CITOLOGIA DE MASAS

MATERIALES QUE SE DEBEN TENER

Tinción Diff Quick (tres frascos: alcohol, eosina y azul metileno)

Tres frascos de vidrio porta placas

Un caja de porta objetos

Una caja de cubre objetos

Una bandeja para teñir

Papel absorbente

Hisopado – raspados – jeringa con tejidos

Paciente tranquilo o sedado

Rasuradora

Ecógrafo, si es necesario

Asistente entrenado

TUMORES MALIGNOS

Carcinomas. Estos cánceres se originan en el epitelio que es el recubrimiento de las células de un órgano. Los carcinomas constituyen el tipo más común de cáncer. Lugares comunes de carcinomas son la piel, la boca, el pulmón, los senos, el estómago, el cáncer de colon y el útero.

Sarcomas. Los sarcomas son cánceres del tejido conectivo y de sostén (tejidos blandos) de todos los tipos. Los sarcomas se encuentran en cualquier parte del cuerpo y frecuentemente forman crecimientos secundarios en los pulmones.

Gliomas. Son cánceres del cerebro o la médula espinal producidos por neoplasias en las células gliales.

Teratoma inmaduro. Cáncer embrionario.

Tumor maligno o benigno?

Característica Benigno Maligno

Diferenciación Las células tumorales se asemejana las células maduras originales

Las células tumorales tal vez no seasemejan a las células madurasoriginales

Tasa de crecimiento

Lenta; puede interrumpirse oretroceder

Rápida, autónoma; generalmenteno interrumpe o retrocede

Tipo de crecimiento

Se expande y desplaza Invade, destruye y reemplaza

Metástasis No Sí

Efecto en la salud

Generalmente no ocasiona lamuerte

Puede ocasionar la muerte si no sediagnostica y suministra tratamiento

OBTENCION,

ACONDICIONAMIENTO Y ENVIO

DE MUESTRAS

PROCEDIMIENTO PARA LA TOMA DE MUESTRA

Rasurar perfectamente la zona afectada (5cm alrededor)

Embrocar adecuadamente

Sujetar el tumor e inmovilizarlo

Pinchar repetidamente la zona

Aspirar un poco

Sacar la aguja

Depositar el contenido sobre un porta objeto

TECNICA PARA CITOLOGÍA EN LABORATORIO

Realizar la impronta o raspado en un porta

Dejarlo secar por un minuto

Sumergir en el alcohol por 60 segundos frasco 1

Sumergir en eosina por 60 segundos frasco 2

Sumergir en el azul por 30 segundos frasco 3

Dejar secar al ambiente y observar

Una vez que se obtiene las células, hay que extender la muestra en un portaobjetos (lámina de vidrio). Luego se deja secar al aire, se fija con un alcohol y se tiñe. Ahora la muestra está preparada para verla al microscopio.

La citología permite diferenciar un tumor de una inflamación o de una hemorragia de manera rápida y con pocos efectos adversos. Normalmente no se usa para dar un diagnóstico definitivo, no le da nombre a un tumor, pero nos orienta sobre el tipo y malignidad de la lesión.

Para tener un diagnóstico exacto (tumor con “nombre y apellidos”) será necesario recurrir a la BIOPSIA tomando un trozo de tejido de la lesión y mandándolo a un laboratorio especial para estudio histopatológico.

Tumor significa aumento de tamaño y es un signo de la tétrada de la inflamación, mientras no se tenga la certeza de su comportamiento celular nuclear no se puede decir que existe cáncer.

ORIGEN DE LOS TUMORES

Las físicas: Rayos x, rayos gamma, rayos Uv, ultrasónicos, celulares, sol.

Químicas: órgano clorados, órgano fosforados, petróleo, benceno, mecánicas aceites quemados, tabaquismo,

Genético: causa de herencia o predisposición por poseer genes responsables de diversos cánceres, aumenta la recurrencia con la consanguinidad.

Biológicos: virus, bacterias, inflamación crónica. Enfermedades venéreas, falta de ejercicio.

En la nutrición: malos hábitos, triglicéridos, falta de fibra.

NOMBRES DE TUMORES

Papiloma: masa más protuberante en la piel (por ejemplo, un quiste).

Adenoma: tumor que crece en las glándulas y en torno a las mismas.

Lipoma: tumor en un tejido adiposo.

Osteoma: tumor de origen en el hueso.

Mioma: tumor del tejido muscular.

Angioma: tumor compuesto generalmente de pequeños vasos sanguíneos o linfáticos (por ejemplo, una marca de nacimiento).

Nevus: pequeño tumor cutáneo de una variedad de tejidos (por ejemplo, un lunar).

Teratoma maduro: alteración de las células fetales.

Tumor de Warthin: hiperplasia quística especialmente de la glándula parótida.

FIJACIÓN.

Su principal objetivo es conservar el detalle morfológico de la células en el estado lo más parecido posible a la célula en el tejido vivo. Esto se consigue con fijadores que deshidratan las células, inactivan los enzimas autolíticas, coagulan las proteínas y penetran en la membrana celular.

Es un paso indispensable si no queremos una extensión deteriorada u oxidada que no tome bien los colorantes y que no permita una correcta lectura cuando se estudia al microscopio.

La fijación debe realizarse de inmediato a la toma y la extensión del material citológico cuando la preparación esté todavía húmeda.

No existe el fijador perfecto, todos causan contracción celular y cada uno actúa con una velocidad diferente.

CONCIDERACIONES PARA ENCONTRAR CANCER

CAMBIOS EN LA FORMA, TAMAÑO Y COLOR CELULAR

Aumento del tamaño: hiperplasia, la forma celular normal se transforma y pierde integridad.

