Aplicacion en Inmunohematologia

8/17/2019 Aplicacion en Inmunohematologia

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Copyright © 1995. Depósito legal pp. 76-0010 ISSN 0378-1844. IN!"CI!NCI# $0%4&' 194-$03

Forma correcta de citar este articulo: RAMON F. MONTAÑO y EGIDIO L. ROMANO. 199. ANTI!"ER#O$ MONO!LONALE$ % $" A#LI!A!ION EN &EMATOLOGIA.. INTER!IEN!IA'()*+: 19*,'(-. "RL: tt/:00.i2tercie2cia.or3.4e

ANTICUERPOS MONOCLONALES Y SUAPLICACION EN HEMATOLOGIA.

RAMON F. MONTAÑO y EGIDIO L. ROMANO.

Ramón Montaño, biólogo venezolano con postgrado en Inmunología. Profesional de Investigación del

IVIC, en el Centro de Medicina !perimental. "ctualmente finaliza estudios a nivel de #octorado en

Inmunología en el IVIC $ su m%s reciente %rea de traba&o 'a sido el desarrollo, la producción $

caracterización de anticuerpos monoclonales 'umanos. #irección( Centro de Medicina !perimental, IVIC, "partado )*+), Caracas *-)-", Venezuela.

gidio Romano( M/dico venezolano con postgrado en 0io1uímica e Inmunología. Investigador 2itular

del IVIC, en el Centro de Medicina !perimental 3us campos principales de traba&o son la

Inmuno'ematología $ la Inmuno1uímica aplicadas fundamentalmente a enfermedades de la sangre.

#irección( 4aboratorio de 5isiopatología, Centro de Medicina !perimental, IVIC, "partado )*+),

Caracas *-)-".

RESUMEN

Desde su descu5rimie2to acia 6i2ales del si3lo /asado7 los a2ticuer/os a2

sido co2siderados mol8culas co2 u2a e2orme /ote2cialidad a2altica de5ido asu e;uisita es/eci6icidad. #ero 6ue solo des/u8s de la i2troduccilery Milstei2 e2 19? de la t8c2ica /ara /roducir i2 4itro a2ticuer/os co2 u2aes/eci6icidad /redetermi2ada7 ;ue estos reacti4os /usiero2 de ma2i6iesto sutreme2da 4ersatilidad /r@ctica. La /osi5ilidad de /roducirlos e2 3ra2desca2tidades y e2 6orma /ura y adem@s el estar 5ie2 caracteriados;umicame2te a /ermitido ;ue los a2ticuer/os mo2oclo2ales )as se llama al/roducto o5te2ido de la a/licaci


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4i4o de e26ermedades uma2as se a 4isto limitado. La /rese2cia dea2ticuer/os 2aturales a2ti,i2mu2o3lo5uli2a de rat


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id82ticos u2os a otros7 mo2oclo2ales7 todo lo ;ue ace 6alta es /oder culti4are2 6orma co2ti2ua7 e2 co2dicio2es de la5oratorio7 u2 clo2 de li26ocitos . E2 elso5re2ada2te de esos culti4os7 se te2dr@2 secretados los a2ticuer/osmo2oclo2ales deseados.

Des3raciadame2te7 dada su 2aturalea mortal7 los li26ocitos so2 i2ca/acesde crecer e2 culti4o m@s all@ de u2a sema2a. De esta ma2era7 el o5st@culo6u2dame2tal /ara /roducir a2ticuer/os e2 el la5oratorio reside e2 lo3rar culti4ar e2 6orma co2ti2ua los li26ocitos . A /ri2ci/ios de los aos sete2ta ya sedis/o2a de la ca/acidad t8c2ica /ara el culti4o i( )itro de ciertas c8lulasmali32as7 e2tre ellas los li26ocitos /ro4e2ie2tes de u2 ti/o de tumor llamadomieloma mClti/le o /lasmacitoma. Estas c8lulas tie2e2 la ca/acidad de crecerco2ti2ua y cio2o382icame2te7 es decir7 de 6orma ;ue u2a sola c8lula /uedemulti/licarse y ori3i2ar mucas otras id82ticas. E2 19?7 Geor3e =>ler y!8sar Milstei27 e2 u2 tra5aBo semi2al ;ue les 4ali< /osteriorme2te el #remioNo5el7 demostraro2 ;ue es /osi5le 6usio2ar o i5ridar c8lulas de mieloma co2

li26ocitos 7 ;ue los 5ridos resulta2tes ereda2 la ca/acidad /ara creceri2de6i2idame2te e2 culti4o y /ara /roducir a2ticuer/os7 y ;ue adem@s es/osi5le aislar del /roducto etero382eo de 6usiler y Milstei2719?+.

