UNIVERSIDAD DE LA REPÚBLICA

FACULTAD DE MEDICINA- BCC6 BLOQUE 3.

¿Son los Ac Monoclonales una alternativa terapéutica a considerar para el

tratamiento del Ébola?

Br.: Felipe Duarte

Br.: José Luis Locher-

Br.: Fernanda Nuñez

Br: Valentina Vargas

¿QUÉ ES EL EBOLA?

Enfermedad infecciosa viral aguda.

Primera fotografía de EBOV del brote

en Zaire, 1976

Tasa de letalidad: hasta 70% (actualizada según revisión

bibliográfica).

Nuevo brote surgido en 2014: Tasa entre 55-60%

FAMILIA: FILOVIRIDAE.

GÉNERO: FILOVIRUS. (FORMA FILAMENTOSA).

ARN monocatenario lineal de

polaridad negativa.

Nucleocápside proteico con

forma tubular rodeado de cápside..

Membrana espiculada.

Glicoproteína de envoltura (GP)

es la responsable de la unión del

virus al receptor y la fusión de

la membrana viral a la de la

célula hospedadora.

Datos actuales sugieren que región tipo Mucina (mucin-like region- MLR)

Sobre GP juega un rol importante en union a células objetivo.

REPLICACIÓN DE EBOV.

ARN monocatenario negativo es complementario del ARNm y por lo tanto debe

convertirse a ARN + por una ARN pol antes de la traducción.

(-)ssARN no es infeccioso, debe ser traducido en ARN +.

ESTRUCTURA Y PROPAGACIÓN.

SIGNOS Y SÍNTOMAS:

Produce:

Fiebre hemorrágica.

Sintomatología:

Fiebre (solo 87% presentan)

Mialgia

Vómitos

Diarrea

Fallo renal

Fallo hepático

Hemorragia masiva interna y externa

Resultados de laboratorio muestran:

• Leucopenia

• Plaquetopenia

• Elevación de las enzimas hepáticas.

PATOGENIA

Células objetivo del virus:

• Células del Sistema Monocítico Fagocitario que liberan:

Citoquinas y quimioquinas TORMENTA DE CITOQUINAS

TFN

• CDs incapaces de madurar y regular la activación de LT.

PATOGENIA

Células endoteliales se infectan en la última etapa de la enfermedad.

Glicoproteina GP de envoltura mayor determinante de a injuria vascular.

Citoquinas contribuyen a:

Desarrollo de coagulación intravascular diseminada.

Inducción de procoagulantes y

Moléculas de adhesión y la destrucción del tejido.

Lisis masiva de:

Linfocitos en bazo, timo y nódulos linfáticos en etapas tardías de la infección

Citolisis masiva, disfunción inmune, cambios de fluidos, coagulación

microvascular y hemorragia intersticial

Fallo multiorgánico: SHOCK

DIAGNÓSTICO.

Previamente se debe descartar otras enfermedades:

Paludismo,

Fiebre tifoidea

Cólera,

Leptospirosis.

Virus del Ébola solo puede diagnosticarse mediante:

• ELISA

• Prueba de detección de antígenos.

• Prueba de seroneutralización

• RT-PCR: Reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa

• Cultivo celular.

TRATAMIENTO

Timeline of Infection Diagnostic tests available

Within a few days after symptoms begin •Antigen-capture enzyme-linked immunosorbent

assay (ELISA) testing

•IgM ELISA

•Polymerase chain reaction (PCR)

•Virus isolation

Later in disease course or after recovery •IgM and IgG antibodies

Retrospectively in deceased patients•Immunohistochemistry testing

•PCR

•Virus isolation

Información extraída de CDC (Center of Disease Control)

Las personas que se recuperan de la infección desarrollan anticuerpos

que pueden durar 10 años. (otra posible solución)

TRATAMIENTO

Actualmente: Cuidados médicos de apoyo:

Paliativo.

Rehidratación

Reposición electrolítica.

En curso: Ac. Monoclonales.

Pruebas experimentales que mostraron resultados prometedores.

•Proteína C humana recombinante activada

•Proteína C2 anticoagulante de nemátodo recombinante

•ARN interferencia

•Oligomeros morfolino fosforodiamidato cargado positivamente

•AC MONOCLONALES

Supervivencia ante Dx y tto con MB003.

Método de estudio:

Tratamiento:

7/9 animales: PCR positivo antes de la fiebre. Titulo viral varia entre las poblaciones en tiempos paralelos.

