Diagnóstico de Infecciones en las vías Respiratorias inferiores

eQBP Coronilla Herrera GabrieleQBP Trujillo Labrada Aurora

ANATOMÍA

• Las vías respiratorias bajas están constituidas por pulmones, bronquios y alveolos.

• Los pulmones están situados en la cavidad torácica y separados por el mediastino, región anatomica donde se encuentran otros órganos.

• Los pulmones están cubiertos por una membrana llamada pleura.

BIOTA NORMAL

•Coryneformes

•Neisseria sp.•Staphylococ

cus epidermidis

•Streptococcus alpha hemolítico (Grupo viridans)

Conductos Nasales

•Bacteroides sp

•Coryneformes

Nasofaringe

•Completamente estérilesTráquea,

bronquios y pulmones

ENFERMEDADES ASOCIADAS

• Neumonía. Inflamación infecciosa del parénquima pulmonar con extensión y compromiso variable del espacio alveolar (neumonía alveolar) y el intersticio (neumonía intersticial)

Neumonía

Tuberculosis pulmonar

• Infección pulmonar bacteriana causada mas frecuentemente por bacterias pertenecientes al complejo Mycobacterium tuberculosis. Caracterizada por formación de granulomas en los pulmones.

Tuberculosis pulmonar.

SÍNTOMAS Y SIGNOS

Tos

• Secreción bronquial (Esputo, caseoso, hemolítico, purulento, amarillo o

verdoso)

Fiebre acompañada de escalofríos

• Disnea

·Dolor torácico

CAUSAS NO MICROBIANAS

EPOC

• Bronquitis crónica. Involucra tos con moco prolongada.

• Enfisema. Se caracteriza por destrucción de tejido pulmonar

Enfisema

ETIOLOGÍA MICROBIANA NO BACTERIANA

Virus

• Adenovirus• Influenza• Rinovirus• Sincicial

Respiratorio

Hongos

• Cryptococcus neoformans

• Coccidioides immitis

• Histoplasma capsulatum

• Aspergillus sp• Penicillium sp

Parásitos

• Pneumocystis carinii

• Toxoplasma gondii

• Microsporas

ETIOLOGÍA BACTERIANA

• Streptococcus pneumonie.• Klebsiella pneumonie. (Enterobacterias)• Psuedomonas aeruginosa. (Pseudomonales)• Mycobacterium tuberculosis.(Micobacterias)• Staphylococcus aureus.

FACTORES DE VIRULENCIA

•Adhesinas (Fimbrias)

•Invasinas (Elastasa, hemolisinas etc)

•Toxinas (S, A, LPS)

•Cápsula•Resistencia

intrínseca y adquirida

Pseudomonas aeruginosa

•Capsula•Pilis•Sideroforos•LPS

Klepbisella pneumoniae

•Toxinas (TSST, EFT, SE),

•Enzimas (hemolisinas)

•Adhesinas, capsula

Staphylococcus aureus

•CapsulaStreptococcus pneumonie

•Factor cordón

•Sobrevida en fagocitos

•Lipoarabinomanano y los fosfatidilinositol manósidos

Mycobacterium tuberculosis

MECANISMO DE PATOGENICIDAD

Streptococcus pneumonie.• La patogenicidad de este microorganismo esta

dada por la evasión de la fagocitosis y el potencial de estimular inflamación y lesión de tejidos, todo dado por su capsula.

Klebsiella pneumoniae

• Los pilis le permiten la adherencia al epitelio respiratorio y posterior colonización del tejido pulmonar. Su capsula le permite evitar la fagocitosis.

Mycobacterium tuberculosis• Los bacilos son fagocitados por los macrófagos

alveolares. En un 30% estos fagocitos son incapaces de lisar a la bacteria debido a que esta frena la unión fago-lisosoma

Staphylococcus aureus

• Producción de adhesinas que le permite la colonización y hemolisinas que daña la membrana de las células eucarioticas.

• La capsula evade la fagocitosis.

Pseudomonas aeruginosa

• Sus pilis y fimbrias le permiten la colonización del tejido.

• Formación de biocapa• Capacidad antifagocitica contra la acción del

suero humano

PACIENTE (EDAD)

NeonatosInfantes (1-6 meses)

Niños (6 meses hasta 12 años)

Adultos (20 a 40 años)

Ancianos (mayores de 60 años)

PACIENTE (FACTORES PREDISPONENTES)

• Edad • Nivel socioeconómico• Hacinamiento• Fumadores• Inmunocomprometidos

FACTORES DEL MEDIO AMBIENTE QUE INTERVIENEN

• Contaminación

TIPOS DE DIAGNÓSTICO

• Diagnostico clínico. Sintomatología y signos clínicos

• Diagnostico microbiológico. Aislamiento e identificación del agente bacteriano.

• Diagnostico serológico. Ej. Aglutinación, PPD• Diagnostico de gabinete. Radiografía, biopsia.