Hipercromasia, las células cáncer, generalmente son más azules en su interior porque tienen mayor actividad nuclear.

CAMBIOS EN LA PARED CELULAR

La membrana celular tiende a desaparecer o es muy fina

CAMBIOS EN EL NÚCLEO

Anisocariosis: variación en el tamaño del núcleo celular.

Macrocariosis: aumento

Microcariosis: disminución

Mitosis aberrante: división exagerada

CITOLOGIA VAGINAL

CÁTEDRA DE PATOLOGÍA CLÍNICA

Las muestras deben tomarse introduciendo un hisopo de algodón humedecido en solución fisiológica o una espátula. Puede también utilizarse un dedo enguantado sin lubricar, de ésta manera se obtiene mayor cantidad de células y menos distorsionadas.

Se penetra por la comisura superior de la vulva,evitando la fosa del clítoris, la cual no refleja loscambios cíclicos hormonales y cuyas célulasqueratinizadas podrían confundirse con célulasepiteliales superficiales obtenidas de la vagina deuna perra en estro.

Se puede utilizar también una pipeta con perilla de goma cargada con solución fisiológica estéril en el interior de la vagina.

Se realiza un lavado y aspiración reiterados con la solución salina.

La desventaja es que a menudo se distorsiona la morfología celular.

El material obtenido por cualquiera de las técnicas mencionadas se extiende suavemente sobre un portaobjetos limpio, seco y desengrasado. Si se presiona con demasiada firmeza o se frota el material contra el vidrio, el frotis carece de valor diagnóstico

Una vez realizado el extendido se sumerge una o dos vez en metanol al 95% se fija con spray de cabello o se deja secar al aire. La tinción puede hacerse inmediatamente o en días posteriores.

TINCIONES MAS FRECUENTES

Coloraciones de laboratorio

Nuevo azul de metileno: (New Methylene Blue)

Colorante New Methylene Blue 500 mg, agua destilada 100ml formol puro 1 ml.

Se coloca una pequeña gota de la solución colorante sobre un cubreobjetos se monta sobre el preparado y ya está listo para su observación.

DIFF QUICK

Es un colorante de Wrigth-Giemsa de fácil uso. Recomendable para uso clínico rutinario. Los preparados deben ser sumergidos en metanol y dos soluciones colorantes.

Se ha recomendado que los frotis vaginales sean sumergidos en las dos soluciones colorantes más tiempo que el periodo normalmente necesario

La evaluación diaria de las celulas del epitelio vaginal exfoliado es de ayuda para identificar los diversos estadios del ciclo estral canino y determinar el momento en que se debe comenzar a presentar la hembra al macho para servicio

Anestro – proestro – estro - diestro

Durante el proestro las concentraciones periféricas de estrógeno plasmático se incrementan y causan el engrosamiento de la mucosa vaginal y aumento en el número de capas celulares.

La mucosa cambia de un epitelio bajo cuboidal a un epitelio estratificado queratinizado y escamoso.

Anestro proestro estro diestro

TIPOS CELULARES

Una típica placa de anestro tiene células epiteliales inmaduras y solamente linfocitos y neutrófilos descamados.

CELULAS BASALES

Son las células que se encuentran sobre la membrana basal, no se exfolian y por lo tanto rara vez se observan en los frotis. Son células pequeñas redondeadas y con escaso citoplasma

CELULAS PARABASALES

Son las células más pequeñas normalmente vistas en un extendido. Son redondeadas con núcleo también redondo y poseen la relación núcleo citoplasma más grande que todas las células exfoliadas

PROESTRUS

PROESTRO MEDIO

CELULAS INTERMEDIAS

Más grandes que las células parabasales hasta el doble de su tamaño.

Debido a esto se las divide en células intermedias pequeñas y grandes, con un citoplasma relativamente mayor y núcleo más pequeño.

PROESTRO MEDIO

CELULAS SUPERFICIALES

Son las células más grandes de los extendidos. Sus núcleos si están presentes son picnóticos. Los bordes celulares son angulados y están generalmente doblados.

Superficiales

Se caracterizan por no tener núcleo visible o un remanente nuclear picnótico débil o pequeño.

ESTRO TEMPRANO

Las células epiteliales son todas no cornificadas, parabasales y basales e intermediarias

Las células epiteliales intermediarias aparecen el segundo y tercer día

Los eritrocitos son numerosos y gradualmente disminuyen en número.

Los leucocitos desaparecen en los últimos días del proestro

La vulva se muestra turgente

Una tipica placa de estro demostrando las células epiteliales cornificadassuperficiales con núcleo picnótico. Notese el fondo muy limpio. No hay neutrofilos. Las células epiteliales pueden tener numerosas bacterias en su superficie..

ESTRO

estro

estro

Una placa de diestro contiene un marcado incremento en los neutrófilos y en las células epiteliales inmaduras. Los eritrocitos pueden estar o no presentes

DIESTRO

USOS DE LA CV.

CITOLOGIA VAGINAL EN PROCESOS

PATOLOGICOS

La citología vaginal puede ser de utilidad para el diagnóstico presuntivo de diversas entidades patológicas. Entre ellas pueden citarse:

OVH con ovario:

• en una perra castrada junto a la aparición cíclica post castración de la descarga vulvarsanguinolenta sugiere la presencia de tejido ovárico.

Procesos infecciosos:

• agudos hay un predominio de neutrófilosdegenerados con bacterias en su citoplasma mientras que en los crónicos predominan los macrófagos y los linfocitos en extendidos vaginales

Neoplasias genito-urinario:

TVT se reconoce por que se descama fácilmente

La CV no orienta con respecto a la localización anatómica de la infección

Es importante destacar que la cv no es de utilidad en el diagnostico de la ovulación ni de gestación

Gracias