Animales que eran mas lentos en desarrollar títulos virales tuvieron muchas mas

probabilidades de sobrevivir a la prueba, para aquellos dos donde el desencadenador

de RT-PCR vino después de la fiebre.

Conclusión:

Tto eficaz si se inicia pronto se detecta viremia.

Entre animales tratados , 43% (3/7) sobreviven.

Dos de ellos mostraron síntomas mínimos, el

tercero mostro síntomas moderados

Controles (2) fallecen.

Controles históricos (4), sucumben.

Ac monoclonales: Cocktail con MB003/ZMAb

Ac quimérico: MB003 (mAbs c13C6, h13F6, c6D8)

ZMAb: Ac murino (m1H3, m2G4, m4G7)

o Estudio con chanchos de Guinea, se les da una dosis de mAbs de

forma separada cada uno 1 día post infección con EBOV-M-GPA (virus

adaptado al chancho de variante Mayinga)

NHM se les dio tres dosis de cada uno de los antes mencionados mAbs

24 post infección con de EBOV variante Kikwit (EBOV-K)

Solo tratamiento con c13C6 mostro sobrevivientes

Combinaciones utilizadas:

ZMapp 1: c13C6, c2G4, c4G7.

ZMapp 2: c13C6, c1H3, c2G4.

ZMapp 3: c13c6, c1H3, c4G7.

ZMapp1 es quien muestra mayor protección: 4/6

Para extender vida media de los Ac

en humanos y facilitar aceptación

clínica, Ac murinos (mAbs) fueron

quimerizados con regiones

constantes de humanos (c1h3, c2G4

y c4G7)

Una vez comprobado que el mAbs mas efectivo era c13C6, se lo usa

en combinación con tres mAbs de ZMAb.

Se obtiene que Zmapp1 muestra mejor protección. Se continua con

experimentación para testear el límite de protección.

NHPs tratados con Zmapp-1.

•Población: tres grupos de 6 macacos mas grupo

control de 3.

•Adm 50mg/kg/dosis espaciado 3 dias.

•Luego de desafío letal i/m con 1000x TCID50 de

EBOV-K se trato los animales con Zmapp :

Grupo D: 3-6-9 dpi

Grupo E: 4-7-10 dpi

Grupo F: 5-8-11 dpi.

Grupo G: CONTROL con buffer fosfato salino

ó IgG.: SUCUMBEN.

Abnormalidad en conteo sanguineo

y BQ del suero en TODOS los grupos:

Fiebre, leucocitosis, trombocitopenia

y. viremia.

ZMAPP1 EFECTIVO PARA EBOV-G TAMBIÉN?

Comparación directa de la secuencia de amino

ácidos entre EBOV-G y EBOV-K mostró que los

epítopes objetivo de Zmapp no estaban mutados

entre las dos variantes.

La concentración efectiva de ambas variantes

presenta diferencia significativa. A misma

concentracion de c13C6, mayor efectividad en

EBOV-G

OTRAS SOLUCIONES POSIBLES

• No se obtienen de la literatura recomendada.

• Utilización de suero convaleciente:

Obtenida de pacientes que se infectó y logró la cura efectivamente.

Se debe de tener en cuenta el grupo sanguíneo (ABO) entre D – R, así

como el donante tampoco debe tener enfermedades.

• Vacunas con ADN recombinante:

Pequeños anillos de ADN llamados plásmidos en los que se introduce tan

sólo la pequeña fracción del material genético del patógeno contra el que

se pretende inmunizar.

Penetra dentro de la célula y llega al núcleo, para generar desde allí la

producción de los antígenos del patógeno que desencadenarán la

respuesta inmune

CONCLUSIONES…VENTAJAS/DESVENTAJAS

Se ha comprobado la eficacia del Zmapp en más de la mitad de la población a la

que se aplicó.

Producción transgénica a partir en planta de tabaco (Nicotiana Benthamiana) lo

que supone una fácil obtención.

No se tiene en cuenta las compatibilidades del suero de paciente receptor.

Es caro, no hay stock disponible al momento.

El número de personas tratadas no garantiza su efectividad, de hecho no ha

pasado la fase 1 de experimentación.

Se debe tener en cuenta que el virus mute, y el Ac producido, no resulte efectivo.

No supone un mecanismo de profilaxis, sino más bien de tratamiento luego de

exposición.

Ante posible re-exposición existe incertidumbre de si sigue el individuo siendo

susceptible al virus.