DX MICROBIOLÓGICOMUESTRA DE ELECCIÓN

• Esputo.• Aspirado traqueal/ transtraqueal.• Lavado bronquial.• Lavado bronquioalveolar.• Cepillado bronquial.• Biopsia bronquial.• Aspirado de pulmón. • Biopsia de pulmón

CONSERVACIÓN DE LA MUESTRA HASTA SU PROCESAMIENTO

• Expectoración y sangre deben ser procesadas de inmediato

• En el caso de biopsia aspirado bronquial se debe colocar en un tubo con 1 mL de solución fisiológica.

ESQUEMA GENERAL DEL PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Esputo

Mycobacterium tuberculosis

Método de Petroff, para descontaminación,

concentración y cultivo

Sembrar en Medio Lowestein Jensen.

Frote teñido con Gram, Giemsa y Ziehl - Neelsen

Índice de BartlettCriterio de NomarskyCriterio de Welch y KellyBaciloscopía

S. pnumoniae, S. aureus, P. aeruginosa y

Enterobacteriaceas.

GS, Gelosa Chocolate y McConkey, los cuales se incubarán a 37ºC

Staphylococcus aureus – Agar Sal y ManitolStreptoccocus pneumoniae- GS atm CO2Pseudomona aeruginosa – Agar CetrimidaEnterobacterias - McConkey

TINCIONES BACTERIANAS A LA MUESTRA

• Se realiza Gram directamente de la muestra de esputo o expectoración.

• Un recuento de células epiteliales >5 por campo demuestra alta contaminación bucal; el recuento de polimorfonucleares en número <25 por campo implica una muestra no purulenta y por tanto no representativa.

• En caso de Mycobacterium tuberculosis se requiere realizar baciloscopia de la muestra

ENRIQUECIMIENTO DE LA MUESTRA

• La muestra no debe ser enriquecida, proviene de un lugar donde regularmente no debe de haber biota.

OTROS ESTUDIOS

• En el caso de que el agente causal sea Mycobacterium tuberculosis debe realizarse baciloscopia de la muestra.

MEDIOS DE CULTIVO

•Mycobacterium tuberculosisLowenstein Jensen – 37º por 8 semanas

•Staphylococcus aureusAgar sangre, Sal y Manito – 37º por 24-48 hrs

•Streptococcus pneumoniaeAgar Sangre – 37º en Microaerofilia 24-48 hrs

•Klebsiella pneumoniaeMcConkey – 37º por 24-48 hrs

•Pseudomonas aeruginosaAgar Cetrimida – 37º por 24-48 hrs

IDENTIFICACIÓN BACTERIOLÓGICA

Pruebas bioquímicas convencionales• Streptococcus pneumoniae• α-hemolisis en GS• Sensibilidad a optoquina• Solubilidad en bilis

Klebsiella pneumoniae

• Movilidad (-)• Citrato (+)• RM (-)• VP (+)• Citrato (+)

Mycobacterium tuberculosis• El primer nivel de identificación de especies del genero

Mycobacterium incluye:• Determinar las características coloniales y microscópicas• Características de las cepas dependiendo medio y temperatura de

desarrollo• Prueba de acumulación de niaciana

Staphylococcus aureus

• Β-hemolisis• Coagulasa (+)• Sensible a novobiocina

Pseudomonas aeruginosa

• Producción de Piocinina y fluoresceína.• Olor a masa de tortilla• TSI (k/k)• Via metabolica. Oxidativa• Crecimiento a 42 C (+)

Automatizado

• Sistema Vitek

IDENTIFICACIÓN INMUNOLÓGICA

•ELISA

•Intradermorreacción

Mycobacterium tuberculosis

•Pruebas de aglutinación

Streptcoccus pneumoniae

ANTIBIOGRAMA

• Difusión en disco• Dilución placa• Método de Kirby-Bauer (S. aureus)

TRATAMIENTO

• Mycobacterium tuberculosis– Isoniacida, rifampicina, pirazinamida, etambutol,

cicloserina, etionamida, ciprofloxacino• Streptococcus pneumoniae– Penicilinas, cefalosporinas

• Staphylococcus aureus– Vancomicina, gentamicina

• Klebsiella pneumoniae– Cefotaxima, ceftriaxona y gentamicina

• Pseudomonas aeruginosa– Quinolonas (ciprofloxacino, levofloxacino)– Cefalosporinas (ceftazidima, cefepima)

TIPIFICACIÓN

Streptococcus pneumoniae

• Reacción antígeno-anticuerpo de cómo resultado una hinchazón de la cápsula , fenómeno conocido como “quellung

• Electroforesis de campos pulsados.

Klebsiella pneumoniae

• Tipificación por antígenos capsulares (mas de 77 serotipos)

• Electroforesis por campos pulsados

Mycobacterium tuberculosis, Pseudomonas aeruginosa

• Electroforesis de campos pulsados

Staphylococcus aureus

• Serotipificación (Sistemas de Pillet y Oeding)• Fagotipificación • Electroforesis de campos pulsados

DIAGNÓSTICO DE PORTADORES

• Las vías respiratorias bajas se consideran estériles, sin embargo algunos de los agentes

patógenos causantes de enfermedades se encuentra resguardados en garganta como

Staphylococcus aureus y Streptococcus pneumoniae, en este caso se considera

realizar un Exudado Faríngeo para determinar la presencia de estos organismos.