EVALUACIN DE AGENTES BIOLGICOS

Ing. Vctor Bravo M.Ing. Marcelo castilloIng. Cristian LenIng. Edwin Daz

Escuela Politcnica NacionalLadrn de Guevara E11-253Facultad de Ingeniera Mecnica Maestra en Sistemas AutomotricesQuito Ecuador

OBJETIVO GENERAL:

Identificar los distintos mtodos de evaluar los agentes biolgicos en lugares de trabajo

OBJETIVOS ESPECIFICOS:

Estudiar los diferentes mtodos de evaluacin de los riesgos biolgicos Hallar un valor mximo tolerable de accin biolgica y el lmite de exposicin

1.IDENTIFICACIN Y EVALUACIN DE AGENTES BIOLGICOS EN LOS LUGARES DE TRABAJO

La investigacin de la exposicin a agentes biolgicos en el lugar de trabajo puede ser relativamente simple si se conoce la naturaleza de los mismos, o muy compleja en especial para aquellas actividades en las que la exposicin a dichos agentes no se produce de forma intencionada como sera el caso de la agricultura, trabajos en unidades de eliminacin de residuos, tratamiento de aguas residuales,ya que pueden formarse mezclas complejas de diferentes microorganismos. En estos casos el procedimiento a seguir para la identificacin de los mismos podra efectuarse utilizando el estudio de indicadores que, de forma gradual (de globales a individuales), pongan de manifiesto la exposicin a agentes biolgicos: Indicadores globales (IGL), por ejemplo: recuento total de bacterias u hongos/levaduras, viables o totales que, mediante determinaciones analticas sencillas y poco costosas, dan idea de la carga microbiolgica total, permitiendo en su caso la identificacin de agentes biolgicos. Indicadores de grupo (IGR), por ejemplo: endotoxinas, enterobacterias, actinomycetes como grupos homogneos de agentes biolgicos y/o productos derivados de los mismos. Indicadores especficos (IES), para lugares de trabajo o tareas concretas est indicado el estudio de agentes biolgicos o familias especficas directamente relacionadas con los ya citados lugares investigados. Indicadores individuales (IIN), para problemas especficos que se hayan encontrado en relacin con agentes biolgicos concretos puede establecerse, cuando ello sea posible, una investigacin de especies individuales, por ejemplo Pseudomona aeruginosa.

En la Tabla adjunta se recoge, a modo de ejemplo, un listado de las actividades laborales y los parmetros de medicin a examinar.

ACTIVIDAD LABORALPOSIBLES INDICADORES ESTUDIADOS

Plantas de clasificacin de residuos slidos/ compostajeIGL: Bacterias /hongos y levaduras Bacterias;IGR: Gram (+), Gram (-), Endotoxinas; Bacterias formadoras de esporas; Actinomycetes;IIN: Aspergillus fumigatus;

Plantas de tratamiento de aguas residualesIGL: Bacterias;

IGR: Bacterias Gram (+), Endotoxinas; IIN: Leptospira interrogans, E. Coli

Eliminacin de residuosIGL: Bacterias, Hongos;

IGR: Bacterias (aerobias y anaerobias)

BiotecnologaIIN: Agentes biolgicos especficos del proceso, p. ej.:

Productos farmacuticos y biolgicos: E. coli k-12Cephalosporium spp.; Streptornyces spp.; Cultivos celulares de ovario de hamster; Penicillium crysogenum Bebidas alcohlicas: Saccharomyces cerevisae; S. OvariumEnzimas industriales: Bacillus licheniformis; Bacillus subtilus; A. oryzae; Mucor spp. Rhizopus spp.; Clostridium spp.Alimentos: Streptococcus termophilus; Lactobacillus bulgaricus; Penicillium roqaeforti;

P. camembertii; Propionobacterium shermanii

Mantenimiento sistemas de acondicionamiento de aire / humidificadores / torresIGL: Bacterias, Hongos;

IGR: Actinomycetes, Pseudomonas, Endotoxinas;

IIN: Legionella pneumophila; Grmenes especficos (filtros);

Tratamiento de metales (fluidos de corte)IGL: Bacterias; I-tongos, Levaduras; IGR: Enterobacteriaceas; Endotoxinas; IES: Pseudomonas;

Descontaminacin De suelosIGR: Bacterias Gram (+) y Gram (-); IES: Pseudomonas, Nocardia spp.

Ventas al por mayor/almacenesIGL: Hongos;

IGR: Actinomycetes;

Industria forestalIIIN: Ag. Biolgicos origen de patologas especficas p. ej.:

Amebiasis (Entamoeba histolyticum)

Leptospirosis (Leptospyra spp.)

Ornitosis (Chlamydia psitacci)

Tularemia (Franciscella tularensis)

...

Produccin de alimentosIGL: Bacterias; Hongos; Levaduras; IES: Staphylococcus spp.; Coliformes IGL: Bacterias; Hongos/ Levaduras;IIN: Patgenos causantes de enfermedades:

Manipuladores de animalesAntrax; Brucelosis; Criptosporidosis; Ectima contagiosa; Erisipeloide; Hidatosis, Leptospirosis, Psitacosis; Rabia; Salmonelosis; Tinea capitis; Triquinosis; Tuberculosis; Tularemia

Cuidado de la saludIGL: Bacterias; Hongos/ Levaduras;

IES: Grmenes infecciosos: - Klebsiella spp.; Micobacterias; Legionella spp...

