 Llenar 20ml Medio de cultivo

Esterilizado

Inocular con 5% pre- cultivo

Incubacin cada cierto tiempo ser sacado un earlenmeyer

Centrifugacin

Sobrenadant

Sobrenadante

Precipitado Enrasar a vol. conocido con sol. buffer 20ml LECTURA D.O. 600nm.

1.-DNS 2.-Actividad enzimatica