E2 su 6orma i2icial7 la t8c2ica descrita /or =>ler y Milstei2 /ermite la o5te2ci


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co2Bu3adas a /ortadores7 y so2 estos co2Bu3ados las /re/aracio2es usadas/ara la i2mu2iaci


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s y adem@s /or los i5ridomas li26ocito ,c8lula de mieloma. E2 culti4o7 loses/le2ocitos 2o 6usio2ados muere2 co2 el tiem/o /or ser c8lulas 2ormales. $i2em5ar3o7 las mielomatosas al ser c8lulas tumorales /uede2 4i4iri2de6i2idame2te y como se re/lica2 co2 mayor ra/ide ;ue los i5ridomas7crecera2 e2 6orma /redomi2a2te7 ao3a2do al resto de las c8lulas.

De lo a2terior se des/re2de la 2ecesidad de dis/o2er de u2 meca2ismo deselecci


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Clonamiento

#ara o5te2er u2a /re/araci


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FIGURA 1. PROCEDIMIENTO PARA LA OBTENCION DE ANTICUERPOS MONOCLONALES DE RATON. TOMADO DE

MILSTEIN (1980)

A!#ic$cione" de #o" Anicuer!o" Monoc#on$#e" de ori%en M&rido

Generalidades

De5ido a ;ue los a2ticuer/os mo2oclo2ales so2 reacti4os ;umicame2te 5ie2de6i2idos7 susce/ti5les de ser /roducidos e2 6orma /ura y e2 3ra2desca2tidades7 su uso /ote2cial es muy ete2so.


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Las a/licacio2es m@s tem/ra2as7 a 6i2es de los aos sete2ta y /ri2ci/ios de losoce2ta7 se relacio2aro2 co2 /rue5as de istocom/ati5ilidad y reco2ocimie2tode mol8culas de di6ere2ciaci


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&LA,!lase II a e4olucio2ado acia el uso de so2das de ADN y am/li6icaci


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i26ormaci


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o la toi2a al sitio /ro/icio e2 /acie2tes co2 tumores de mama7 de o4ario7 de/ulm


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3alactosa )al6a 1,-+ 3alactosa )Galili et al .7 19J*+. El /ro5lema co2 losa2ticuer/os a2ti,Gal es ;ue el aCcar 3alactosa )al6a 1,-+ 3alactosa see2cue2tra /rese2te e2 el com/o2e2te 3licosdico de las I3s de rat


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6orma di6ere2te del sistema i2mu2e uma2o7 como es el caso del 3ru/osa23u2eo R y los a2t3e2os del com/leBo /ri2ci/al de istocom/ati5ilidad&LA.

#roducción de anticuerpos monoclonales humanos

La /roducci


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)&o66ma2 et al .7 199(+ y muramil,di/8/tido )!arrol et al .7 199(+ y lacaracteriaci


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de a2ticuer/os. De ma2era ;ue7 au2 te2ie2do 8ito e2 la 6ase de aislamie2to oselecci


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c8lulas li26o5lastoides uma2as 2o 6usio2adas )se em/lea Oua5ai2a7 u2i2i5idor de la AT#,asa Na,= de la mem5ra2a celular7 /ara el cual las c8lulasuma2as ei5e2 u2a mayor susce/ti5ilidad ;ue las de rat


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FIGURA 2. ESQUEMA PARA LA PRODUCCIÓN DE ANTICUERPOS MONOCLONALES HUMANOS TOMADO YMODIFICADO DE KOBOR Y RODER! 198".

nticuerpos monoclonales de segunda generación

E2 esta secci


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nticuerpos biespec&ficos

Es 5ie2 sa5ido ;ue u2a mol8cula de i2mu2o3lo5uli2a reco2oce dosdetermi2a2tes a2ti382icos i3uales7 3racias a la eiste2cia e2 su estructura dedos /u2tos de com5i2aci


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uma2iados como u2a alter2ati4a tec2ol


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Aplicacion en Inmunohematologia

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