Fuete: http://www.ehu.es/documents/2458096/2577739/apendice_03.pdf

El estudio de los posibles indicadores propuestos para la evaluacin de los riesgos asociados a agentes biolgicos implicar, como paso previo, una toma de muestra de los mismos bien para su determinacin directa como bioaerosoles, bien como contaminantes superficiales o para la medida cuantitativa de productos, componentes o metabolitos de los agentes biolgicos cuya concentracin sea representativa de la carga biolgica global a valorar.

Se pueden tomar por lo tanto tres opciones para la medida de agentes biolgicos:

Mtodos que van a poner de manifiesto el nmero total de agentes y/o el nmero de microorganismos cultivables, entendiendo como tales aquellos capaces de formar colonias en un medio de cultivo adecuado. Mtodos que ponen de manifiesto la presencia de elementos celulares provenientes de los agentes biolgicos como pueden ser, por ejemplo, las endotoxinas y glucanos Mtodos que cuantifican metabolitos tanto primarios (por ejemplo: ATP), como secundarios (por ejemplo: micotoxinas), que pueden servir de marcadores de la actividad vital de los agentes biolgicos, o encontrarse en los bioaerosoles muestreados.

La limitacin de la metodologa propuesta est en que, en la actualidad, no se disponen de datos suficientes para establecer de forma fiable relaciones dosisefecto/respuesta para los bioaerosoles, de modo similar al establecido para los agentes qumicos, por lo que no es posible el establecimiento de valores lmite ambientales que sirvan como criterio de referencia en la misma lnea que para los agentes qumicos (VLA, TLV). Para el caso de las endotoxinas s hay valores de referencia orientativosA pesar de estas limitaciones consideramos de gran utilidad este tipo de estudios ya que, adems de dar informacin sobre la naturaleza de los agentes biolgicos (Anexo II), posibilitan el estudio de situaciones especficas o la comparacin de stas, por ejemplo antes y despus de la aparicin de quejas o patologas, comparacin de dos sistemas de limpieza, efectividad de un desinfectante, repercusin de un cambio en el proceso productivo, repercusin de factores fsicos, identificacin de focos de contaminacin, etc

2.MTODOS PARA EL MUESTREO DE AGENTES BIOLGICOS CULTIVABLES Y/O TOTALES

Estn proyectados para determinar la fuente, cantidad e identificacin de agentes biolgicos transmitidos fundamentalmente por va areaEstn basados en la toma, recuperacin y subsiguiente cultivo de microorganismos. Estos mtodos pueden ser clasificados de acuerdo con el procedimiento de toma de muestra o el manejo de la muestra tomada, e incluyen: gravitacin, impactacin, centrifugacin, burbujeo y filtracin.

2.1 Gravitacin o impactacin natural

Es la forma ms simple de toma de muestra de bioaerosoles, en la cual las partculas biolgicas aerotransportadas son recogidas sobre una superficie adherente (agar en una placa Petri o recubriendo un portaobjetos, placas RODAC,) por su capacidad de sedimentar por gravedad. Es un mtodo econmico, que no necesita equipos auxiliares, si bien ha de tenerse especial cuidado en donde se colocan dichas placas para evitar corrientes de aire. Las partculas de mayor tamao pueden estar sobrerepresentadas. Este mtodo no es cuantitativo, es decir, la muestra no se toma a partir de un volumen conocido de aire, por lo que las pruebas de intercomparacin son dificultosas. Es un procedimiento til para estudios iniciales y para la estimacin aproximada de la carga microbiolgica tanto desde el punto de vista cuantitativo como cualitativo, si se eligen adecuadamente los medios de cultivo

2.2 Impactacin:

El aire, aspirado por una bomba de vaco que forma parte del muestreador, pasa a travs de un orificio y es dirigido a la superficie del medio de cultivo contenido en una placa adecuada. Las partculas con suficiente momento de inercia abandonan la corriente e impactan sobre la superficie. El orificio de entrada puede consistir en una rendija o en un cabezal con un elevado nmero de orificios de igual dimetro y el medio de recogida puede ser agar sobre una placa Petri, RODAC o un portaobjetos El caudal de aspiracin vara en el rango de 10 a 180 L/minUna vez tomada la muestra, y segn sea la naturaleza de los agentes biolgicos a determinar, la placa se incuba a la temperatura adecuada, producindose el crecimiento de dichos agentes mediante la formacin de una colonia en el punto de impacto. Posteriormente se procede al recuento de dichas colonias y al clculo de su nmero referido a un volumen fijo de aire de 1m3, a partir de las colonias encontradas en el volumen de aire muestreado, expresndose los resultados habitualmente como ufc/m3 (unidades formadoras de colonias en un metro cbico de aire).La identificacin especfica del agente biolgico supone habitualmente que se proceda a su resiembra, en medio idneo, y la posterior aplicacin de reacciones de identificacin o estudios por morfologa directa o tinciones especficas

2.3. Centrifugacin:Estos muestreadores de impactacin utilizan la fuerza centrfuga para ayudar a la separacin de las partculas de la corriente de aire de aspiracin. Operan creando un remolino en el cual las partculas con suficiente inercia dejan la corriente de aire para impactar sobre la superficie (medio de cultivo) de recogida.

En el RCS Biotest se recoge el aire contra una tira de plstico que soporta una fina capa del medio agar en el cual impactan las partculas aerotransportadas.

Opera a un flujo de 40 L/min.Todos los mtodos descritos hasta ahora slo dan informacin de los agentes biolgicos cultivables, es decir, con capacidad de reproducirse.

En un entorno laboral se est potencialmente sujeto a la exposicin a microorganismos (cultivables, viables, no viables, que pueden producir tambin riesgos txicos o alergnicos; formas de supervivencia, como esporas), sus componentes biolgicamente activos o productos derivados de dichos microorganismos. Interesa por lo tanto la posibilidad de utilizar mtodos de muestreo ms generales que permitan obtener una informacin ms amplia.

Entre estos mtodos que permiten la medida de agentes biolgicos totales destacan los de burbujeo o impinger y de filtracin.

2.4 Burbujeo o impinger:

El aire a muestrear pasa a travs de un volumen conocido de lquido (suero salino, agua de peptona con agentes humectantes, medios lquidos). Las partculas abandonan la corriente de aire por impactacin en el lquido, quedando retenidas en el mismo. Posteriormente, y en el medio de cultivo adecuado, se transfiere una alcuota del lquido de captacin, procedindose a su cultivo, recuento y en su caso a su identificacin (viables o cultivables) (1).

A otra alcuota se adiciona naranja de acridina y se filtra, procedindose al recuento total (viable y no viable) por microscopa de epifluorescencia directamente sobre el filtro.

La mayora de los muestreadores estn construidos en vidrio, con una cmara simple de coleccin; por ejemplo, el AGI-30 opera a 12.5L/min. Y el Mini-impinger a 1L/min.

2.5 Filtracin:

El aire es aspirado a travs de un medio de filtracin en el cual las partculas se depositan.Su flujo es funcin del tipo de filtro, su tamao y de la bomba de aspiracin, oscilando habitualmente entre 1-500L/min. El tipo de filtro ms utilizado es el de membrana de policarbonato ya que las partculas pueden ser removidas fcilmente de su superficie por agitacin en lquidos adecuados, procedindose a la posterior inoculacin de la suspensin formada en los medios de cultivos especficos (2).

Un procedimiento similar es aplicable a la cuantificacin e identificacin de agentes biolgicos presentes en muestras de polvo. Un peso conocido del mismo se extrae adecuadamente por agitacin vigorosa con suero salino conteniendo 0.01% de Tween 80. Posteriormente se inocula un volumen conocido en medios de cultivos especficos, procedindose a su posterior recuento, expresado como ufc/g, y, en su caso, identificacin.

3.MUESTREO DE SUPERFICIES

Adems del muestreo areo, puede tambin determinarse el nmero de agentes biolgicos depositados en una superficie. Este tipo de muestreo es utilizado fundamentalmente en estudios de higiene alimentaria, pero tiene otras aplicaciones como, por ejemplo, comprobar la eficacia de los productos de desinfeccin o evaluar la presencia de agentes biolgicos en el interior de los conductos de aire de un sistema de ventilacin/climatizacin, industria de la piel y cuero.La toma de muestras se hace fundamentalmente mediante el empleo de torundas o por contacto directo de la superficie a muestrear con una placa RODAC preparada con el medio de cultivo adecuado y su posterior incubacin e identificacin, en su caso.

4.MTODOS QUE PONEN DE MANIFIESTO LA PRESENCIA DE ELEMENTOS CELULARES

Estos mtodos dan cuenta de elementos celulares de microorganismos tanto viables como no viables o desintegrados, constituyentes de su estructura celular que pueden menoscabar la salud del personal expuesto.

Entre estos elementos celulares cabe destacar las endotoxinas, glucanos y ergosterol.

4.1 Endotoxinas:

Son polisacridos termoestables de alto peso molecular (LPS), formados por un componente lipdico caracterstico, lpido A, unido covalentemente a un polisacrido. Las endotoxinas son componentes integrales de la membrana exterior de las bacterias Gramnegativas. La presencia de endotoxinas se relaciona con la posibilidad de reacciones txicas, procesos inflamatorios muy intensos, fiebre, bronquitis. Desde el punto de vista de enfermedades relacionadas con el trabajo slo las endotoxinas aerotransportadas son relevantes. Se producen en el manejo de material orgnico. Los materiales contaminados por bacterias y las heces de animales son las fuentes principales de polvo que contribuir a la liberacin de endotoxinas.

La agricultura y las industrias relacionadas proporcionan las fuentes de exposicin profesional ms habituales: granjas de cerdos, pollos, vacas y caballos; industrias del algodn; procesado de la patata, caa azucarera, cerveza; mataderos de aves; tratamiento de aguas residuales, basuras y compostaje; sistema de humidificacin de aire de edificios y procesos industriales con reciclaje de agua; emulsiones formadas en los fluidos de corte en metalurgia,

El grupo CEN/TC/WG 5 est en fase de normalizacin del mtodo analtico para la cuantificacin de endotoxinas. Se basa en la activacin que las endotoxinas producen en una enzima de la coagulacin presente en el lisado del amebocito del cangrejo Limulus polyphemus (mtodo LAL).Dicha enzima se hace actuar sobre un sustrato coloreado, midindose espectrofotomtricamente la liberacin de los productos formados.En la actualidad se admite un lmite mximo de exposicin profesional a endotoxinas de 200 ng/m3.

Se han desarrollado mtodos qumicos alternativos para la medida de endotoxinas, basados en la determinacin de LPS por cromatografa en fase gaseosaespectrometra de masas (3).

Anlogamente se ha descrito la posibilidad de determinar el cido murmico como marcador qumico de pptidoglicanos, presentes fundamentalmente en la pared celular de bacterias Grampositivas (4).

4.2 Glucanos [(1-> 3)-D Glucano]

Es otro biomarcador de la contaminacin fngica en aire. Es un componente de la pared celular de todos los hongos filamentosos y se le considera como la posible causa de enfermedades respiratorias, especialmente enfermedades crnicas relacionadas con la exposicin a polvos orgnicos.

El mtodo analtico implica la toma de muestras de aire sobre filtros de acetato de celulosa (5) posterior anlisis utilizando el mtodo del LAL (6) (Lisado del Amebocito del Limulus)

4.3 Ergosterol:

Es utilizado como un marcador qumico en aire de la contaminacin por hongos, al ser uno de los componentes qumicos fundamentales de la membrana de los principales hongos saprofitos. Su determinacin se lleva a cabo por mtodos cromatogrficos, previa extraccin de los filtros de policarbonato en donde se toman las muestras ambientales (7).

5.MTODOS DE CUANTIFICACIN DE METABOLITOS

Otra alternativa para la medida de agentes biolgicos es la cuantificacin de sustancias procedentes de los mismos. Esto puede ser aplicable cuando haya un mtodo fiable de toma de muestra y anlisis y cuando la concentracin de analito sea proporcional a la carga microbiolgica. Entre estas opciones de medida se pueden contemplar los metabolitos pri marios, como por ejemplo el anlisis del Adenosin trifosfato (ATP) que puede servir de marcador para los microorganismos o su actividad vital, y metabolitos secundarios como, por ejemplo, las micotoxinas que pueden encontrarse en los bioaerosoles.

5.1 Anlisis de ATP:

El anlisis de los niveles de ATP en las muestras es rpido e indicativo del metabolismo de la actividad microbiana. Existe una relacin entre los niveles de ATP y el nmero de agentes microbianos, por lo que este mtodo (8) es a menudo utilizado junto con el muestreo de superficies en la investigacin de todos los problemas de higiene relacionados con la industria alimentaria.5.6 Micotoxinas:

Son metabolitos secundarios de bajo peso molecular de origen fngico, producidos en condiciones especiales de crecimiento en cosechas almacenadas y alimentos. Algunas micotoxinas pueden causar efectos sistmicos en especial en el hgado y el sistema nervioso.Entre las micotoxinas ms importantes destacan: Aflatoxinas, producidas por Aspergillus flavus y A. parasiticus Ocratoxina A, producida por Penicillium verrucosum y Aspergillus alutaceus (A. ochraceus). Tricoticenos y Fuminosinas, producidas por Fusarium spp

Se ha demostrado que las aflatoxinas y otras micotoxinas, por ejemplo, el cido Dsecalnico, pueden aerotransportarse en elevadas concentraciones en determinadas tareas como en el procesamiento de cacahuetes, pistacho y maz causando efectos txicos y carcinognicos.

Los mtodos analticos para su determinacin utilizan bien tcnicas cromatogrficas (9) o bien lneas celulares para ensayar su citotoxicidad (10).

En las tablas adjuntas se propone un esquema para la eleccin de mtodo de muestreo as como un estudio comparativo de caractersticas, ventajas e inconvenientes de los mtodos de muestreo ambiental ms comunes.

1:Frotis8:Filtracin alto caudal (5500 L/min)

2:Placas de contacto9:Impinger multietapas (55 L/min)

3:Colocacin de placas abiertas10:Impactador en cascada, 6 etapas, Andersen (28.5 L/min)

4:Filtracin a bajo caudal (1-2 L/min)11:RCS, muestreador centrfugo (40 L/min)

5:Mini-impinger (1 L/m)12:SAS, impactacin directa (90 L/min)

6:Impactador en cascada MAY (10 L/min)13:Muestreador Casella de rendija (30-700 L/min)

7:Impinger (12.5 L/min)14:Impactador Andersen monoetapa (28.5 L/min)

Algunos muestreadores se denominan por sus nombres comerciales slo para ayudar a su identificacin, sin que esto suponga su recomendacin, o que no existan otros de anlogas prestaciones.

TABLA: MUESTREO AMBIENTAL PARA AGENTES BIOLGICOS

MTODO DE MUESTREO

PROCESOVELOCIDAD YTIEMPO DE MUESTREO(L/min)/min.

VENTAJAS

INCONVENIENTES

*IMPACTACINSOBRE LQUIDO (AGI)

BURBUJEO DEL AIRE A TRAVS DE UN MEDIO LQUIDO

12,5/30* ADECUADO PARA GRAN VARIEDAD DEMICROORGANIMOS

* NO SATURACIN* DISPERSIN DE ESPORAS

* ESTERILIDAD

* TRANSPORTE EN FRIO

*IMPACTACINSOBRE AGAR (ANDERSEN)RECOGIDA DEL AIRE A TRAVS DE ORIFICIOS DE DIFERENTES TAMAOSEN PLACAS PETRI

28/1-5* SEPARACIN POR TAMAO

* PUEDE SER CALIBRADO

* GRAN EFICIENCIA

* POCA MANEJABILIDAD

* POCO ECONMICO

*IMPACTACIN EN AGAR (SAS)RECOGIDA DEL AIRE A TRAVS DE ORIFICIOSEN PLACAS RODAC

90/0,5-3

* MANEJABILIDAD

* ESCASA EFICIENCIA

*IMPACTADOR CENTRFUGO (RCS)

RECOGIDA DEL AIRE EN TIRAS DE AGAR

40/0,5

-------------------* EFICIENCIA DESCONOCIDA

* NO CALIBRACIN

* MEDIOS CULTIVOS LIMITADOS

*FILTRACIN EN MEMBRANA

RECOGIDA DEL AIRE EN FILTROS

1-2/15-60

MICROORGANISMOS TOTALES* DESECACIN DE MICROORGANISMOS

* PRDIDA DE VIABILIDAD

*SEDIMENTACIN EN PLACASPLACAS DE AGAR ABIERTAS COLOCADASEN DIFERENTES LOCALIZACIONES

?

* FCIL DE UTILIZAR ECONMICO

* DATOS NO COMPARABLES

6.CUANTIFICACIN DE LAS VARIABLES DETERMINANTES DEL RIESGO

6.1 CLASIFICACIN DEL DAO: Para la clasificacin del dao que puede causar cada agente biolgico, se ha considerado el nmero de das de baja que supondra padecer la enfermedad, as como la posibilidad o no de que sta deje secuelas, siguiendo un tratamiento adecuado.

SECUELASDAOPUNTUACIN

I.T. menor de 30 das1

Sin secuelas

I.T. mayor de 30 das2

I.T. menor de 30 das3

Con secuelasI.T. mayor de 30 das4

Fallecimiento5

(I.T.: incapacidad temporal)

A efectos de valorar el tiempo de duracin de la enfermedad, se ha tenido en cuenta la gua prctica de estndares de duracin de procesos de incapacidad temporal, publicada por la Secretaria de Estado para la Seguridad Social titulada tiempos estndar de Incapacidad Temporal

6.2. VA DE TRANSMISIN: Entendemos por va de transmisin cualquier mecanismo en virtud del cual un agente infeccioso se propaga de una fuente o reservorio a una persona.

Para la calificacin de la va de transmisin utilizaremos la siguiente tabla.

VIA DE TRANSMISINPUNTUACIN

Indirecta1

Directa1

Area3

La puntuacin final se obtiene sumando las cifras correspondientes a las diferentes vas de transmisin que presenta cada agente biolgico, en el supuesto de que tenga ms de una va. A la va de transmisin area se le ha asignado una puntuacin mayor, por resultar mucho ms fcil el contagio.

A continuacin se definen las tres posibles vas de transmisin, segn el manual para el control de las enfermedades transmisibles de la OMS:

a) Transmisin directa. Transferencia directa e inmediata de agentes infecciosos a una puerta de entrada receptiva por donde se producir la infeccin del ser humano o del animal. Ello puede ocurrir por contacto directo como al tocar, morder, besar o tener relaciones sexuales, o por proyeccin directa, por diseminacin de gotitas en las conjuntivas o en las membranas mucosas de los ojos, la nariz o la boca, al estornudar, toser, escupir, cantar o hablar. Generalmente la diseminacin de las gotas se circunscribe a un radio de un metro o menos.

b) Transmisin indirecta. Puede efectuarse de las siguientes formas:

Mediante vehculos de transmisin (fmites): Objetos o materiales contaminadoscomo juguetes, ropa sucia, utensilios de cocina, instrumentos quirrgicos o apsitos, agua, alimentos, productos biolgicos inclusive sangre, tejidos u rganos. El agente puede o no haberse multiplicado o desarrollado en el vehculo antes de ser transmitido.

Pormedio de un vector: De modo mecnico (traslado simple de un microorganismo por medio de un insecto por contaminacin de sus patas o trompa) o biolgico (cuando se efecta en el artrpodo la multiplicacin o desarrollo cclico del microorganismo antes de que se pueda transmitir la forma infectante al ser humano).

c) Transmisin area: Es la diseminacin de aerosoles microbianos transportados hacia una va de entrada adecuada, por lo regular la inhalatoria. Estos aerosoles microbianos estn constituidos por partculas que pueden permanecer en el aire suspendido largos periodos de tiempo. Las partculas, de 1 a 5 micras, penetran fcilmente en los alvolos pulmonares. No se considera transmisin area el conjunto de gotitas y otras partculas que se depositan rpidamente.

6.3 TASA DE INCIDENCIA DEL AO ANTERIOR: La tasa de incidencia de una enfermedad es un dato de gran relevancia para decidir qu microorganismo debe o no incluirse en el listado propuesto en el presente manual, as como para poder valorar correctamente el riesgo de sufrir contagio la poblacin laboral a estudio, en el desarrollo de su actividad.

Por tales motivos es conveniente conocer la tasa de incidencia de las distintas enfermedades en un periodo de tiempo determinado. En el presente caso se toma siempre el ao anterior, calculndose segn la siguiente expresin

En trabajos que impliquen manejo de animales, deber consultarse informacin referente a la posibilidad de que las enfermedades transmitidas por stos pueden padecerlas los trabajadores expuestos. Entre las pginas Web existentes, una de las ms importantes es la de la Organizacin Internacional de Epizootias (OIE): http://www.oie.int. Adems, consideramos conveniente que los tcnicos conozcan la existencia del Real Decreto 2459/1996 del Ministerio de Agricultura, Pesca y Alimentacin, por el que se establece la lista de enfermedades de animales de declaracin obligatoria. En esta pgina pueden encontrarse las enfermedades de tipo zoontico transmitidas al ser humano, entre otras cuestiones de inters.

Para calcular la puntuacin aplicable segn el mtodo propuesto, en funcin del ndice de incidencia debe utilizarse la siguiente tabla

INCIDENCIA / 100.000 HABITANTESPUNTUACIN

< 11

1- 92

10- 993

100- 9994

10005

De acuerdo con esta puntuacin, en el ejemplo considerado anteriormente asignaramos a la gripe una valoracin de 5 puntos

6.4. VACUNACIN: En este apartado se trata de estimar el nmero de trabajadores expuestos que se encuentran vacunados, siempre que exista vacuna para el agente biolgico en cuestin.

Las vacunas disponibles en la actualidad pueden consultarse en el anexo II del presente manual. Para ms informacin actualizada se puede acudir a: www.vacunas.org

VACUNACINPUNTUACIN

Vacunados ms del 90%1

Vacunados entre el 70 y el 90%2

Vacunados entre el 50 y el 69%3

Vacunados menos del 50%4

No existe vacunacin5

Caso de que no exista vacuna completamente eficaz, deber calcularse el porcentaje de trabajadores que se encontraran protegidos y se aplicara la tabla anterior.

As por ejemplo, en el caso de la gripe, el coeficiente a aplicar depender del nivel de vacunacin existente en la empresa, mientras que para el caso de un microorganismo del que no se disponga de vacunacin efectiva, se aplicar siempre una puntuacin de 5

6.5. FRECUENCIA DE REALIZACIN DE TAREAS DE RIESGO: Este factor evala el contacto en el tiempo y el espacio entre el trabajador y los diferentes agentes biolgicos objeto de la evaluacin. Para ello, deber calcularse el porcentaje de tiempo de trabajo en que stos se encuentran en contacto con los distintos agentes biolgicos objeto de anlisis, descontando del total de la jornada laboral, el tiempo empleado en descansos, tareas administrativas, tiempo para el aseo, procedimientos que no impliquen riesgo de exposicin, etc.

Una vez realizado este clculo deber llevarse a la tabla siguiente para conocer el nivel de riesgo

PORCENTAJEPUNTUACIN

Raramente: < 20 % del tiempo1

Ocasionalmente: 20 - 40 % del tiempo2

Frecuentemente: 41 - 60 % del tiempo3

Muy frecuentemente: 61 - 80 % del tiempo4

Habitualmente > 80 % del tiempo5

7.MEDIDAS HIGINICAS ADOPTADAS

Para evaluar la influencia de las medidas higinicas se ha elaborado un formulario especfico que recoge 40 apartados. Para cumplimentarlo, deber realizarse previamente un trabajo de campo, investigando los aspectos recogidos en l por el mtodo observacional directo y recabando informacin de los trabajadores evaluados, as como de sus supervisores. Igualmente la persona que evale debe decidir qu apartados no son aplicables al puesto o seccin estudiada.

Al formulario de las ediciones anteriores se han aadido 3 cuestiones referentes a la disponibilidad y uso de equipos de bioseguridad para ser utilizados ante la exposicin a agentes biolgicos de transmisin parenteral.

Para la comprobacin de la eficacia de estas cuestiones se tomaron los resultados obtenidos en la evaluacin del puesto de AUXILIAR DE QUIRFANO, dentro del SECTOR HOSPITALARIO, uno de los ms implicados y sensibles en lo que concierne a medidas de bioseguridad.

Una vez realizada la evaluacin, primeramente sin tener en cuenta las tres nuevas variables de bioseguridad en el listado de medidas higinicas y en segundo lugar, considerando las tres variables en cuestin, el test t de Student para datos apareados, con un nivel de significacin de 0,05 y 17 grados de libertad, revel que las diferencias observadas son estadsticamente significativas (t = 2.65; p = 0.0185):

Estas diferencias las aportan principalmente, aquellos microorganismos que se transmiten por va parenteral, es decir, virus de la Hepatitis B, virus de la Hepatitis C y otros virus hepticos, y virus VIH, sobre los que las tres nuevas variables de bioseguridad incluidas en la tabla de medidas higinicas tienen una influencia favorable en la reduccin del riesgo biolgico (RB). Cabe sealar tambin que, segn la informacin aportada, tendran una influencia del mismo orden de magnitud que los anteriores, las diferencias aportadas por el Mycobacterium tuberculosis y la Neisseria meningtidis, aunque su va de transmisin preferente es la area

El formulario en cuestin es el siguiente

MEDIDASNONO APLICABLE

Dispone de ropa de trabajo10

Uso de ropa de trabajo10

Dispone de Epis10

Uso de Epis10

Se quitan las ropas y Epis al finalizar el trabajo10

Se limpian los Epis10

Se dispone de lugar para almacenar Epis10

Se controla el correcto funcionamiento de Epis10

Limpieza de ropa de trabajo por el empresario10

Se dispone de doble taquilla10

Se dispone de aseos10

Se dispone de duchas10

Se dispone de sistema para lavado de manos10

Se dispone de sistema para lavado de ojos10

Se prohbe comer o beber10

Se prohbe fumar10

Se dispone de tiempo para el aseo antes de abandonar la10

zona de riesgo dentro de la jornada

Suelos y paredes fciles de limpiar10

Los suelos y paredes estn suficientemente limpios10

Hay mtodos de limpieza de equipos de trabajo10

Se aplican procedimientos de desinfeccin10

Se aplican procedimientos de desinsectacin10

Se aplican procedimientos de desratizacin10

Hay ventilacin general con renovacin de aire10

Hay mantenimiento del sistema de ventilacin10

Existe material de primeros auxilios en cantidad suficiente10

(Anexo VI Real Decreto 486/97)

Se dispone de local para atender primeros auxilios10

Existe seal de peligro biolgico10

Hay procedimientos de trabajo que minimicen o eviten la10

diseminacin area de los agentes biolgicos en el lugar de

trabajo

MEDIDASNONO APLICABLE

Hay procedimientos de trabajo que minimicen o eviten la diseminacin10

de los agentes biolgicos en el lugar de trabajo a travs de fmites

Hay procedimientos de gestin de residuos10

Hay procedimientos para el transporte interno de muestras10

Hay procedimientos para el transporte externo de muestras10

Hay procedimientos escritos internos para la comunicacin de los10

incidentes donde se puedan liberar agentes biolgicos

Hay procedimientos escritos internos para la comunicacin de los10

accidentes donde se puedan liberar agentes biolgicos

Han recibido los trabajadores la formacin requerida por el Real10

Decreto 664/97

Han sido informados los trabajadores sobre los aspectos regulados10

en el Real Decreto 664/97

Se realiza vigilancia de la salud previa a la exposicin de los10

trabajadores a agentes biolgicos

Se realiza peridicamente vigilancia de la salud10

Hay un registro y control de mujeres embarazadas10

Se toman medidas especficas para el personal especialmente10

sensible

Se dispone de dispositivos de bioseguridad?*10

Se utilizan dispositivos adecuados de bioseguridad?**10

Existen y se utilizan en la empresa procedimientos para el uso 10

adecuado de los dispositivos de bioseguridad?

* La Directiva 201/32/UE del Consejo de 10 de mayo, que aplica el acuerdo marco para la prevencin de las lesiones causadas por instrumentos cortantes y punzantes en el sector hospitalario y sanitario, obliga al empresario a que los equipos de trabajo cortopunzantes estn equipados con dispositivos de bioseguridad.

Tcnica de Prevencin 875 y que son los siguientes:

a) Fase 1: Define tres criterios indispensables que deben reunir los dispositivos de bioseguridad:

Criterio 1: El mecanismo de seguridad debe estar integrado en el equipo cortopunzante, no siendo nunca un accesorio aadido. Criterio 2: El mecanismo de seguridad ha de ser irreversible, no se podr desactivar. Criterio 3: El mecanismo de seguridad debe manifestar su correcta activacin al usuario mediante una seal sonora o visual.

Si incumple uno de estos tres criterios, ser considerado NO ACEPTABLE

b) Fase 2: Establece un gradiente de seguridad adaptado a los principios generales de la Norma UNE-EN 1050:1997.Primer principio: Equipo con dispositivo de bioseguridad seguro durante el uso previsto y el mal uso razonablemente previsible. Segundo principio: Equipo con dispositivo de bioseguridad seguro en caso de errores humanos previsibles durante el uso del equipo completo.

c) Fase 3: Se elegirn en funcin de la activacin del dispositivo de bioseguridad siendo preferente los de activacin pasiva sobre aquellos de activacin activa.

Adems, dada la trascendencia para la seguridad del trabajador y la implicacin econmica de la eleccin de los equipos, el Servicio de Prevencin deber hacer un estudio completo de los mismos. Para ello, se recomienda encarecidamente la consulta de la Nota Tcnica de Prevencin 875: Riesgo biolgico: metodologa para la evaluacin de equipos cortopunzantes con dispositivo de bioseguridad (INSHT). En esta NTP, adems de los criterios antes mencionados, se detallan una serie de recomendaciones que permiten valorar el material como aceptable, bueno, muy bueno y excelente, siendo de gran utilidad para la toma de decisiones.Para su cuantificacin se han tenido en cuenta los siguientes criterios:

a) Considerar solamente las respuestas aplicables

b) Determinar la puntuacin de las respuestas afirmativas resultantes

c) Calcular el porcentaje entre puntuacin de respuestas afirmativas resultantes y el nmero mximo de posibles respuestas

d) En funcin del porcentaje obtenido, se aplican los siguientes coeficientes de disminucin del riesgo a cada agente biolgico, segn los valores asignados en la tabla siguiente:

Resultado de las medidas higinicas adoptadas

RESPUESTAS AFIRMATIVASPUNTUACIN

< 50 %0

50 - 79 %- 1

80 - 95 %- 2

> 95 %- 3

e) Una vez obtenida esta puntuacin, se restar al valor estimado de los parmetros sobre los que influira la adopcin de estas medidas, que son: dao y va de transmisin de cada agente biolgico, con lo cual estaremos reduciendo el riesgo en funcin de las medidas higinicas aplicadas en cada caso. No obstante, por definicin metodolgica, el valor mnimo de esta diferencia ha de ser 1 mayor que 1 en todos los casos determinados, no admitindose nunca valores de 0 o negativos.

7.1 CLCULO DEL NIVEL DE RIESGO BIOLGICO (R)

Con los valores hallados se aplicar la frmula siguiente:

Puesto que las variables DAO y VACUNACIN se encuentran ntimamente relacionadas, ya que si se aumenta la tasa de vacunacin disminuir el dao e inversamente, estos factores se presentan en la expresin en forma de producto, apareciendo el resto como una suma.

En el anexo III de este documento se encuentra un caso prctico, en el que se aplica todo el mtodo indicado.

7.2. INTERPRETACIN DE LOS NIVELES DE RIESGO BIOLGICO

Una vez obtenido el nivel de riesgo (R) mediante la expresin anterior es preciso interpretar su significado:Este grupo de trabajo valid el presente mtodo aplicndolo a las distintas actividades incluidas en el anexo I del Real Decreto 664/1997 y concluyendo que el mtodo en cuestin dispone de suficiente sensibilidad para evaluar la exposicin a riesgo biolgico.

Tras la validacin se consideraron dos niveles:

Nivel de accin biolgica (NAB) Lmite de exposicin biolgica (LEB)

Entendemos como nivel de accin biolgica (NAB) aquel valor a partir del cual debern tomarse medidas de tipo preventivo para intentar disminuir la exposicin, aunque la situacin no llegue a plantear un riesgo manifiesto. No obstante, a pesar de que no se considere peligrosa esta exposicin para los trabajadores, constituye una situacin manifiestamente mejorable, de la que se derivarn recomendaciones apropiadas. Los aspectos fundamentales sobre los que se deber actuar son las medidas higinicas y el tiempo de exposicin

El lmite de exposicin biolgica (LEB) es aquel que en ningn caso y bajo ninguna circunstancia debe superarse, ya que supone un peligro para la salud de los trabajadores y representa un riesgo intolerable que requiere acciones correctoras inmediatas.

Es evidente que, dependiendo del agente biolgico al que se encuentren expuestos los trabajadores, el nivel de riesgo ser ms o menos elevado. Sin embargo, este grupo de trabajo ha puesto de relieve que al aplicar todas las medidas preventivas en ningn caso se llega a superar el valor lmite de exposicin, debiendo ser, en los casos en los que el nivel de riesgo se aproxime a este lmite, ms riguroso en su aplicacin

Los citados niveles han sido situados en:

Nivel de accin biolgica (NAB) =12. Valores superiores requieren la adopcin de medidas preventivas para reducir la exposicin.Lmite de exposicin biolgica (LEB) =17. Valores superiores representan situaciones de riesgo intolerable que requieren acciones correctoras inmediatas.

8.CONCLUSIONES

Se ha estudiado los diferentes mtodos de evaluacin de riesgos biolgicos en los distintos lugares de trabajo Se hall un nivel de accin biolgica (12) y un lmite de exposicin biolgico (17) para personas que estn sujetas a este tipo de ambiente laboral

9.RECOMENDACIONES

Incrementar el tiempo de dedicacin para esta catedra, ya que esta materia es de gran ayuda para la vida profesional de y personal de los estudiantes LINKOGRAFIA:

[1]http://www.ehu.es/documents/2458096/2577739/apendice_03.pdf

[2]http://www.revista.ingenieria.uady.mx/volumen10/emision.pdf

[3]http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Documentacion/Fichas Tecnicas/NTP/Ficheros/401a500/ntp_409.pdf[4]http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Documentacion/Fichas Tecnicas/NTP/Ficheros/601a700/ntp_609.pdf